Our journals
Submit manuscript Sign in / Sign up
Advanced search
Article sections

THE INFLUENCE OF NATURAL ZEOLITES ON ENZYMATIC ACTIVITY OF SOYBEAN SEEDS

Research article
Terekhova O.A.
Lavrent'yeva S.I.
Ivachenko L.E.
DOI:
https://doi.org/10.23670/IRJ.2022.118.4.093
Issue: № 4 (118), 2022
Published:
2022/04/18
PDF

DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2022.118.4.093

ВЛИЯНИЕ ПОГОДНЫХ УСЛОВИЙ НА ЭНЗИМАТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ СЕМЯН СОИ, ВЫРАЩЕННЫХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРИРОДНЫХ ЦЕОЛИТОВ

Научная статья

Терехова О.А.1, Лаврентьева С.И.2, Иваченко Л.Е.3, *

1, 2, 3 Благовещенский государственный Педагогический университет, Благовещенск, Россия

* Корреспондирующий автор (ivachenko-rog[at]yandex.ru)

Аннотация

Исследовано влияние погодных условий на удельную активность и множественные формы каталазы, пероксидазы, рибонуклеазы и амилазы семян сои сорта Лидия, выращенных на полях с использованием природных цеолитов Вангинского месторождения (фракция 0,8-2,5 мм) в концентрации 15 т/га. Установлено, что погодные условия влияют на энзиматическую активность оксидоредуктаз и гидролаз сои. Оксидоредуктазы сои больше подвержены изменениям под влиянием климата на молекулярном уровне, вследствие чего отмечены значительные изменения в электрофоретических спектрах каталаз и пероксидаз семян сои. Показано, что внесение в почву природных цеолитов Вангинского месторождения вызвало повышение удельной активности каталазы, пероксидазы, рибонуклеазы и амилазы семян сои сорта Лидия, за исключением каталазы в 2017 году (засуха), что свидетельствует об усилении адаптивного потенциала сои.

Ключевые слова: Glycinemax (L.) Merrill, погодные условия, цеолиты, каталаза, пероксидаза, рибонуклеаза, амилаза, удельная активность, множественные формы.

THE INFLUENCE OF NATURAL ZEOLITES ON ENZYMATIC ACTIVITY OF SOYBEAN SEEDS

Research article

Terekhova O.A.1, Lavrent'yeva S.I.2, Ivachenko L.E.3, *

1, 2, 3 University Blagoveshchensk State Pedagogical, Blagoveshchensk, Russia

* Corresponding author (ivachenko-rog[at]yandex.ru)

Abstract

The influence of weather conditions on the specific activity and multiple forms of catalase, peroxidase, ribonuclease and amylase of soybean seeds of the variety Lydia, grown in the fields using natural zeolites of the Vanginsky deposit (fraction 0.8-2.5 mm) at a concentration of 15 t / ha. It has been established that weather conditions affect the enzymatic activity of soybean oxidoreductases and hydrolases. Soy oxidoreductases are more susceptible to changes under the influence under the influence of climate at the molecular level, as a result of which significant changes were noted in the electrophoretic spectra of catalases and peroxidases of soybean seeds. It was shown that the introduction of natural zeolites from the Vanginsky field into the soil caused an increase in the specific activity of catalase, peroxidase, ribonuclease, and amylase in soybean seeds of the Lydia variety, with the exception of catalase in 2017 (drought), which indicates an increase in the adaptive potential of soybeans.

Keywords:Glycine max (L.) Merrill, weather conditions, zeolites, catalase, peroxidase, ribonuclease, amylase, specific activity, multiple forms.

