FEATURES OF CLONAL MICROPROPAGATION OF ROSES OF DIFFERENT TYPES AT THE ELONGATION STAGE

Роза (Rosa spp.) — традиционно и широко используемая декоративная культура, пригодная для выращивания как в открытом, так и в защищённом грунте. Помимо эстетической ценности имеет еще одно важное направление использования, а именно парфюмерию. Основными потребительскими свойствами этого растения являются длительный период цветения, большое разнообразие сортов, устойчивость к заморозкам, высокий уровень содержания ценного эфирного масла. Однако существует ряд сложностей, которые ограничивают возможности выращивания посадочного материала роз. Преимущественно саженцы розы получают в результате прививки, для чего необходимы подвойный и привойный материал, а также высоко квалифицированные кадры для выполнения окулировки. Зеленое черенкование возможно, но также сопряжено с рядом проблем, поскольку требует наличия специализированного оборудования (туманообразующих установок) и содержания соответствующих маточно-сортовых насаждений. Метод клонального микроразмножения, который имеет определенное сходство с зелёным черенкованием, реализуется в стерильных лабораторных условиях, где в качестве маточных используются культуры in vitro, и при этом проведение работ не связано с сезонными ограничениями. Однако в микроразмножении роз, как и практически всех культур умеренной климатической зоны, есть наиболее проблемный этап, связанный с адаптацией микрорастений, результативность которого редко превышает 30% и в значительной степени зависит от физических параметров микрочеренков, используемых для укоренения

Эксперименты проводили на базе метода клонального микроразмножения по Бутенко. Объектами исследования служили стерильные культуры розы Aloha Kordana (AK, миниатюрная роза, Германия) и Circle of life (CoL, роза флорибунда, Германия), обладающие высокой декоративностью и устойчивостью к ряду грибных болезней. Асептические операции выполняли в условиях ламинар-бокса. Растительный материал культивировали в светокомнате при 16-ти часовом световом дне, освещенности на уровне растений 4500–5000 лк и температуре 22…26ºС. На этапе пролиферации, в пассажах предшествующих элонгации, изучали питательные среды с различным минеральным составом солей: MS, ½ MS, WPM (Woody Plant Medium) с добавлением цитокининов бензиламинопурин (6-БАП) и изопентиладенин (ИПА) в концентрации 1,0 мг/л. Для выполнения пролиферации использовали пробирки ПБ-2-21-200. По истечении 4-х недель культивирования для проведения первой фазы элонгации, полученные конгломераты высаживали в конические колбы КН-1 емкостью 100 мл на аналогичные по минеральному составу питательные среды, но концентрацию 6-БАП при этом снижали до 0,05 мг/л, а в опытный вариант еще дополнительно включали гибберелловую кислоту (ГК3) в концентрации 0,5 мг/л. Повторность во всех вариантах была 5-кратная. Спустя 4 недели для проведения второй фазы элонгации обе партии материала вновь пересадили на аналогичные по минеральному составу среды с 0,05 мг/л 6-БАП, но без использования дополнительных компонентов. Учёты длины микрочеренков проводили через 4 недели после посадки конгломератов на элонгацию. Полученные первичные данные подвергли статистической обработке на основе дисперсионного анализа с использованием таблиц Microsoft Office Excel 2024 для выявления зависимостей между изучаемыми факторами

