DYNAMICS OF INDICES OF NON-SPECIFIC RESISTANCE OF THE ORGANISM OF CATS DURING THERAPY FOR CALICIVIRUS INFECTION

Иммунный гомеостаз в животном организме базируется на ряде функций иммунной системы: элиминация экзо- и эндогенных объектов с генетически чуждой информацией; контроль оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом; морфогенез развивающегося плода; индуцирование родового акта; регуляция метаболических процессов, механизмов программы старения и др.

В их основе, как известно, лежат общеорганизменные (неспецифические) и специфические (конкретные) реакции. Первые включают проявления врожденного иммунитета, вторые – таковые адаптивного, обеспечивающего основную защиту от экзо- и эндогенных патогенов, проникших или возникающих во внутренней среде организма животных и человека

Цель работы: разработка и апробация схемы-модели комплексного лечения калицивироза кошек при его остром течении с включением российского интерферона-омега кошки Фелиферон® (НТЦ «БиоИнвест», г. Москва).

Экспериментальная часть работы была выполнена в ветеринарных клиниках «Кот и пес» (г. Бор, Нижегородская область), «Доктор Айболит» (г. Нижний Новгород) и на кафедре «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» Нижегородского ГАТУ. Исследования проводили на животных подобранных методом пар-аналогов (критерии: возраст, масса тела, пол). Всего в опытах участвовало 14 кошек разбитых на опытную (О) и контрольную (К) группы (n=7). Всем им был поставлен диагноз калицивирусная инфекция, которая протекала в острой форме. Комплексная терапия осуществлялась на основе ранее разработанной схемы-модели комплексного лечения калицивироза кошек

Кошкам опытной группы в/м назначался Фелиферон в дозе 200 тыс МЕ 1 раз в день в течение 5 суток в сочетании с местным лечением язв ротовой полости, конъюнктивита, ринита, специфические противовирусные средства типа Глобфел-4, Витафел – С, антибактериальные препараты (цефалоспорины III и IV поколения, синулокс и др.), гепатопротектор Ремаксол (НТФФ «Полисан», СПб), симптоматические средства, включая противорвотные препараты, средства заместительной терапии (витамины группы B, C, A, E, микроэлементы и т.п.). Схема терапии контрольной группы Фелиферон не содержала, вместо него вводили равнозначное количество физиологического раствора хлорида натрия.

Лабораторный анализ образцов венозной крови, мочи и кала проводился по общепринятым методикам

У больных кошек наблюдались типичные симптомы калицивироз в острой форме, а исследуемые показатели различались незначительно. Как видно из материалов таблицы 1, лейкоцитарная формула у больных калицивирозом кошек в начале лечения характеризовалась не только лейкоцитозом (14,7±0,6 т/л), но и ядерным сдвигом влево, что в целом отражало наличие острого воспаления в организме больных животных

Через трое суток у кошек опытной группы значительно улучшилось общее состояние по сравнению с контролем: они были более подвижны; чаще пили воду; проявляли больший интерес к корму; мелкие язвочки полностью исчезли; гиперемия слизистой оболочки ротовой полости ослабло; крупные язвы приобретали бледно-розовый цвет их края сглаживались или даже стали сливаться с общим фоном. Эта тенденция наблюдалась у 5 из 7 животных опытной группы, причем покраснение слизистой и крупные язвы еще сохраняли свои очертания, указывая на наличие воспалительной реакции (гингивитостоматита). В обеих группах ослабевало слюнотечение, выделения из носа, дыхание становилось почти естественным у большинства подопытных животных. Ректальная температура субфебрильная наблюдалась у 3 из 7 кошек опытной группы, а в контрольной у 6 из 7 животных. Подчелюстные лимфоузлов у кошек опытной группы уменьшились до физиологически нормальных размеров, но сохранилось в незначительной степени у 2 из 7 животных в контрольной. При этом редкий кашель у этих пациентов, указывал на наличие трахеобронхита, что, по-видимому, и отразилось на лейкоцитарной формуле через 7 суток (табл. 1). Число нейтрофилов и моноцитов у животных контрольной группы на 7 сутки было выше по сравнению с нормой и опытной группой (р˂0,01).

Спустя 5 суток показатели лейкоцитарной формулы у кошек опытной группы фактически приблизились к значениям здоровых животных, тогда как в контрольной сохранялся нейтрофилез, моноцитоз, подтверждая тем самым бронхолегочную патологию у таких животных.

О наличии иммунных сдвигов в организме больных калицивирозом кошек косвенно свидетельствовали расчет лейкоцитарных индексов: индекса Кребса, индекса сдвига лейкоцитов крови, лимфоцитарного индекса , приведённых в таблице 2.

Индекс Кребса на 3 сутки достоверно возрастал в обеих группах по сравнению с клинически здоровыми кошками, указывая тем самым на активизацию фагоцитарных функций и естественной резистентности. Через 5 суток индекс Кребса в опытной группе достиг нормы, а в контроле он оставался повышен (р˂0,05).

Индекс сдвига лейкоцитов крови существенно возрастал ((р˂0,05-0,01) в опытной группе вплоть до 7 суток, подтверждая повышение уровня активности механизмов неспецифической резистентности.