Введение

Главной сельскохозяйственной культурой на Дальнем Востоке России является соя (Glycinemax (L.) Merrill). Расширение посевных площадей сои в Амурской области объясняется не только возрастанием интереса к ней как ценной высокобелковой, кормовой, пищевой культуре, но и благоприятными почвенно-климатическими условиями для её возделывания [16]. Изменение климата имеет важное значение для сельского хозяйства, причём этот факторимеет как положительные, так и отрицательные последствия. Использование современной агротехнологии представляет опасность для сельскохозяйственных растений, а, следовательно, и здоровья населения. Значительный эффект для увеличения урожайности, улучшения продуктивности и плодородия почв приносит применение в растениеводстве цеолитов [1],[20],[24]. Природные цеолиты, благодаря своим уникальным свойствам находят все большую сферу применения и являются относительно дешевым сырьем по сравнению с использованием синтетических материалов [30]. Ценность природного цеолита определяется наличием у него уникальных молекулярных и каталитических свойств, обусловленных кристаллохимическими особенностями, способностью к катионному обмену, потере и поглощению воды и других молекул без разрушения структурного каркаса. Химический состав цеолитового сырья является одним из важных показателей его качества и зависит от месторождения полезного ископаемого. В зависимости от содержания Si/Al и катионного состава цеолитов обуславливаются их ионообменные свойства, стойкость к агрессивным веществам и высоким температурам, способность к модифицированию и ряду других технологических характеристик. Природные цеолиты повышают количество обменно-поглощенного кальция, способствуют увеличению емкости поглощения почвы [12], уменьшению содержания токсичных элементов [13], поглощают из почвы ядовитые для растений элементы, как ртуть, свинец, кобальт и другие [17]. Цеолиты оказывают влияние на продуктивность, ростовые показатели и активность пищеварительных ферментов животных [26]. Основным компонентом цеолитов является оксид кремния, содержание которого в Вангинском месторождении (Амурская область) составляет 67,63 % [2],[19]. В 1990 году в Амурской области было открыто крупное Вангинское месторождение природных цеолитов, залежи которых достигают 50 млм. тонн. Проведенная экологическая и химико-токсическая экспертиза Вангинских цеолитов Амурской области подтвердила их абсолютную безвредность для окружающей среды. Содержание ртути, свинца, мышьяка, кадмия, находится в пределах допустимого уровня [10].

Приспособление организма к постоянно меняющимся условиям окружающей среды обусловливают ферменты, которые являются основным механизмом адаптации [4],[6]. Все внутриклеточные реакции органических веществ, процессы анаболизма и катаболизма тесно интегрированы в систему метаболизма. Регуляторные особенности метаболической системы проявляются в ее способности координировано изменять значения субстратных потоков и концентрацию интермедиатов в изменяющихся условиях так, чтобы в клетке поддерживалось стационарное состояние ключевых метаболитов и основных физиологических характеристик. К наиболее информативным показателям внутриклеточного метаболизма относятся оксидоредуктазы. Это связано с участием оксидоредуктаз в биоэнергетических процессах [22]. В группу оксидоредуктаз включаются каталаза (КАТ, КФ 1.11.1.6) и пероксидаза (ПОД, КФ 1.11.1.7) [11],[29]. По удельной активности и множественным формам ферментов можно оценить уровень устойчивости сои, в том числе к цеолитам [7]. Кроме оксидоредуктаз, погодные условия вызывают экспрессию ферментов гидролитического комплекса, в частности рибонуклеазы (РНКаза) (К.Ф. 3.1) и амилазы (К.Ф. 3.2.1.1.). Углеводно-активные ферменты участвуют в синтезе, гидролизе и модификации углеводов. Рибонуклеазы, обладая широкой субстратной специфичностью чувствительны к изменениям факторов внешней среды [6].

Цель работы – изучить влияние погодных условий на активность каталазы, пероксидазы, рибонуклеазы и амилазы семян сои сорта Лидия, выращенных с использованием природных цеолитов.

Методы и принципы исследования

Материалом исследования служил сорт сои Лидия селекции ФГБНУ «Всероссийского научно-исследовательского института сои» г. Благовещенска Амурской области. Сою выращивали на поле ОАО «ОрбитаАгро» с. Бугровое Тамбовского района (49°53′00″ СШ 12°74′20″ ВД) в вегетационные периоды 2017 и 2018 годов. В почву вносили природный цеолит Вангинского месторождения (фракция 0,8-2,5 мм) в концентрации 15 т/га. Контролем являлась соя, выращенная без внесения цеолита.

Экстракт белков сои получали путем гомогенизации семян (500 мг) сои. Белок определяли по методу Лоури [23], удельную активность каталазы, амилазы и рибонуклеазы сои ‒ спектрофотометрическим [5],[14],[25], удельную активность пероксидазы ‒ фотоэлектроколориметрическим методом по Бояркину в модификации А.Т. Мокроносова [9]. Множественные формы пероксидаз, каталаз, РНКаз и амилаз выявляли методом электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ). Фракционирование растворимых белков проводили в 7,5%-ом ПААГ при 4 °С по Дэвису [21] в модификации для белков сои [5]. Выявление на геле зон с ферментативной активностью (форм ферментов) проводили соответствующими гистохимическими методами [5],[8],[28]. Локализацию форм исследуемых ферментов устанавливали по относительной электрофоретической подвижности (Rf). Каждая форма ферментов сои согласно Rf была ранее обозначена: для амилаз – А1-А10, РНКаз – Р1-Р12, каталаз – К1-К14, пероксидаз – П1-П18 [4],[6].

