THE EFFECT OF EIMERIOTIC INVASION ON THE ORGANISM OF RABBITS

ВЛИЯНИЕ ЭЙМЕРИОЗНОЙ ИНВАЗИИ НА ОРГАНИЗМ КРОЛИКОВ

Научная статья

Сидоренко К.В.¹, Мкртчян М.Э.^2, *

¹ ОRCID: 0000-0001-8987-9426;

² ОRCID: 0000-0002-0615-5703;

^{1, 2} Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины, Санкт-Петербург, Россия

* Корреспондирующий автор (laulilitik[at]yandex.ru)

Аннотация

Кокцидиозы остаются одними из серьёзнейших проблем органов пищеварения продуктивных животных, и в том числе кроликов. Целью наших исследований явилось определить степень патогенного воздействия эймерий при конкретной интенсивности инвазии на организм чистопородных и гибридных кроликов.

Научный эксперимент был поставлен на кроликах породы Шиншилла (Ш*Ш) и их гибридах с породой Калифорния (К*Ш) в возрасте 1,5 месяцев. Были сформированы группы пар-аналогов по 6 голов. Новорожденные крольчата подопытных групп экспериментально были заражены эймериями в дозе около 100 тысяч ооцист на голову.

На 45-й день заражения был осуществлен отбор проб крови для биохимического и клинического анализа и произведён убой животных опытных и контрольных групп и отобран материал для гистологического исследования из тонкого и толстого отделов кишечника, лимфатических узлов, печени, селезенки.

Результаты наших исследований показали, что при интенсивности инвазии в 100 тыс. ооцист на животное, клинические и биохимические показали крови не отражают патологические процессы, происходящие в стенке тонкого отдела кишечника. Мы не наблюдали эозинофилии в крови, характерной для поражения паразитами, однако отмечалось незначительное повышение процента сегментоядерных нейтрофилов по сравнению с животными контрольной группы: у чистокровных шиншилл с 35,83 ± 0,87 до 36 ± 0,63, а у гибридов – с 42,83 ± 1,08 до 44,67 ± 1,33, что свидетельствовало о наличии воспалительных процессов и умеренной интоксикации в организме зараженных животных.

Снижение содержания альбуминов на 29,1 - 50,19% в зависимости от породы на фоне роста уровня глобулинов в плазме крови, на наш взгляд, обусловлен как воспалительными реакциями в стенке тонкой кишки, что сопровождается нарушением процессов пищеварения и всасывания, так и возможно на фоне тканевых повреждений влиянием токсических продуктов распада клеток слизистой оболочки на печень. В тонком отделе кишечника в гистологических срезах в местах локализации меронтов и мерозоитов были обнаружены повреждения энтероцитов, а также скопления лимфоцитов и эозинофилов.

Ключевые слова: эймерии, породы кроликов, альбумины, гистология.

THE EFFECT OF EIMERIOTIC INVASION ON THE ORGANISM OF RABBITS

Research article

Sidorenko K.V.¹, Mkrtchyan M.E.^2, *

¹ ORCID: 0000-0001-8987-9426;

² ORCID: 0000-0002-0615-5703;

^{1, 2} St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, St. Petersburg, Russia

* Corresponding author (laulilitik[at]yandex.ru)

Abstract

Coccidiosis remains one of the most serious problems of the digestive organs of productive animals, including rabbits. The aim of this research was to determine the degree of pathogenic effect of eimeria at a specific intensity of invasion on the body of purebred and hybrid rabbits.

The scientific experiment was carried out on Chinchilla rabbits and their hybrids with the California breed at the age of 1.5 months. In total, groups of pairs of analogs of 6 heads were formed. Newborn rabbits of the experimental groups were experimentally infected with Eimeria at a dose of about 100 thousand oocysts per head.

On the 45th day of infection, blood samples were taken for biochemical and clinical analysis, animals of experimental and control groups were slaughtered, and the material for histological examination was selected from the small and large intestines, lymph nodes, liver, and spleen.