Лимфоцитарный индекс, отражает взаимоотношения врожденного и адаптивного звеньев иммунной системы, опытных животных демонстрирует стабильное отношение работы обеих систем иммунитета с преобладанием врожденного. Анализ совокупности Лимфоцитарного индекса с индексом Кребса, у опытной группы указывает на активацию неспецифических факторов защиты уже на 3 сутки терапии.

Убедительным подтверждением вышесказанному служили результаты исследований фагоцитоза и НСТ-теста (Оценка бактерицидной активности нейтрофилов по тесту восстановления нитросинего тетразолия) в палочкоядерных нейтрофилах у подопытных кошек в процессе комплексной терапии калицивироза (табл.3).

Фагоцитарная активность нейтрофилов; Фагоцитарный индекс; Фагоцитарное число у больных калицивирозом кошек снижалась на 14,1; 24,3; 34,9% соответственно. В процессе комплексного лечения в опытной группе наблюдается активный рост показателей начиная с 3 суток терапии, чего нельзя сказать о контрольной группе. Фагоцитарная емкость крови выше всего была в начале лечения, но через 3-5 суток в опытной группе она становилась нормальной, а в контрольной оставалась на более низком уровне. ЭСК, существенно снижалась в начале лечения калицивироза и через 3 суток в опыте и контроле. Через 5 суток она восстанавливалась до величины стандартного интервала в опытной группе и оставалась достоверно выше, чем в контроле. На 7 сутки ЭСК находилась в пределах нормы, т.е. указывала на завершенность активации процесса фагоцитоза в палочкоядерных нейтрофилов у подопытных животных.

Анализ функционально-метаболического состояния ПЯН по показателям НСТ-теста показал, что калицивирозная инфекция оказала негативное влияние на кислородзависимый метаболизм этих клеток крови. Вместе с условно-патогенной микрофлорой, она вызвала функциональное раздражение палочкоядерных нейтрофилов, выразившееся в повышении процента позитивно реагирующих клеток в СВ НСТ-теста с возрастанием и СЦП почти в 2 раза по сравнению с нормой. В процессе лечения, оба эти показателя изменялись неоднозначно в опыте и контроле. Если в той и другой группе процент положительно реагирующих палочкоядерных нейтрофилов сохранялся повышенным до 5 суток относительно нормы, то СЦП СВ НСТ-теста был выше нормы в опытной группе лишь через 3 суток, а через 5 суток был в ее верхних границах. Через 7 суток в опытной и контрольной группах наблюдался переход палочкоядерных нейтрофилов в спокойное состояние (р˂0,05 по отношению к норме). Оценка функционально-метаболической активности палочкоядерных нейтрофилов в АВ НСТ-тесте у больных калицивирозом кошек, продемонстрировала ее существенное ослабление, которое сохранилось в контрольной группе через 3-5 суток, достигая нормы лишь при завершении курса лечения через 7 суток. Подобным образом изменялся СЦП АВ НСТ-теста: нормализация в опытной группе уже через 3 суток и более высокие значения в течение всего периода наблюдений (р˂0,05) по сравнению с контролем. Как следствие калицивироза, достоверное снижение ПРН до 7 суток в обеих группах, а КМАН в контрольной группе. Эти показатели убедительно продемонстрировали отрицательное влияние калицивироза кошек на кислородзависимый метаболизм палочкоядерных нейтрофилов, лежащий в основе их микробицидного потенциала

Изучение гуморальных факторов неспецифической резистентности (БАСК, лизоцим, комплемент) показало, что их активность подвергалась супрессивному воздействию КВИ, но меньшей степени, чем способность палочкоядерных нейтрофилов к фагоцитозу (табл. 4).

Материалы этой таблицы объективно отразили, что включение Фелиферона в схему терапии комплексного лечения калицивироза у кошек опытной группы через 3 суток восстанавливало биологическую активность сыворотки крови до нормативных величин. В контроле наблюдалось медленное повышение активности биологической активности сыворотки крови и ее уровень нормализовался спустя 5 суток.

Наличие воспалительного процесса обусловлено уменьшением содержания лизоцима у больных калицивирозом кошек. В опытной группе через 3 суток его уровень фактически достигал нормативных значений, тогда как в контроле его стабилизация определялась после 5 суток комплексной терапии. При этом, как видно из табличных данных, межгрупповые различия сохранялись до 5 суток по уровню активности Бактериальной активности сыворотки крови и лизоцима.

Комплементарная активность сыворотки крови у подопытных кошек в начале болезни достоверно снижалась по сравнению с нормой. Однако через 3 суток она достигала нормы в опытной группе, а в контроле через 5 суток. Существенные межгрупповые различия в комплементарной активности сыворотки крови проявлялись лишь через 3 суток (р˂0,05).

В работе изложены результаты исследований по изучению влияния рекомбинантного кошачьего интерферона – омега Фелиферон® (НТЦ «Био Инвест», г. Москва) в комплексной терапии калицивироза. Установлено, что препарат в сочетании с другими средствами оказал позитивное влияние на показатели неспецифической резистентности (врожденного иммунитета), сокращая сроки лечения у животных.