Полученные экспериментальные данные были обработаны с помощью программного обеспечения Statistica 10, графическое представление данных – Excel (2010). Результаты выражали как среднее (n = 6) ± стандартное отклонение, различия считались статистически значимыми при p<0,05.

Основные результаты и обсуждение

Известный факт, что физиологический покой подвижен и динамичен, и возможен только когда организм получает из среды все необходимые для жизнедеятельности вещества. В результате столкновения организма, а если точнее клетки, с экстремальными условиями (резкие колебания температуры, влажности, наличие тяжелых металлов), приводят к нарушению гомеостаза. В данном случае в работу включаются ряд ферментов, которые являются механизмом адаптации к изменяющимся условиям среды.

Вегетационные периоды за исследуемые два года характеризовались очень высокими тепловыми ресурсами, сумма активных температур (более 10°С) во всех случаях была выше на 60-200°С, чем среднемноголетние значения. Однако условия увлажнения варьировали. Так, 2017 и 2018 годы оказались засушливыми и незначительно засушливыми, гидротермический коэффициент (ГТК) составил 1,1 и 1,4 соответственно (таблица).

Таблица 1 –Оценка погодных условий по Тамбовскому району за период вегетации сои, 2017–2018 года

Месяц Сумма осадков, мм (среднемноголетние/ год) Сумма температур > 10 °С ГТК Оценка периодов погоды
1 2 3 4 5 6
2017 V 46/38 398 1 засушливый
VI 87/104 552 1,9 влажный
VII 127/54 788 0,7 сухой
VIII 131/42 601 0,7 сухой
IX 82/47 349 1,3 незначительно засушливый
за период 495/285 2301/2688 1,1 засушливый
2018 V 46/39 462 0,8 очень засушливый
VI 87/117 513 2,3 переувлажнённый
VII 127/117 856 1,4 незначительно засушливый
VIII 131/89 595 1,5 незначительно засушливый
IX 82/32 372 0,9 очень засушливый
за период 495/394 2301/2798 1,4 незначительно засушливый

Критерии засушливости (увлажнения) приведены по Л.И. Сверловой [15].В 2017 году наблюдалось неравномерное распределение ресурсов тепла и влаги: очень жаркий и засушливый май сменился прохладным июнем с повышенным количеством осадков, которых выпало в 1,5 раза больше многолетней нормы (85 мм). Однако вторая половина лета была сухой и очень жаркой. Количество осадков в июле и августе составило 96 мм, это меньше многолетней нормы на 50 %. Известно, что соя предъявляет повышенные требования к влаге, особенно в период цветения и бобообразования. Поэтому сложившиеся погодные условия 2017 года могли оказать отрицательное влияние на созревание семян. Такое сочетание тепла и влаги оказало влияние на снижение энзиматической активности семян культурной сои.

На начальном этапе развития сои в мае, июне 2018 года складывалось пограничное распределение ресурсов тепла и влаги: май оказался очень засушливым, а июнь переувлажненный. Погодные условия в июле, августе были оптимальные с достаточным количеством тепла и влаги. Сентябрь оказался очень засушливым, хотя в целом за период выпало достаточное количество осадков 394 мм. Сумма активных температур составила 2798 °С.

Анализ удельных активностей исследуемых ферментов семян сои сорта Лидия контрольных образцов за исследуемые вегетационные периоды позволил выявить относительную их стабильность (рисунок).

1

Рис.1 – Удельная активность (I) и схемы энзимограмм (II):

(А)каталазы;(Б)пероксидазы;(В)рибонуклеазы; (Г)амилазы семян сои, выращенных на почве, содержащей цеолиты (1). К – контроль (без цеолитов)

Примечание: стрелка – показывает направление электрофореза (от катода к аноду). Справа указана нумерация множественных форм ферментов

