HISTOMETRY OF RABBIT UTERUS

Малакшинова Л.М.¹, Попов А.П.²

¹Кандидат биологических наук, доцент, ²Доктор ветеринарных наук, профессор, Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.Филиппова

ГИСТОМЕТРИЯ МАТКИ КРОЛЬЧИХ

Аннотация

В статье описаны структурная организация матки крольчих c рождения до наступления половой зрелости, динамика гистометрических показателей и степень их корреляции. Матка крольчих не полностью дифференцирована при рождении. Перестройки стенки матки от органа с незрелой гистоархитектурой  до достижения полного его развития включают появление и распространение маточных желез, усиление складчатости эндометрия и развитие и рост миометрия. Значительные связи обнаруживаются  между  количественными изменениями структур матки, а также между ними и возрастом.

Ключевые слова: крольчихи, матка, эпителий, гландулоциты,  железы,   эндометрий, миометрий

Malakshinova L.M.¹, Popov A.P.²

¹PhD in Biology, associate professor, ²PhD in Veterinary Medicine and Science, professor, Buryat State Agricultural Academy named after V.R.Filippov

HISTOMETRY OF RABBIT UTERUS

Abstract

The purpose of this study was the estimation of rabbit uterus development, based on histological and histometric examination. Rabbit uterus is not fully differentiated at birth. Transformational events of the uterine wall from histoarchitectural infancy to maturity include appearance and proliferation of uterine glands, development of endometrial folds, and growth of the myometrium. Significant correlations were found beeetween quantitative changes of the structures of the uterus, as well as between them and the age.

Keywords: rabbit, uterus, epithelium, glandulocytes, glands, endometrium, myometrium

Количественная оценка органа позволяет с большей точностью охарактеризовать его структурно – функциональную дифференцировку.

Целью настоящих исследований явилось изучение возрастных количественных изменений,  сопровождающих формирование и развитие тканей стенки матки крольчих от рождения до 6 месяцев.

Материалы и методы исследования.

Кусочки из средней части рогов матки новорожденных, 15- суточных, 1-,2-,3-,4-,5-,6- месячных крольчих фиксировали в жидкости Карнуа  и заключали в парафин. Гистоморфологию изучали на срезах, окрашенных гематоксилином Эрлиха и  эозином, по ван Гизон, железным гематоксилином по Гейденгайну. Высоту покровного, железистого эпителия, толщину эндометрия, миометрия, диаметр желез измеряли  в 20 полях зрения с использованием морфометрического программного обеспечения «Micromed Images», захват изображений осуществляли цифровой камерой  MicroCAM 5М, адаптированной к микроскопу Axiostar (C.Zeiss). Статистическую обработку результатов измерений проводили с использованием инструментов Описательная статистика, Корреляция, Регрессия пакета анализа MS Office Excel 2007. Силу и направление связи при линейной зависимости между  признаками вычисляли по Пирсону (r). В случае нелинейной зависимости связь между признаками оценивалась с помощью индекса корреляции (R). Оценку значимости уравнения регрессии в целом проводили с помощью F - критерия Фишера, для суждения о качестве регрессионного уравнения определяли коэффициент детерминации (R²). Критический уровень значимости не превышал 0,05. Интерпретацию данных статистического анализа проводили по Гланц С. [1], Лакину Г.Ф [2].