The results of the research showed that with the intensity of invasion of 100 thousand oocysts per animal, clinical and biochemical blood samples do not reflect the pathological processes occurring in the wall of the small intestine. The authors also did not observe eosinophilia in the blood characteristic of parasite damage; however, there was a slight increase in the percentage of segmented neutrophils compared to the control group animals: in purebred chinchillas from 35.83 ± 0.87 to 36 ± 0.63, and in hybrids – from 42.83 ± 1.08 to 44.67 ± 1.33, which indicated the presence of inflammatory processes and moderate intoxication in the body of infected animals.

A decrease in the albumin content by 29.1-50.19%, depending on the breed, against the background of an increase in the level of globulins in blood plasma, in the opinion of the authors, is due to both inflammatory reactions in the wall of the small intestine, which is accompanied by a violation of the processes of digestion and absorption as well as possible against the background of tissue damage by the influence of toxic products of the breakdown of mucosal cells on the liver. In the small intestine, damage to enterocytes as well as accumulations of lymphocytes and eosinophils were found in histological sections at the sites of localization of meronts and merozoites.

Keywords: eimeria, rabbit breeds, albumins, histology.

Введение

Кролики для многих небольших частных фермерских хозяйств служат основным источником мяса, как для личного потребления, так и для коммерческих целей. Так как кролики отличаются высокими темпами роста и плодовитостью, они прекрасно подходят для разведения, как малыми фермерскими хозяйствами, так и для крупномасштабного производства.

Кокцидиоз остается одним из серьёзнейших заболеваний органов пищеварения у кроликов. Вследствие довольно быстрого развития данных возбудителей, отсутствия промежуточного хозяина, высоких воспроизводительных свойств, наибольшую опасность эймерии представляют для молодняка сельскохозяйственных животных, для которого нередко болезнь заканчивается летальным исходом [2, С. 68], [10, С. 350-355].

Многочисленные научные исследования показали, что частота заражения кокцидиозом очень высока. Экстенсивность инвазии эймериоза у кроликов в крестьянско-фермерских хозяйствах может достигать до 93% - 100% [8, С. 433-439].

Но не всегда оно сопровождается развитием болезни. Патогенное воздействие паразитов определяется видом и количеством ооцист, резистентностью организма и другими факторами [1, С. 43-48], [4, С. 48-50], [9, С. 7-11].

К клиническим симптомам у кроликов, инвазированных Eimeria spp. относятся: потеря аппетита, снижение живой массы, диарея и обезвоживание организма. Кроме этого, часто можно выявить изменения некоторых показателей крови. Полный анализ крови является важным критерием при определении общего состояния здоровья кроликов, а знание референтных значений гематологических и биохимических показателей необходимо при оценке состояния животных [3, С. 190-192], [5, С. 31], [6, С. 142-143].

В процессе развития эймериоза у кроликов наблюдается дисбаланс белковых фракций крови. При этом заметное снижение количества лимфоцитов авторы объясняют поражением лимфоидных структур кишечника, которое вызвано присутствием и размножением кокцидий [7, С. 77-99].

Целью наших исследований явилось определить степень патогенного воздействия эймерий на организм различных пород кроликов при средней интенсивности инвазии.

Материал и методы

Объектом исследований явились кролики породы Шиншилла (Ш*Ш) и их гибриды с породой Калифорния (К*Ш) в возрасте 1,5 месяцев. Были сформированы группы аналогов по 6 голов. Новорожденные крольчата подопытных групп экспериментально были заражены эймериями в дозе 100 тысяч ооцист на голову.

Материалом для исследований служили фекалии, кровь, сыворотка крови и пробы некоторых внутренних органов.

На 45-й день заражения был осуществлен отбор проб крови для биохимического и клинического анализа и произведён убой животных опытных и контрольных групп и отобран материал для гистологического исследования из тонкого и толстого отделов кишечника, лимфатических узлов, печени, селезенки.