Однако, в оптимальных условиях 2018 года (влажно, тепло) отмечено повышение удельной активности амилазы, что, вероятно, связано с увеличением синтеза крахмала и скоростью его гидролиза [3] Засуха в период бобообразования в 2017 году оказала незначительный стресс, что, по-видимому, привело к нарушению клеточных мембран сои. В результате удельная активность антиоксидантного фермента – каталазы увеличилась. Внесение в почву цеолитов вызвало увеличение удельной активности каталазы, пероксидазы и амилазы в 1,5-2 раза. Следует отметить, что удельная активность РНКазы семян сои сорта Лидия, выращенных с использованием цеолитов в 2017 году (засушливый) увеличилась в 5 раз, а в 2018 году – в 3 раза. Известно, что РНКазная активность, обнаружена у ряда белков патогенеза PR-10 («pathogenesis-related»), так называемых – «индуцируемых белков, связанных с защитой» (Inducibledefence-relatedproteins). Поэтому индукция экстраклеточных РНКаз может быть связана непосредственно с формированием устойчивости к эдафическому фактору [31].

В ходе наших экспериментов было показано, что при внесении цеолитов в условиях засухи (2017 г.)

Установлено снижение удельной активности каталаз и повышение удельной активности пероксидаз семян сои. Очевидно, это связано с особенностями внутриклеточного метаболизма оксидоредуктаз сои [27].

Процесс адаптации растений представляет сложный комплекс приспособительных реакций и затрагивает структурную и функциональную оптимизацию всех уровней и структур. В основе адаптации растений лежит изменчивость физиологических, биохимических и морфологических приспособительных реакций, находящихся под генетическим контролем. Ключевые регуляторные ферменты представлены в виде изоферментных систем [18].

Изучение схемы энзимограмм исследуемых ферментов семян сои, выращенных с применением природных цеолитов в течение вегетационных периодов 2017 и 2018 годов позволило выявить значительные изменения в наборе множественных форм оксидоредуктаз, которые, вероятно, больше подвержены абиотическим факторам среды. В свою очередь гидролазы семян сои в данных условиях оказались более стабильными по электрофоретической подвижности.

Заключение

Показано, что погодные условия влияют на энзиматическую активность оксидоредуктаз и гидролаз сои. Причем оксидоредуктазы сои больше подвержены изменениям под влиянием климата на молекулярном уровне. Установлено, что внесение в почву природных цеолитов Вангинского месторождения вызвало повышение удельной активности каталазы, пероксидазы, рибонуклеазы и амилазы семян сои сорта Лидия, за исключением каталазы в 2017 году (засуха), что свидетельствует об усилении адаптивного потенциала сои.

Таким образом, использование активности ферментов оксидоредуктаз и гидролаз является важным звеном в концепции срочной неспецифической адаптации к среде с варьирующими параметрами.

Конфликт интересов Не указан. Conflict of Interest None declared.