Изначально, на этапе пролиферации конгломератов побегов сортов розы AK и CoL при использовании питательной среды Мурасиге-Скуга (MS) с добавлением 1,0 мг/л 6-БАП было отмечено избыточное каллусообразование на основаниях конгломератов, что является нежелательным эффектом. Причиной тому могло быть несоответствие минерального состава требованиям культуры, либо специфическая реакция растительных тканей на высокие концентрации цитокининов. Подобный эффект регистрировался стабильно на протяжении периода размножений изучаемых сортов. Развивающиеся конгломераты отличались нестабильным ростом и развитием, состояли преимущественно из малочисленных коротких побегов длиной не более 0,5–1,0 см, что представляло проблемы для дальнейшей работы с ними. Была предпринята попытка получения побегов большей длины, которые были бы пригодны для этапа ризогенеза. Поскольку хорошо известно, что кратное снижение концентрации цитокининов в составе питательной среды способствует частичному восстановлению апикального доминирования, то в связи с этим изучали последействие использования различных сочетаний регуляторов роста на этапе пролиферации при переходе от высоких концентраций цитокининов к низким, гибберелловой кислоты в первой фазе элонгации, а также состав минеральных солей и их воздействие на рост микрочеренков сортов розы АК и CoL (табл. 1 и 2). Поскольку изучаемые сорта розы относятся к разным сортотипам и принципиально отличаются по характеру роста и развития парного их сравнения не проводили. Промежуточный анализ результатов первой фазы элонгации не выявил очевидного эффекта удлинения побегов обеих сортов роз в изучаемых вариантах, даже несмотря на то, что кроме контроля, в них был использована гибберелловая кислота, вещество, известное подобными свойствами. Как правило, в каждой колбе насчитывалось 2–3 побега высотой 1,0–1,2 см, чего было явно недостаточно. Эффект последействия гибберелловой кислоты на розе сорта Aloha Kordana проявился только на второй фазе элонгации вариантах со средой MS, практически независимо от типа цитокинина, который использовали на стадии пролиферации. В то же время, и в контроле, где ГК3 не использовали, на фоне 6-БАП был получен аналогичный результат, однако во всех случаях число побегов длиной около 1,5 см увеличилось до 4–6, причем, как правило, один из них достигал длины 3–4 см (рис. 1). Среда WPM оказалась для этого сорта непригодной.

Несколько иной была картина с другим сортом розы Circle of Life. Очевидным оказалось преимущество использования 6-БАП на стадии пролиферации, что во всех вариантах обеспечило существенное превышение длины побегов в сравнении с ИПА, а на средах MS и WPM при участии ГК3 побеги достигли длины 2,9-3,1 см, что существенно превысило контроль (рис. 2). Среда ½ MS уступила по эффективности на фоне обоих цитокининов.

Микрочеренки розы Aloha Kordana после двухфазной элонгации, на питательной среде MS

ГК3 0,5 мг/л + 6-БАП 0,05 мг/л/ 6-БАП 0,05 мг/л

DOI:10.60797/IRJ.2026.168.79.3

Display full sizeDownload image

Микрочеренки розы Circle of Life, прошедшие две фазы элонгации, на питательной среде WPM

ГК3 0,5 мг/л + 6-БАП 0,05 мг/л/ 6-БАП 0,05 мг/л

DOI:10.60797/IRJ.2026.168.79.4

Display full sizeDownload image

Подтвердилось существующее мнение о розе, как культуре достаточно сложной для размножения методом апикальных меристем. Совершенно очевидно, что требуется дополнительное изучение других вариантов питательных сред, коррекции их минерального состава, поскольку коэффициент размножения остается весьма низким, в сравнении с многими другими плодовыми и декоративными культурами. Концентрации цитокининов 1,0 мг/л и выше не способствуют полноценному развитию пролиферирующих культур, а в основании микрочеренков активно идут процессы дедифференциации тканей и формируется каллус. Кроме того, превышение длительности пассажа более, чем 3 недели негативно сказывается на жизнеспособности конгломератов. Дополнительного изучения требует также вопрос отложенного последействия гибберелловой кислоты в последующих пассажах, примеры чего есть в опубликованных источниках

Разработка полноценной технологии размножения роз различных сортотипов на основе метода клонального микроразмножения возможна только при комплексном решении вопросов и повышении эффективности пролиферации конгломератов, элонгации микропобегов, укоренения микрочеренков и адаптации микрорастений, что требует подбора минерального состава питательных сред, типа и концентраций регуляторов роста, оптимизации абиотических факторов. Растения роз, полученные методом клонального микроразмножения, могут быть с успехом использованы для закладки маточных насаждений роз различных сортотипов. Ввиду выявленной общей для изученных сортообразцов особенности, выразившейся в слабом росте побегов на стадии элонгации, важным элементом является реализация её в 2 этапа, при том, что на 1 этапе к составу питательной среды добавляется гибберелловая кислота в концентрации 0,5 мг/л. Растения роз, полученные методом клонального микроразмножения, могут быть с успехом использованы для закладки маточных насаждений роз различных сортотипов.