Биохимические исследования проводились на аппарате Clima MC -15, наборами «Ольвекс», «Аналитикон», «Клинитест» и «Витал». Гематологические исследование осуществлялись методом подсчёта в камере Горяева.

Изготовление гистологических препаратов выполнялось согласно общепринятой методике. Окрашивание производили классическим методом гематоксилином и эозином. Использовался гематоксилин Майера и водный раствор эозина. Заключение гистологических препаратов произвели с использованием канадского бальзама и исследовали при увеличении объектива ×40 и ×90.

Статистическая обработка осуществлялась в программе Past3 с учетом критерия Манн – Уитни.

Результаты исследований и обсуждение

Клинический анализ крови показал, что все показатели (лейкоциты, эритроциты, гемоглобин и тромбоциты) находились в пределах физиологической нормы, характерных для данных видов животных.

При определении процентного соотношения различных популяций лейкоцитов, было установлено, что у зараженных эймериями кроликов наблюдается незначительное повышение процента сегментоядерных нейтрофилов по сравнению с животными контрольной группы: у чистокровных шиншилл с 35,83 ± 0,87 до 36 ± 0,63, а у гибридов – с 42,83 ± 1,08 до 44,67 ± 1,33, что может свидетельствовать о наличии воспалительных процессов и умеренной интоксикации в организме зараженных животных.

По данным ряда авторов, кокцидиоз вызывает значительные изменения гематологических показателей крови. Исследования показывают, что содержание эритроцитов и гемоглобина в крови больных животных значительно снижается, в то время как количество лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов и базофилов увеличиваются. Однако, необходимо указать, что изменений в показателях эозинофилов не отмечается, хотя обычно при паразитарных заболеваниях наблюдается ярко выраженная эозинофилия.

Исследования биохимических показателей крови при эймериозе кроликов показал, что у животных наблюдается снижение содержание альбуминов у чистопородных крольчат на 29,1 %, а у гибридов – на 50,19% (см. рисунок 1).

Рис. 1 – Содержание фракций белков в крови подопытных кроликов

 

Как видно по данным рисунка, содержания глобулинов у животных подопытных чистопородной и гибридной групп по сравнению с крольчатами контрольной группы повышается на 18,68 и 18,33 г/л соответственно. Снижение содержания альбуминов на фоне роста уровня глобулинов в плазме крови, на наш взгляд, обусловлен как воспалительными реакциями в стенке тонкой кишки, что сопровождается нарушением процессов пищеварения и всасывания, так и возможно на фоне тканевых повреждений влиянием токсических продуктов распада клеток слизистой оболочки на печень.

Это подтверждается результатами патологоанатомических исследований внутренних органов. При интенсивности инвазии 100 тыс. ооцист на животное вне зависимости от породы кроликов изменения были выявлены исключительно в тонком отделе кишечника в виде очагов воспаления и полосчатых кровоизлияний.

При гистологическом исследовании препаратов, изготовленных из различных отделов тонкого кишечника зараженных гибридов и чистопородных кроликов было установлено, что несмотря на немногочисленные, но достаточно заметные поражения, в слизистой оболочке тонкой кишки были зарегистрированы повреждения энтероцитов ворсинок и крипт однослойного каемчатого эпителия

В эпителиальной пластине обнаружены эндогенные стадии эймерии на различных стадиях мерогонии. Трофозоиты овоидной, округлой или каплевидной формы с выраженным базофильным ядром внутри паразитоформной вакуоли обнаруживались чаще в области крипт. Внутри некоторых энтероцитов находились меронты, состоящие из многочисленных овально-вытянутых мерозоитов. Вокруг паразитарных очагов наблюдалось кровенаполнение капилляров, заметный лимфоцитоз и эозинофилия.