Список литературы / References

  1. Абаев А. А. Использование цеолитов для повышения продуктивности сои. / А. А. Абаев // Агрохимия. – 2008. – № 2. – С. 26-32.
  2. Антиоксидантные и иммуномодулирующие свойства природных цеолитов. / К. С. Голохваст, А. М. Паничев, А. Н. Гулъков и др. // Тихоокеанский медицинский журнал. – 2009. – № 3 (37). – С. 68-70.
  3. Джамеев В.Ю.Содержание крахмала в семядолях прорастающей сои в условиях холодового стресса. / В. Ю. Джамеев, В. В. Жмурко // Физиология и биохимия растений. – 1997. – Т. 29, № 5. – С.370-376.
  4. Иваченко Л.Е. Роль биологически активных веществ сои в адаптации к условиям выращивания: монография ИИУ / Л. Е. Иваченко, А. С. Коничев. – МГОУ, 2016. – 154 с.
  5. Иваченко Л.Е. Методы изучения полиморфизма ферментов сои: учебное пособие./ Л. Е. Иваченко. – Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2008. – 138с.
  6. Лаврентьева С.И. Влияние агроэкологических условий выращивания на рибонуклеазную активность сои. / С. И. Лаврентьева, М. В. Якименко. – Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2013. – 128 с.
  7. Лаврентьева С.И. Удельная активность рибонуклеаз проростков сои, выращенных на почве, содержащей сульфат цинка и цеолиты. cб. Фундаментальные иприкладные исследования в области химии и экологии. Материалы международной научной конференции. Курск (21-23 сентября, 2016). / С. И. Лаврентьева, Г.В. Чечелева. – Изд-во:ЗАО «Университетская книга» 2016. – С. 164-166.
  8. Левитес Е.В. Генетика изоферментов растений. / Е. В. Левитес. – Новосибирск: Наука, 1986. – 145 с.
  9. Малый практикум по физиологии растений: Учеб. Пособие. / Под ред. А.Т. Мокроносова. – М.: Изд-во МГУ, 1994. – 184 с.
  10. Мощевикина Т.В. Экологические аспекты применения природных цеолитов Вангинского месторождения в животноводстве. дисс. кандидата биологических наук по специальности 03.00.16. – Красноярск, 2000. – 138 с.
  11. Ферменты антиоксидантной системы – индикаторы разных сценариев ксилогенеза: в раннем онтогенезе и во взрослом состоянии (на примере BetulaPendulaRoth). / К. М. Никерова, Н. А. Галибина, Ю. Л. Мощенская и др. // Труды карельского научного центра Российской академии наук. – 2018. – № 6. – С. 68–80.
  12. Парахин Н.В. Основы растениеводства на загрязненных радионуклидами почвах. / Н. В. Парахин // Земледелие. – 2008. – № 5. – С.10-11.
  13. Просянников Е.В. Использование капролита, цеолита и гумата-люкс при выращивании рассады томата Текст. / Е. В. Просянников // Агрохимия. – 2008. – №3. – С. 20-26.
  14. Рогожин В.В.Практикум по физиологии и биохимии растений: учеб. пособие. / В. В. Рогожин, Т. В. Рогожина. – СПб.: Изд-во ГИОРД, 2013. – 352 с.
  15. Сверлова Л.И. Сельскохозяйственная оценка продуктивности климата Восточной Сибири, Дальнего Востока и трассы БАМ для ранних яровых культур. / Л. И. Сверлова. – Гидрометиздат, 1980. – 183 с.
  16. Синеговская В.Т. Посевы сои в Приамурье как фотосинтезирующие системы : [монография] / В. Т. Синеговская // Российская акад. с.-х. наук, Всероссийский науч.-исслед. ин-т сои. – Благовещенск, 2005. – 119 с.
  17. Сокаев К.Е.Содержание тяжелых металлов в почве и растительной продукции при применении агромелиорантов Текст. / К. Е. Сокаев, P. M. Сокаева // Плодородие. – 2008. – № 2. – С. 3-4.