Результаты исследования и их обсуждение. У новорожденных крольчат поверхность эндометрия ровная, покрыта однослойным столбчатым эпителием. Высота эпителия составляет 21,2±0,24 мкм, толщина эндометрия равна 86,1±1,87 мкм. Под эпителием находится слой соединительной ткани, состоящий из тесно расположенных клеток, отдельные клетки делятся. Мышечные клетки не выявляются. Матку покрывает мезотелий. Васкуляризация органа очень слабая. У 15-суточных крольчих в стенке органа различаются слизистая, мышечная и серозная оболочки. Слизистая оболочка образует невысокие складки, толщина ее увеличивается 117,5±5,69 мкм (P<0,01). Эпителий слизистой оболочки однослойный столбчатый, становится значительно ниже -10,6±0,23 мкм (P<0,001). В отдельных участках эпителия закладываются железы, клетки его образуют впячивания в подлежащую соединительную ткань. Развитие маточных желез у млекопитающих обычно начинается во время раннего постнатального периода  и представляет собой почкование зарождающихся желез из эпителия, выстилающего полость органа [4,5,6,8]. В собственно слизистой клетки располагаются относительно равномерно, не так плотно, как у новорожденных. Мышечная оболочка представлена циркулярным слоем плотно расположенных миоцитов и отдельными продольными пучками миоцитов, окруженными соединительной тканью, ее толщина - 55,5±2,14 мкм. Толщина эндометрия одномесячных кроликов составляет 121,5±5,75 мкм, высота эпителия уменьшается- 7,6±0,15 мкм (P<0,001). Ядра эпителиоцитов овальные, занимают значительную часть клетки, хроматин их в виде зерен и глыбок различной величины. Впячивания эпителиоцитов в собственную пластинку становятся более заметными. В мышечной оболочке, толщина которой составляет  60,5±1,63 мкм, сильнее развит циркулярный слой, между внутренним кольцевым и наружным продольным слоями проходит сосудистый слой, представленный соединительной тканью с кровеносными сосудами различных калибров. В 2 месяца  усиливается складчатость эндометрия. Эпителий, выстилающий его, однослойный столбчатый. Толщина эндометрия равна 170,4±10,01 мкм (P<0,01) , высота эпителия - 8,4±0,22 мкм (P<0,05). Продолжается закладка и формирование желез. В более глубоких пролифератах эпителиоциты расходятся, и образуются железы в виде коротких трубочек. Эпителий желез однослойный столбчатый, высота его составляет 7,3±0,16 мкм, диаметр желез равен 18,9±0,72 мкм. Ядра гландулоцитов округло - овальные, содержат зерна хроматина различной величины. Клетки собственной пластинки эндометрия располагаются рыхло, между ними проходят тонкие коллагеновые волокна. Увеличивается количество кровеносных сосудов. Миометрий становится толще – 162,3±2,58 мкм (P<0,001). У 3-месячных крольчих эпителий слизистой оболочки однослойный столбчатый, высота его равна 10,1±0,30 мкм. Овальные или сжатые с боков ядра эпителиоцитов располагаются не на одном уровне. Усиливается складчатость эндометрия, толщина его, как и миометрия, увеличивается и составляет соответственно 444,9±26,11 мкм (P<0,001) и 303,6±11,58 мкм (P<0,001). Количество желез увеличивается,  а некоторые только закладываются. В железах, закладка которых произошла раньше, гландулоциты становятся выше – 8,7±0,21 мкм (P<0,01), диаметр их увеличивается– 23,8±0,62 мкм (P<0,01), ядра железистых клеток локализуются в базальной части.  Толщина эндометрия  4 - месячных крольчих равна 488,1±34,54 мкм (P<0,01), выстилающий его эпителий однослойный столбчатый, высота его составляет 11,3±0,24 мкм (P<0,001). Железы построены однослойным столбчатым эпителием. Диаметр желез становится больше - 28,6±0,78 мкм (P<0,01), также увеличивается высота гландулоцитов - 10,6±0,24 мкм (P<0,001). Собственная пластинка эндометрия богата волокнами, расположение клеток неравномерное, их больше в подэпителиальной зоне. Значительно усиливается васкуляризация органа. Кровеносные сосуды обнаруживаются по всей толще слизистой оболочки, много их в миометрии и периметрии. Мышечная оболочка представлена толстыми пучками миоцитов, ее толщина – 462,8±9,24 мкм  (P<0,001). Эндометрий 5 - месячных крольчих собран в высокие складки, толщина его составляет 578,0 ± 39,76 мкм (P<0,01). Высота эпителия достигает 12,8± 0,31 мкм (P<0,01). Ядра его клеток преимущественно овальные, иногда сжатые с боков, располагаются на разных уровнях. Маточные железы глубже проникают в собственную пластинку слизистой оболочки, высота гландулоцитов равна 10,8±0,09 мкм, диаметр желез – 31,7±0,67 мкм (P<0,05). Ядра железистых клеток располагаются в базальной части. В слизистой оболочке выявляется много лейкоцитов, которые мигрируют в эпителий. Границы между слоями в миометрии становятся нечеткими, так как мышечные пучки между циркулярным и продольным слоями приобретают косое направление, его толщина значительно увеличивается – 1042,2±9,83 мкм (P<0,001).  Эпителий эндометрия 6 - месячных крольчих однослойный столбчатый, высота его равна 13,5±0,24 мкм. Об однослойном столбчатом эпителии  матки половозрелых крольчих сообщают авторы [3,7]. Складки эндометрия высокие, толщина его составляет 947,0±73,54 мкм (P<0,01). Заметно увеличиваются просветы желез, их диаметр - 39,3±0,70 мкм (P<0,001), высота гландулоцитов составляет 13,5±0,24 мкм. Толщина миометрия достигает 1294,3±35,06 мкм (P<0,01).

