Результаты сравнительного доклинического исследования безопасности препаратов элтромбопага
Результаты сравнительного доклинического исследования безопасности препаратов элтромбопага
Аннотация
Данная статья представляет материалы, методы, результаты и их обсуждение экспериментального исследования острой токсичности воспроизведенного препарата «Элтромбопаг-29», таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг производства фирмы (ООО «29 февраля», Россия), серия 011019, годен до 10.2021 г, (МНН Элтромбопаг) в сравнении с препаратом Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания), серия 855N, годен до 11.2021 (МНН Элтромбопаг). В результате данного исследования острой токсичности препараты, предложенные к сравнению, являются эквивалентными. В перспективе работа направлена на доказательство биоэквивалентности названых препаратов и могут способствовать разработке безопасных и эффективных агонистов рецепторов тромбопоэтина.
1. Введение
Элтромбопаг является пероральным агонистом низкомолекулярных рецепторов тромбопоэтина, одобренным для лечения взрослой , и педиатрической , иммунной тромбоцитопенической пурпуры, апластической анемии и тромбоцитопении, ассоциированной с вирусом гепатита С , . Он также был изучен у пациентов с миелодиспластическим синдромом и острым миелолейкозом . Начальный режим дозирования обычно начинается с 25–50 мг в день, при этом более высокие дозы (≥75 мг) используются для лечения апластической анемии, миелодиспластического синдрома и острого миелоидного лейкоза , .
При приеме препарата гепатобилиарные побочные эффекты встречаются у ~ 15% пациентов, принимавших элтромбопаг . Поскольку для поддержания ответа на лечение обычно требуется непрерывная терапия элтромбопагом, точная биохимическая оценка функции печени важна для информирования о корректировке дозы и прекращении приема .
2. Материалы и методы
Опыты были проведены на 66 самцах и 66 самках белых лабораторных мышей массой 20±2 г. Животным однократно был введен внутрижелудочно препарат «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания) с помощью металлического зонда с гладкой оливой на конце в дозах 1500, 2000, 2500, 3000, 3500 мг/кг в пересчёте на элтромбопаг.
Наблюдение за животными осуществлялось непрерывно в первые 8 часов, и далее каждые 8 часов в течение 2 недель.
Токсическое действие препарата обнаруживали исходя из общего состояния животных и их способности к выживанию, а также расчётным показателям токсичности. Подсчет животных, которые умерли и выжили, проводили на 3 сутки после затравки заявленными препаратами, с дальнейшим наблюдением за выжившими животными в течение 2-х недель и итоговым подсчётом выживших животных. В результате полученной информации рассчитывались показатели LD16, LD50 и LD84.
3. Результаты и обсуждение
3.1. Исследование острой токсичности
Для изучения острой токсичности в исследовании участвовал воспроизведённый препарат «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия).
В качестве препарата сравнения использовали препарат Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания). В качестве контроля использовали данные, полученные на интактных животных при внутрижелудочном введении 1% крахмального клейстера.
Проведенные исследования показали, что после однократного внутрижелудочного введения мышам препаратов «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания) в дозах 1500, 2000, 2500, 3000, 3500 мг/кг у мышей наблюдалось уменьшение двигательной активности, потребления корма и воды, животные были вялые, малоподвижные, гибель животных наступала в течение первых 3-х суток.
На основании проведенных экспериментальных данных рассчитаны LD50, LD16 и LD84 для препаратов «Элтромбопаг-29» и Револейд® при внутрижелудочном введении мышам, таблица 1.
Таблица 1 - Исследование острой токсичности препарата «Элтромбопаг-29» в сравнении с препаратом «Револейд®» при внутрижелудочном введении
Препарат | Доза, мг/кг | Число животных | Леталь-ность, % | LD16, мг/кг | LD50, мг/кг | LD84, мг/кг | ||
Общее | Погибшие | Выжившие | ||||||
Элтромбопаг-29 | 1500 | 12 | 0 | 12 | 0 | 2856,05 | 4241,57 | 5618,08 |
2000 | 12 | 0 | 12 | 0 | ||||
2500 | 12 | 1 | 11 | 8,3 | ||||
3000 | 12 | 2 | 10 | 16,7 | ||||
3500 | 12 | 4 | 8 | 33,3 | ||||
Револейд® | 1500 | 12 | 0 | 12 | 0 | 2310,10 | 3340,40 | 4370,71 |
2000 | 12 | 1 | 11 | 8,3 | ||||
2500 | 12 | 3 | 9 | 25 | ||||
3000 | 12 | 4 | 8 | 33,3 | ||||
3500 | 12 | 7 | 5 | 58,3 | ||||
Как можно убедиться из данных, представленных в таблице, летальность животных при внутрижелудочном введении исследуемого практически не отличается от препарата сравнения.