  18. Чесноков Ю.В. Биохимические маркеры в генетических исследованиях культурных растений: применимость и ограничения (обзор). / Ю. В. Чесноков // Сельскохозяйственная биология. – 2019. – Т. 54, № 5. – С. 863-874.
  19. Юрков В.В. Цеолиты Амурской области. / В. В. Юрков, С. В. Ланкин, С. В. Барышников // Вестник ДВО РАН. – 2004. – №1. – С. 69-79.
  20. Янченко Е.А. Применение цеолитсодержащих препаратов в растеневодстве. / Е. А. Янченко // В сборнике: Земельные ресурсы: перспективы использования в ЮФО. Материалы научно-практической конференции, посвященной 25-летию специальности «Землеустсройство». Министерство сельского хозяйства РФ, ФГОУ ВПО «Новочеркасская государственная мелиоративная академия». – 2007. – С.39-41.
  21. DevisB.J. Discelectrophoresis. II. Methodandapplicationtohumanserumproteinse/ B. J. Devis// Annalsof the New York Academy of Sciences. – 1964. – Vol. 121. – № 1. – P. 404–427.
  22. The soybean purple acid phosphatase GmPAP14 predominantly enhances external phytate utilization in plants. / Kong Y., Li X., Wang B., Li W. et al. // Frontiers in Plant Science. — — V. 9. — P. 292.
  23. Lowry, O.H. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O.H. Lowry. // J.Biol.Chem. – 1951. – V. 193, №1. – P. 265-275.
  24. The influence of natural zeolites on growth, development and yield of sunflower / K. M. Mukhametkarimov, S. M. Kulzhanova, Zh .B. Bekpergenova et al.// Modern Science. – 2017. – № 6-1. –pp. 41-45.
  25. Rassel, W.E. The precipitation of polyribonucleotides with magnesium salte and etanol/ W.E. Rassel. // J. Biol. Chem. – 1963. – V. 238, № 9. – P. 3053-3057.
  26. Effect of Zinc-Bearing Zeolite Clinoptilolite on Growth Performance, Nutrient Retention, Digestive Enzyme Activities, and Intestinal Function of Broiler Chickens. / Tang Z.G., Wen C., Li P., Wang T. et al. // Biological trace element research. – 2014. ‒ V. 158, I. 1. – P. 51-57. DOI: 10.1007/s12011-014-9900-3.
  27. Teng X.-L. Identification of a Catalase-Phenol Oxidase in Betalain Biosynthesis in Red Amaranth (Amaranthus cruentus). / Chen, N., Xiao, X.-G. //frontiers in Plant Science. – (2016). – 6. DOI:10.3389/fpls.2015.01228.
  28. Wendel, J.L. Visualization and interpretation of plant isozymes / J.L. Wendel, N.F. Weeden// In. D.E. Soltis and P.S. Soltis (eds.), Isozymes in plant biology. – Dioscorides Press, Portland, 1989. – P. 5-45.
  29. Effects of cadmium exposure on the growth, photosynthesis, and antioxidant defense system in two radish (Raphanus sativus L.) cultivars / Xin J., Zhao X.H., Tan Q.L. et al. // Photosynthetica. – 2019. – Vol. 57(4). – P. 967–973.
  30. Bio-based phenolic-branched-chain fatty acid isomers synthesized from vegetable oils and natural monophenols using modified H+-Ferrierite zeolite(Article). / Yan Z., Wagner K., et al. //Industrial Crops and Products. – 2018. ‒ V. 114. – P.115-122.
  31. The Activity of Hydrolases and Their Protein Inhibitors in Potato Tissues at Phytophthora infestans infection and Stability Inductors Processing. / Yarullina L. G., Ibragimov R. I., Shpirnaya Burkhanova I. A., et al. // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. – 2018. – Vol. 9. №. 3. – Рp. 1042–1048.

