ANTHENARIA DIOICA-PLANT PERSPECTIVE EASTERN SIBERIA
Горячкина Е. Г.
Доцент, кандидат фармацевтических наук, Иркутский государственный медицинский университет
ANTHENARIA DIOICA— ПЕРСПЕКТИВНОЕ РАСТЕНИЕ ВОСТОЧНОЙ СИБИРИ
Аннотация
В работе представлены результаты фитохимического изучения полифенольного и полисахаридного комплекса кошачьей лапки двудомной с целью обоснования перспективы внедрения этого растения в официнальную медицину.
Ключевые слова. Кошачья лапка двудомная, полифенольные соединения, полисахариды.
Goryachkina E. G.
Associate Professor, Candidate of Pharmaceutical Sciences, Irkutsk State Medical University
ANTHENARIA DIOICA-PLANT PERSPECTIVE EASTERN SIBERIA
Abstract
The results of phytochemical study of polyphenol and polysaccharide complex of Anthenaria dioica to justify the prospects for implementation of this plant in the officinal medicine.
Keywords. Anthenaria dioica, polyphenol compounds, polysaccharides
Флора Восточной Сибири имеет огромные ресурсы лекарственных растений, которые успешно применяются в народной и научной медицине. Так, например, в народной медицине Сибири широко используется растение семейства сложноцветных (Compositae) кошачья лапка двудомная (Anthennaria dioica (L.) Gaertn.) в основном в качестве сильного кровоостанавливающего, противовоспалительного и отхаркивающего средства. В справочники по научной медицине кошачья лапка пока не вошла, так как растение ещё мало изучено.
Цель нашего исследования — установить качественный состав и оценить количественное содержание полифенольного комплекса как основных действующих веществ надземной части кошачьей лапки двудомной
Образцы для исследования собраны в районе деревень Горячие Ключи и Оёк Иркутской области в период начала цветения.
Литературные данные свидетельствуют о наличии в траве КЛ тритерпеновых соединений (урсоловой кислоты и лупеола), β-ситостерина, гидроксикоричных кислот (кофейной и хлорогеновой), а также флавоноидов (производных апигенина и лютеолина). При этом установлены гемостатическая и антибактериальная активность [3, 4].
Для более детального изучения полифенольного комплекса использовали информативный метод высоко-эффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Изучение качественного состава фенольных соединений проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы “ GILSTON”, модель 305,ФРАНЦИЯ, инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 USA с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для“ Windows”.
В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6х250 мм KROMASIL C18, размер частиц 5 микрон.
Подвижная фаза метанол-вода-кислота фосфорная концентрированная-тетрагидрофуран, в соотношении 370:570:5:60. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 90 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора “GILSTON” UV/VIS модель 151,при длине волны 254 нм.
Для исследования сырьё измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм. Около 0,5 г растительного сырья помещали в колбу вместимостью 50 мл, прибавляли по 20 мл спирта этилового 70 %, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объёмом 25 мл и доводили спиртом этиловым 70 % до метки.
Параллельно готовили серию растворов сравнения 0,05 % в спирте этиловом 70%: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, кемпферола, кумарина, гиперозида, геспередина , апигенина, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, неохлорогеновой кислоты, коричной кислоты, цикориевой кислоты,феруловой кислоты, танина, эпикатехина,катехин, нарингенина, дикумарина, дигидрокверцетина. По 50 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали в выше приведенных условиях.
Результаты проведенных исследований приведены в таблице 1.
Анализ показал, что трава КЛ содержит все основные группы полифенольных соединений: флавоноиды (ФЛ), гидроксикоричные кислоты (ГКК), кумарины (КУМ) и дубильные вещества (ДВ). Причём установлено, что больше всего идентифицировано ГКК (7), меньше ФЛ (3), ДВ (3) и КУМ (1). Причём, в процентном отношении (за исключением 17,67% не идентифицированных веществ) большую часть составляют ГКК (50,84%), ДВ (14,88%), ФЛ (12,56%) и КУМ (4,05%).
Среди ГКК выделено максимальное содержание галловой и о-кумаровой кислот, ФЛ — дигидрокверцетина, а ДВ — танина.
