EVALUATION OF ACACIA NILOTICA AQUEOUS EXTRACT APPLICATION ON MORPHOLOGICAL AND FUNCTIONAL CHANGES IN KIDNEYS FROM RATS WITH ALLOXAN DIABETES
EVALUATION OF ACACIA NILOTICA AQUEOUS EXTRACT APPLICATION ON MORPHOLOGICAL AND FUNCTIONAL CHANGES IN KIDNEYS FROM RATS WITH ALLOXAN DIABETES
Abstract
The aim of the work was to evaluate the application of aqueous extract of AN on morphological and functional changes in kidneys from rats with alloxanic diabetes. The present study showed that alloxan diabetic rats developed severe hyperglycaemia and significant renal dysfunction. Administration of AN aqueous extract at dose (0.125 g/kg and 0.25 g/kg body weight) statistically reduced glucose levels in groups 5 and 6 significantly to 5.9 ± 0.09 mmol/l and 4.6 ± 0.07 mmol/l, respectively, p<0.05. Administration of AN extract had antihyperglycaemic effect in a dose-dependent manner. AN significantly improved renal function in group 5 and 6 (reduction in serum urea and creatinine titres was greater than in group 7).
1. Введение
Диабетическая нефропатия – серьезное осложнение сахарного диабета, приводящее к терминальной стадии почечной недостаточности
, , . На ранних этапах диабетическая нефропатия характеризуется гипертрофией клубочков и эпителиальных клеток канальцев, утолщением базальных мембран и усилением почечного кровотока , , утолщением клубочковых и канальцевых мембран и тубулоинтерстициальным фиброзом, все это способствует прогрессирующему ухудшению функции почек. Растения сыграли важную роль в создании новых лекарственных препаратов, например: изучение свойств GALEGA OFFICINALIS привело к синтезу метформина. ACACIA NILOTICA (AN) обладает многими биологическими эффектами, включая антигипертензивный, спазмолитический, антидиабетический, гипохолестеринемический, а также гипогликемический , , . Цель исследования – оценка применения водного экстракта AN на морфологические и функциональные изменения в почках у крыс с аллоксановым диабетом.2. Методы и принципы исследования
Приготовление водного экстракта AСАСIA NILOTICA: Листья AN 1 кг высушивали в духовке при 50 °C и измельчали для получения порошка AN, затем его смешивали с 1 л кипящей воды в течение 1 часа. Полученную смесь фильтровали, и готовили порошкообразную лекарственную форму. Сухой экстракт хранили при температуре 4 °C до использования. Порошок AN растворяли в физиологическом растворе натрия хлорида и вводили перорально в дозе 0,125 г/кг веса тела. В эксперимент включены беспородные крысы (вес: 155-197 г). Животные были разделены на семь равных групп (по шесть крыс в каждой), размещенных в стандартных условиях вивария. Крысы были разделены на две основные группы: нормальные недиабетические группы; группа 1 (контроль), группам 2 и 3 вводили экстракт AN 0,125 г/кг и 0,25 г/кг массы тела соответственно. Группы 4, 5, 6 и 7 получили однократную дозу подкожного (п\к) введения раствора аллоксана-тетрагидрата (АЛТТ) из расчета 30 мг/ на 100 г массы тела. Диабетические группы: группа 4 была контрольной диабетической и получала физиологический раствор натрия хлорида 0,9%-5 мл; группы 5 и 6 получали перорально 0,125 г/кг и 0,25 г/кг массы тела соответственно. В то время как группа 7 получала препарат глибенкламид (25 мг/кг, таблетки измельчались до порошка, растворяли в дистиллированной воде и вводили перорально). Кровь для анализа забиралась из хвостовой вены (на 1-е, 7-е, 14-е, 21-е, 28-е сутки с момента начала эксперимента), анализ уровня гликемии, мочевины и креатинина проводился на анализаторе HUMASTAR 600 (Германия). Крысы выводились их эксперимента на 28-е сутки. Гистопатологические исследования: Почки крыс из всех групп были удалены и немедленно зафиксированы в 10% нейтральном формалине, обезвожены в спиртовой серии, очищены в ксилоле и залиты в парафин. Были приготовлены срезы, окрашенные гематоксилином и эозином для фотомикроскопической оценки. Для статистической обработки был применен t-критерия Стьюдента и критерий Манна-Уитни. Результаты продемонстрированы следующим образом: М ± m (М – среднее, m – ошибка среднего). Данные принимались за значимые при р<0,05.
3. Результаты и их обсуждение
Рисунок 1 - Препарат почки крысы:
А - из группы 6, получавшей AN в дозе 0,25 г/кг; Б - из группы 7, получавшей глибенкламид в дозе 25 мг/кг
Примечание: А - окраска гематоксилин и эозин,х400; нормальные клубочки (Кк) с нормальными канальцами (к), с единичными пикнотическими клетками; Б - окраска гематоксилин и эозин, х400; нормальные канальцы (к) со слегка сморщенными клубочками (Кк), геморрагической зоной между почечными канальцами (длинная стрелка) и несколькими пикнотическими клетками (маленькая стрелка)
4. Заключение
Настоящее исследование показало, что у крыс с алоксановым диабетом развилась тяжелая гипергликемия, и выраженные нарушения функции почек. Достоверно известно, что окислительный стресс – значимый триггер в патофизиологии диабетической нефропатии. Как гипергликемия, так и активация ренин-ангиотензиновой системы играют роль в генерации активных форм кислорода (АФК)
, . Кроме того, повышенное количество АФК в почках, особенно супероксидных радикалов, реагирует с NO, образуя пероксинитрит, который, в свою очередь, связывается с тирозином, образуя высокоцитотоксичные соединения, такие как нитротирозин, что особенно губительно для почек и сосудов. Вероятнее всего, повреждение почечных клубочков при диабете обусловлено повышенной выработкой калликреина и простагландина Е2, которые вызывают гиперфильтрацию и вазодилатацию. Применение экстракта AN имело антигипергликемический эффект в дозозависимом режиме. AN значимо улучшила почечную функцию в группе 5 и 6 (снижение титров мочевины и креатинина в сыворотке крови больше, чем в группе 7). Вероятнее всего, механизм основных эффектов экстракта AN заключается в подавлении окислительного стресса и усилении антиоксидантной ферментной системы, но требуется дальнейшее проведение исследований с оценкой антиоксидантного статуса.