Список литературы на английском языке / References in English

  1. AbaevA. A. Ispolzovaniye tseolitov dlya povysheniya produktivnosti soi. [The use of zeolites to increase the productivity of soybeans]. / A. A. Abaev // Agrochemistry. – 2008. – No. 2. – pp. 26-32. [in Russian]
  2. Antioksidantnyye i immunomoduliruyushchiye svoystva prirodnykh tseolitov [Antioxidant and immunomodulatory properties of natural zeolites.]. / K. S. Golokhvast. A. M. Panichev. A. N. Gulkov et al. // Tikhookeanskiy meditsinskiy zhurnal [Pacific Medical Journal]. – 2009. – № 3 (37). – pp. 68-70. [in Russian]
  3. Dzhameev V.Yu., Zhmurko V.V. Starch content in cotyledons of germinating soybeans under cold stress conditions. / V. Yu. Dzhameyev. V. V. Zhmurko // Fiziologiya i biokhimiya rasteniy [Plant Physiology and Biochemistry].– 1997. – Vol. 29. No 5. – pp. 370-376. [in Russian]
  4. Ivachenko L. E. Rol biologicheski aktivnykh veshchestv soi v adaptatsii k usloviyam vyrashchivaniya: monografiya IIU [The role of biologically active substances in soybeans in adaptation to growing conditions: monograph.: IIU ]. / L. E. Ivachenko. A. S. Konichev. – MGOU. 2016. – 154 p. [in Russian]
  5. Ivachenko, L.E. Metody izucheniya polimorfizma fermentov soi: uchebnoye posobiye [Methods for studying polymorphism of soybean enzymes: a tutorial]. / L. E.Ivachenko. – Blagoveshchensk: BSPU Publishing House, 2008. – 138p.
  6. Lavrentieva S.I.Vliyaniye agroekologicheskikh usloviy vyrashchivaniya na ribonukleaznuyu aktivnost soi [Influence of agroecological growing conditions on ribonuclease activity of soybeans. (monograph)]. / S. I. Lavrentieva, M. V. Yakimenko. – Blagoveshchensk: BSPU Publishing House, 2013. – 128 p. [in Russian]
  7. Lavrentyeva S.I. Udelnaya aktivnost ribonukleaz prorostkov soi. vyrashchennykh na pochve. soderzhashchey sulfat tsinka i tseolity. cb. Fundamentalnyye iprikladnyye issledovaniya v oblasti khimii i ekologii. Materialy mezhdunarodnoy nauchnoy konferentsii. Kursk (21-23 sentyabrya. 2016). [Specific activity of ribonucleases in soybean seedlings grown on soil containing zinc sulfate and zeolites. cb. Fundamental and applied research in the field of chemistry and ecology. Materials of the international scientific conference. Kursk (September 21-23, 2016)] / S. I. Lavrentyeva. G.V. Checheleva. – Publishing house: JSC "University Book" 2016. P. 164-166. [in Russian]
  8. Levites E. V. Genetika izofermentov rasteniy [Genetics of plant isozymes]. / E. V. Levites. – Novosibirsk: Nauka, 1986.– 145 p. [in Russian]
  9. Mokronosov, A.T. Malyy praktikum po fiziologii rasteniy: Ucheb. Posobiye. [Small workshop on plant physiology: Textbook. Allowance]. / A. T.  Mokronosov. – Publishing house of Moscow State University, 1994. – 184 p. [in Russian]
  10. Moschevikina T.V. Ekologicheskiye aspekty primeneniya prirodnykh tseolitov Vanginskogo mestorozhdeniya v zhivotnovodstve. diss. kandidata biologicheskikh nauk po spetsialnosti 03.00.16. – Krasnoyarsk. [Environmental aspects of the use of natural zeolites of the Vanginsky field in animal husbandry. diss. candidate of biological sciences, specialty 03.00.16. Krasnoyarsk]. – 2000. – 138 p. [in Russian]
  11. Enzymes of the antioxidant system – indicators of different scenarios of xylogenesis: in early ontogeny and in adulthood (for example, Betula Pendula Roth). [Fermenty antioksidantnoy sistemy – indikatory raznykh stsenariyev ksilogeneza: v rannem ontogeneze i vo vzroslom sostoyanii (na primere Betula Pendula Roth)]. / K. M. Nikerova. N. A. Galibina. Yu. L. Moshchenskaya et al. // Trudy karelskogo nauchnogo tsentra Rossiyskoy akademii nauk [Proceedings of the Karelian Scientific Center of the Russian Academy of Sciences]. – 2018. – No 6. – pp. 68–80. [in Russian]
  12. Parakhin N.V. Osnovy rasteniyevodstva na zagryaznennykh radionuklidami pochvakh. [Fundamentals of crop production on radionuclide-contaminated soils Text.] /N. V. Parakhin // Zemledeliye [Agriculture]. – 2008. – No 5. – pp. 10-11. [in Russian]
  13. Prosyannikov E. V. Ispolzovaniye kaprolita. tseolita i gumata-lyuks pri vyrashchivanii rassady tomata Tekst. [The use of caprolite, zeolite and luxury humate in growing tomato seedlings Text.]. / E. V. Prosyannikov // Agrokhimiya [Agrochemistry]. – 2008. – No 3. – pp. 20-26. [in Russian]
  14. Rogozhin V.V. Praktikum po fiziologii i biokhimii rasteniy: ucheb. posobiye [Workshop on plant physiology and biochemistry: textbook. Allowance]. / V. V. Rogozhin. T. V. Rogozhina. – SPb .: Publishing house GIORD, 2013. – 352 p. [in Russian]
  15. Sverlova L.I. Selskokhozyaystvennaya otsenka produktivnosti klimata Vostochnoy Sibiri. Dalnego Vostoka i trassy BAM dlya rannikh yarovykh kultur [Agricultural assessment of the productivity of the climate of Eastern Siberia, the Far East and the BAM route for early spring crops]. / L. I. Sverlova. –Gidrometizdat, 1980. – 183 p. [in Russian]