Данные корреляцонно - регрессионного анализа гистометрических показателей матки крольчих представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Корреляционно - регрессионный анализ гистометрических показателей матки крольчих

Примечание: * - Р<0,05;    ** - Р<0,01;     *** - Р<0,001

Между высотой покровного и железистого эпителия, высотой гландулоцитов и диаметром желез, диаметром желез и толщиной эндометрия, толщиной эндометрия и высотой покровного эпителия, толщиной эндометрия и миометрия, а также этими показателями и возрастом выявляются сильные зависимости.

Заключение. Таким образом, в раннем постнатальном периоде онтогенеза в матке крольчих происходят определенные морфологические перестройки, сопровождающиеся количественными изменениями. Данные корреляционно - регрессионного анализа демонстрируют сильную связь изменений  гистометрических показателей структур органа, а также высокую степень хроносопряжения между ними и возрастом.

Литература

1. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. – М.: Практика, 1998. - 495с.
2. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. – 4-е изд. – М.: Высшая школа, 1990. – 352 с. – (Учебник для высших учебных заведений).
3. Barberini, F. Changes in the surface morphology of the rabbit endometrium related to the estrous and progestational stages of the reproductive cycle / F. Barberini, S. Sartori, P. Motta, and J. A. Van Blerkom // Cell Tiss. Res. - 1978. - №190. –P. 207-222.
4. Branham, W.S. The postnatal ontogeny of rat uterine glands and age-related effects of 17 betaestradiol. / D.M. Sheehan, D.R. Zehr, E. Ridlon, C.J. Nelson // Endocrinology. – 1985. -№ 117. - P. 2229 – 2237
5. Cooke, P.S. Uterine glands: development, function and experimental model systems/ T.E. Spencer, F.F. Bartol,K. Hayashi // Mol. Hum. Reprod.- 2013. – Vol.19. - № 9. -P.547-558.
6. Gray, C.A. Developmental biology of uterine glands / C.A. Gray, F.F. Bartol, B.J. Tarleton , A.A. Wiley , G.A. Johnson , F.W. Bazer,  T.E. Spencer // Biol. Reprod.  - 2001. - Vol. 65.- № 5. - P.1311-1323.
7. Motta, P.M.Scanning electron microscopy of the endometrium during the secretory phase (rabbit) / P.M.Motta,P.M. Andrews // J. Anat. - 1976.- № 122. – P. 315-322.
8. Spencer, T.E. Comparative developmental biology of the uterus: insights into mechanisms and developmental disruption / T.E. Spencer, K.A. Dunlap // J. Filant. Mol. Cell Endocrinol. – 2012. - № 354. - P. 34 – 53.

References

1. Glants S. Mediko-biologicheskaya statistika / S. Glants. – M.: Praktika, 1998. - 495s.
2. Lakin G.F. Biometriya / G.F. Lakin. – 4-ye izd. – M.: Vysshaya shkola, 1990. – 352 s. – (Uchebnik dlya vysshikh uchebnykh zavedeniy).
3. Barberini, F. Changes in the surface morphology of the rabbit endometrium related to the estrous and progestational stages of the reproductive cycle / F. Barberini, S. Sartori, P. Motta, and J. A. Van Blerkom // Cell Tiss. Res. - 1978. - №190. –P. 207-222.
4. Branham, W.S. The postnatal ontogeny of rat uterine glands and age-related effects of 17 betaestradiol. / D.M. Sheehan, D.R. Zehr, E. Ridlon, C.J. Nelson // Endocrinology. – 1985. -№ 117. - P. 2229 – 2237
5. Cooke, P.S. Uterine glands: development, function and experimental model systems/ T.E. Spencer, F.F. Bartol,K. Hayashi // Mol. Hum. Reprod.- 2013. – Vol.19. - № 9. -P.547-558.
6. Gray, C.A. Developmental biology of uterine glands / C.A. Gray, F.F. Bartol, B.J. Tarleton , A.A. Wiley , G.A. Johnson , F.W. Bazer,  T.E. Spencer // Biol. Reprod.  - 2001. - Vol. 65.- № 5. - P.1311-1323.
7. Motta, P.M.Scanning electron microscopy of the endometrium during the secretory phase (rabbit) / P.M.Motta,P.M. Andrews // J. Anat. - 1976.- № 122. – P. 315-322.
8. Spencer, T.E. Comparative developmental biology of the uterus: insights into mechanisms and developmental disruption / T.E. Spencer, K.A. Dunlap // J. Filant. Mol. Cell Endocrinol. – 2012. - № 354. - P. 34 – 53.