Оставшиеся в живых мыши после 3 суток после введения препаратов не отличались по внешнему виду, поведению и реакции на раздражители от животных одинакового с ними возраста, не получавших препараты. Падежа животных и каких-либо других проявлений токсичности на протяжении 2 недель наблюдения выявлено не было.
Состояние переживших острую интоксикацию животных свидетельствует о хорошей переносимости и безвредности препарата в дозах, превышающих терапевтические в десятки раз.
На основании проведенных экспериментальных данных при однократном внутрижелудочном введении препарата «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) по своим токсикологическим характеристикам практически не отличаются от препарата сравнения Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания). Следовательно, результаты наблюдений за экспериментальными животными в постинтоксикационном периоде острого отравления позволяют отнести сравниваемые препарат «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания) к III классу умеренно опасных лекарственных веществ по ГОСТ 12.1.007-76.
3.2. Клинические признаки и изменения массы тела
Таблица 2 - Массы тела в ходе исследования
Время наблюдения | Контрольная группа | «Элтромбопаг» Револейд® | ||
M | F | M | F | |
Фон | 209,25±1,26 | 209,8±1,25 | 209,75±1,27 | 209,85±1,29 |
7 дней | 212,5±1,3 | 212,8±1,26 | 212,8±1,27 | 211,2±1,38 |
14 дней | 215,7±1,34 | 215,25±1,36 | 215,95±1,28 | 213±1,39 |
Через 7 суток после отмены препаратов | 221±1,7 | 219,2±1,81 | 221 | 216,9±1,68 |
Через 14 суток после отмены препаратов | 224,2±1,76 | 223,5±1,83 | 225,8±1,15 | 220,3±1,88 |
Примечание: M – самцы, F – самки. Единицы измерения: граммы; здесь и везде далее M – среднее арифметическое, m – стандартная ошибка среднегой, *- при р<0,05 по сравнению с плацебо
Таблица 3 - Степени токсичности
Степени токсичности | Терми | ЛД50, однократно, per os, крысы, мг/кг | ЛД50, однократно i/v*(в/б), крысы, мг/кг |
1 | вещества чрезвычайно опасные | ˂ 15 | ˂ 0,1 |
2 | вещества высокоопасные | 15-150 | 0,1-1 |
3 | вещества умеренно опасные | 150-5000 | 1,1-10 |
4 | вещества малоопасные | ˃ 5000 | ˃ 10 |
Примечание: по ист. [5]
3.3. Смертность животных во время исследования подострой токсичности
За время наблюдения в течение 14 суток в группах животных, получавших исследуемые препараты в однократной (12,857 мг/кг/сут) и десятикратной (128,57 мг/кг/сут) дозе смертности животных зафиксировано не было. В течение 14 суток после прекращения приема препаратов гибели крыс также не наблюдалось ни в одной из групп экспериментальных животных.
4. Заключение
При изучении острой токсичности самцам и самкам белым лабораторным мышам однократно внутрижелудочно вводили препараты «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания) в дозах 1500, 2000, 2500, 3000, 3500 мг/кг. О токсическом действии препарата судили по общему состоянию животных и их выживаемости, LD50. Выявлено, что изучаемые препараты при однократном введении оказывают дозозависимое токсическое действие, вызывая гибель животных в течение первых 3-х суток наблюдения. Согласно ГОСТ 12.1.007-76 препарат «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и Револейд® таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг («Глаксо Вэлком С.А.», Испания) можно отнести к III классу умеренно опасных лекарственных веществ.
Проведенные исследования свидетельствуют об отсутствии различий по показателям острой токсичности, следовательно, по показателям острой токсичности воспроизведенный препарат «Элтромбопаг-29» и референт «Револейд®» являются эквивалентными.
На основании результатов проведенных экспериментальных исследований препарат «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг (ООО «29 февраля», Россия) и «Элтромбопаг-29» таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 25 мг (ООО «29 февраля», Россия), может быть рекомендован для представления в Министерство здравоохранения РФ для получения разрешения на проведение клинических испытаний.