  16. Sinegovskaya V. T.Posevy soi v Priamurye kak fotosinteziruyushchiye sistemy : [monografiya] [Soybean crops in the Amur region as photosynthetic systems: [monograph]]./ V. T. Sinegovskaya // Rossiyskaya akad. s.-kh. nauk. Vserossiyskiy nauch.-issled. in-t soi.[Russian Acad. s.-kh. sciences, All-Russian scientific research. in-t soy]. – Blagoveshchensk, 2005. – 119 p. [in Russian]
  17. Sokayev K. E. Soderzhaniye tyazhelykh metallov v pochve i rastitelnoy produktsii pri primenenii agromeliorantov Tekst. [PM Content of heavy metals in soil and plant products when using agromeliorants Text.]. / K. E. Sokayev. P. M. Sokayeva // Plodorodiye [Fertility]. – 2008. – No 2. – pp. 3-4. [in Russian]
  18. Chesnokov Yu. V. Biokhimicheskiye markery v geneticheskikh issledovaniyakh kulturnykh rasteniy: primenimost i ogranicheniya (obzor). [Biochemical markers in genetic studies of cultivated plants: applicability and limitations (review)]. / Yu. V. Chesnokov // Selskokhozyaystvennaya biologiya [Agricultural biology]. – 2019. – Vol. 54. No 5. – pp. 863-874. [in Russian]
  19. Yurkov V.V. Tseolity Amurskoy oblasti. [Zeolites of the Amur Region] / V. V. Yurkov. S. V. Lankin. S. V. Baryshnikov // Vestnik DVO RAN [. Bulletin of the FEB RAS]. – 2004. – No 1. – pp. 69-79. [in Russian]
  20. Yanchenko E. A. Primeneniye tseolitsoderzhashchikh preparatov v rastenevodstve [The use of zeolite-containing preparations in crop production]. / E. A. Yanchenko // V sbornike: Zemelnyye resursy: perspektivy ispolzovaniya v YuFO. Materialy nauchno-prakticheskoy konferentsii. posvyashchennoy 25-letiyu spetsialnosti «Zemleustsroystvo». Ministerstvo selskogo khozyaystva RF. FGOU VPO «Novocherkasskaya gosudarstvennaya meliorativnaya akademiya» [in the collection: Land resources: prospects for use in the Southern Federal District. Materials of the scientific-practical conference dedicated to the 25th anniversary of the specialty "Land management". Ministry of Agriculture of the Russian Federation, Federal State Educational Institution of Higher Professional Education “Novocherkassk State Melioration Academy”.]. – 2007. – pp. 39-41.[in Russian]
  21. DevisB. J. Discelectrophoresis. II. Methodandapplicationtohumanserumproteinse / B. J. Devis // Annalsof the New York Academy of Sciences. – 1964. – Vol. 121. – № 1. – P. 404–427.
  22. The soybean purple acid phosphatase GmPAP14 predominantly enhances external phytate utilization in plants. / Kong Y., Li X., Wang B., Li W. et al. // Frontiers in Plant Science. — — V. 9. — P. 292.
  23. Lowry, O. H. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O.H. Lowry. // J.Biol.Chem. – 1951. – V. 193, №1. – P. 265-275.
  24. The influence of natural zeolites on growth, development and yield of sunflower / K. M. Mukhametkarimov, S. M. Kulzhanova, Zh .B. Bekpergenova et al. // Modern Science. – 2017. – № 6-1. – pp. 41-45.
  25. Rassel, W. E. The precipitation of polyribonucleotides with magnesium salte and etanol/ W. E. Rassel. // J. Biol. Chem. – 1963. – V. 238, № 9. – P. 3053-3057.
  26. Effect of Zinc-Bearing Zeolite Clinoptilolite on Growth Performance, Nutrient Retention, Digestive Enzyme Activities, and Intestinal Function of Broiler Chickens. / Tang Z.G., Wen C., Li P., Wang T. et al. // Biological trace element research. – 2014. ‒ V. 158, I. 1. – P. 51-57. DOI: 10.1007/s12011-014-9900-3.
  27. Teng X.-L. Identification of a Catalase-Phenol Oxidase in Betalain Biosynthesis in Red Amaranth (Amaranthus cruentus). / Chen, N., Xiao, X.-G. //frontiers in Plant Science. – (2016). – 6. DOI:10.3389/fpls.2015.01228.
  28. Wendel, J. L. Visualization and interpretation of plant isozymes / J.L. Wendel, N.F. Weeden// In. D.E. Soltis and P.S. Soltis (eds.), Isozymes in plant biology. – Dioscorides Press, Portland, 1989. – P. 5-45.
  29. Effects of cadmium exposure on the growth, photosynthesis, and antioxidant defense system in two radish (Raphanus sativus L.) cultivars  / Xin J., Zhao X.H., Tan Q.L. et al. // Photosynthetica. – 2019. – Vol. 57(4). – P. 967–973.
  30. Bio-based phenolic-branched-chain fatty acid isomers synthesized from vegetable oils and natural monophenols using modified H+-Ferrierite zeolite(Article). / Yan Z., Wagner K., et al. // Industrial Crops and Products. – 2018. ‒ V. 114. – 115-122.
  31. The Activity of Hydrolases and Their Protein Inhibitors in Potato Tissues at Phytophthora infestans infection and Stability Inductors Processing. / Yarullina L. G., Ibragimov R. I., Shpirnaya Burkhanova I. A., et al. // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. – 2018. – Vol. 9. №. 3. – Рp. 1042–1048.