При гистологическом исследовании толстого отдела кишечника, печени, селезенки и лимфатических узлов зараженных животных патологических изменений структуры органов не зафиксировано.

Заключение

Таким образом, результаты наших исследований показали, что при дозе инвазии 100 тыс. ооцист на животное, клинические и биохимические показали крови не отражают патологические процессы, происходящие в стенке тонкого отдела кишечника. Мы не наблюдали эозинофилии в крови, характерной для поражения паразитами, однако отмечалось увеличение процента сегментоядерных нейтрофилов, что свидетельствовало о наличии воспалительных процессов и умеренной интоксикации в организме зараженных животных.

Снижение содержания альбуминов на 29,1 - 50,19% в зависимости от породы на фоне роста уровня глобулинов в плазме крови, на наш взгляд, обусловлен как воспалительными реакциями в стенке тонкой кишки, что сопровождается нарушением процессов пищеварения и всасывания, так и возможно на фоне тканевых повреждений влиянием токсических продуктов распада клеток слизистой оболочки на печень.

В тонком отделе кишечника в гистологических срезах в местах локализации меронтов и мерозоитов были обнаружены повреждения энтероцитов, а также скопления лимфоцитов и эозинофилов.

Финансирование Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 19-316-90059.

Funding The study was carried out with the financial support of the Russian Foundation for Basic Research within the framework of scientific project No. 19-316-90059.

 

Конфликт интересов Не указан.

Conflict of Interest None declared.

 

Список литературы/ References

1. Белова Л.М. Кокцидии и кокцидиозы кур / Л.М. Белова, М.В. Крылов // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2013. № 3 (19). С. 43-48.
2. Искаков, М. М. Некоторые вопросы эпизоотологии эймериоза овец и коз / М. М. Исаков // Цитология. – 1992; . Т.34. – № 4. – С. 68.
3. Карпенко Л.Ю. Сравнительная оценка динамики основных показателей метаболизма у коров с разной молочной продуктивностью. / Л.Ю. Карпенко, Н.В. Пилаева, Р.М. Васильев и др. // Вопросы Нормативно-правового регултрования в ветеринарии. - 2018. – № 3. – С. 190-192.
4. Кузнецов Ю.Е. Эймериидозы норок. / Ю.Е. Кузнецов //Современная наука: актуальные проблемы и пути их решения. - 2015. - № 1 (14).- С. 48-50.
5. Макарова, Т. Н. Морфологические и биохимические показатели крови растущих кроликов / Т. Н. Макарова // Аграрный вестник Урала. – 2010. – № 11-2(78). – С. 31.
6. Халиуллина, О.Х. Влияние ассоциативной инвазии на показатели иммунитета кроликов / О.Х. Халиуллина, В.З. Галимова // Интеграция аграрной науки и производства: состояние, проблемы и пути решения: материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Уфа, 2008. – С. 142-143.
7. Ahmed I. Hematological Changes and Comparative Efficacy of Allopathic and Herbal Drugs on Coccidiosis in Rabbits / I. Ahmed et al. // Baltica. – 2020. № 33(2). – P. 77 – 99.
8. Klimova E.S. Distribution of Eimeria species and their accociations in farms of Udmurt Republic. / E.S. Klimova, M.E. Mkrtchyan, T.V. Babinntseva et al. // International Scientific and Practical Conference "AgroSMART – Smart Solutions for Agriculture". Сер. "KnE Life Sciences" - 2019. - P. 433-439.
9. Sidorenko, K. The pathogenic effect of Eimeria on rabbits of the Soviet chinchilla breed and its hybrids with the Californian breed / K. Sidorenko, M.Mkrtchyan, Y.K uznetsov et al. // Advances in Animal and Veterinary Sciences. - 2020. - Vol. 8. - № Special issue 2. - P. 7-11.
10. Silva S. M. Coccidiosis in European rabbit (Oryctolagus cuniculus algirus) populations in the Iberian Peninsula / S. M. Silva, С. Ferreira, J. Paupério et al. // Acta Parasitologica. - 2015. - Vol. 60 (2). - Р. 350–355.