Таблица 1 - Результаты идентификации полифенольных соединений кошачьей лапки двудомной методом ВЭЖХ
|
№ п/п |
Время удержи-вания, мин |
Высота, mV |
Площадь, mV*сек |
Концент- рация, % |
Название вещества |
|
1 |
3.032 |
153.05 |
4465.29 |
9.35 |
о-кумаровая кислота |
|
2 |
3.4 |
169.71 |
3620.34 |
7.58 |
таннин |
|
3 |
3.874 |
130.62 |
1750.60 |
3.67 |
катехин |
|
4 |
4.172 |
335.27 |
9179.78 |
19.23 |
галловая кислота |
|
5 |
4.97 |
65.53 |
1735.22 |
3.63 |
эпигаллокатехингаллат |
|
6 |
5.855 |
61.69 |
3564.54 |
7.47 |
хлорогеновая кислота |
|
7 |
6.704 |
35.91 |
671.27 |
1.41 |
цикориевая кислота |
|
8 |
7.265 |
28.44 |
811.18 |
1.70 |
кофейная кислота |
|
9 |
7.799 |
29.15 |
1509.76 |
3.16 |
неохлорогеновая кислота |
|
10 |
9.098 |
40.85 |
1931.32 |
4.05 |
ислоты (Г |
|
11 |
9.977 |
49.12 |
2111.63 |
4.42 |
не идентфицировано |
|
12 |
10.9 |
40.29 |
2866.38 |
6.00 |
дигидрокверцетин |
|
13 |
13.37 |
37.48 |
3489.86 |
7.31 |
феруловая кислота |
|
14 |
16.24 |
12.39 |
1001.85 |
2.10 |
лютеолин |
|
15 |
17.85 |
22.06 |
2128.69 |
4.46 |
лютеолин-7-глюкозид |
|
16 |
19.94 |
27.04 |
3886.12 |
8.14 |
не идентифицировано |
|
17 |
24.19 |
5.48 |
576.84 |
1.21 |
коричная кислота |
|
18 |
26.71 |
10.49 |
1921.45 |
4.03 |
не идентифицировано |
|
19 |
37.76 |
2.95 |
кислот |
1.08 |
не идентифицировано |
|
Все-го |
77.09 |
1257.53 |
47737.09 |
100.00 |
|
Проведена количественная оценка содержания суммы полифенолов в траве (как потенциальном лекарственном растительном сырье), в зависимости от вида экстрагента. Следует отметить, что 70% спирт этиловый позволяет выделить максимальное количество полифенольных соединений, т. е. всю группу БАВ, в то время как при экстракции водой возможно извлечение суммы дубильных веществ и только части флавоноидов, гидроксикоричных кислот и кумаринов [ГФ XI]. Результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2. Количественное содержание суммы полифенолов в траве и надземных органах кошачьей лапки двудомной
|
№ п/п |
Объект анализа (n=6) |
Экстрагент спирт этиловый 70% |
|
1 |
Трава |
10,52±0,07 |
|
2 |
Цветки |
7,55±0,16 |
|
3 |
Листья |
10,04±0,12 |
|
4 |
Стебли |
4,43±0,11 |
Наиболее богаты полифенольными соединениями листья КЛ, немного меньше в цветках и значительно уступают в этом плане стебли. В виду особенностей сбора сырья (сложность отделения листьев от стеблей) рационально собрать всю надземную часть с последующим отбрасыванием крупных (слабоодревесневающих при основании) стеблей.
Для определения полисахаридов использовали методику, позволяющую определить количественное содержание водорастворимых полисахаридов (ВП), пектиновых веществ (ПВ), гемицеллюлозы А и В (ГЦА и ГЦВ) [].
В результате обнаружены значительные количества полисахаридов, в частности ВП – 8,1%, ПВ — 15,8%, ГМА — 6,7% и ГМВ — 9,1%.
Анализ полученных данных по установлению количественному содержанию основных групп биологически активных веществ позволяет сделать вывод о перспективности дальнейшего изучения кошачьей лапки двудомной с целью внедрения в медицинскую практику противовоспалительного, кровоостанавливающего и отхаркивающего средства.
Литература
1. Горячкина, Е.Г. Изучение полисахаридов золотарника даурского / Е.Г. Горячкина, М.В. Буинов, Г.М. Федосеева и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных трудов. Пятигорск, 2013, вып.68. — С.29-31.
2. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье/ МЗ СССР. – 11 изд., доп. – М. Медицина. – 1990 г.
3. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 5. Семейство Asteraceae (Compositae). Часть 1. Роды Achillea — Doronicum / Отв. ред. А. Л. Буданцев. — СПб.; Товарищество научных изданий КМК, 2012. — С. 29-30.
4. Телятьев, В. В. Целебные клады / В.В. Телятьев. — Иркутск : Восточно-сибирское книжное издательство. - 1990 — 400 с.