Список литературы на английском языке/ References in English

1. Belova L. M. Kokcidii i kokcidiozy kur [Coccidia and coccidiosis of chickens] / L. M. Belova, M. V. Krylov // Aktual'nye voprosy veterinarnojj biologii [Actual issues of veterinary biology]. 2013. № 3 (19), pp. 43-48 [in Russian]
2. Iskakov, M. M. Nekotorye voprosy ehpizootologii ehjjmerioza ovec i koz [Some questions of epizootology of eimeriosis of sheep and goats] / M. M. Isakov // Citologija [Cytology]. – 1992; Vol. 34. - No. 4 – p. 68 [in Russian]
3. Karpenko L. Yu. Sravnitel'naja ocenka dinamiki osnovnykh pokazatelejj metabolizma u korov s raznojj molochnojj produktivnost'ju [Comparative assessment of the dynamics of the main indicators of metabolism in cows with different milk productivity] / L. Yu. Karpenko, N. V. Pilaeva, R. M. Vasiliev, et al. // Voprosy Normativno-pravovogo regultrovanija v veterinarii [Issues of regulatory regulation in veterinary medicine]. - 2018. - No. 3. - pp. 190-192 [in Russian]
4. Kuznetsov Yu. E. Ehjjmeriidozy norok [Eimeriidoses of mink] / Yu. E. Kuznetsov // Sovremennaja nauka: aktual'nye problemy i puti ikh reshenija [Modern science: problems and ways to solve them]. - 2015. - № 1 (14).- pp. 48-50 [in Russian]
5. Makarova, T. N. Morfologicheskie i biokhimicheskie pokazateli krovi rastushhikh krolikov [Morphological and biochemical parameters of the blood of growing rabbits] / T. N. Makarova // Agrarnyjj vestnik Urala [Agrarian Bulletin of the Urals]. – 2010. – № 11-2(78). – p. 31 [in Russian]
6. Khaliullina, O. Kh. Vlijanie associativnojj invazii na pokazateli immuniteta krolikov [The influence of associative invasion on the immunity indicators of rabbits] / O. Kh. Khaliullina, V. Z. Galimova // Integracija agrarnojj nauki i proizvodstva: sostojanie, problemy i puti reshenija: materialy Vserossijjskojj nauchno-prakticheskojj konferencii. [Integration of agricultural science and production: state, problems and solutions: proceedings of the All-Russian Scientific and Practical Conference]. - Ufa, 2008. - pp. 142-143 [in Russian]
7. Ahmed I. Hematological Changes and Comparative Efficacy of Allopathic and Herbal Drugs on Coccidiosis in Rabbits / I. Ahmed et al. // Baltica. – 2020. № 33(2). – P. 77 – 99.
8. Klimova E.S. Distribution of Eimeria species and their accociations in farms of Udmurt Republic. / E.S. Klimova, M.E. Mkrtchyan, T.V. Babinntseva et al. // International Scientific and Practical Conference "AgroSMART – Smart Solutions for Agriculture". Сер. "KnE Life Sciences" - 2019. - P. 433-439.
9. Sidorenko, K. The pathogenic effect of Eimeria on rabbits of the Soviet chinchilla breed and its hybrids with the Californian breed / K. Sidorenko, M.Mkrtchyan, Y.K uznetsov et al. // Advances in Animal and Veterinary Sciences. - 2020. - Vol. 8. - № Special issue 2. - P. 7-11.
10. Silva S. M. Coccidiosis in European rabbit (Oryctolagus cuniculus algirus) populations in the Iberian Peninsula / S. M. Silva, С. Ferreira, J. Paupério et al. // Acta Parasitologica. - 2015. - Vol. 60 (2). - Р. 350–355.