QUANTITATIVE DETERMINATION OF ENROFLOXACIN IN PHARMACEUTICAL DRUGS
QUANTITATIVE DETERMINATION OF ENROFLOXACIN IN PHARMACEUTICAL DRUGS
Abstract
Due to the constantly developing production and invention of new medicines for veterinary use, the issue of quality control is relevant. In this case, quality control of medicines implies carrying out a number of analyses that are used to determine the quality indicators of a medicinal product in accordance with the specification for a specific drug. At the moment, a number of methods for quality control of medicines is huge, therefore the main task is to choose the optimal method according to the State and European Pharmacopoeia for quality control of forms of medicines.
Due to the urgency of the problem of quality control of medicines for veterinary use, a comparative analysis of physico-chemical and instrumental methods of quality control of medicines for veterinary use was carried out according to the indicators: authenticity and quantitative content, in which the active substance is: enrofloxacin.
1. Введение
Ветеринарная медицина – область научных знаний и практической деятельности, направленных на борьбу с болезнями животных, охрану людей от зооантропонозов, выпуск доброкачественных в санитарном отношении продуктов животноводства и решение ветеринарно-санитарных проблем защиты окружающей среды .
Антибиотики – это химические соединения биологического происхождения, оказывающие избирательное повреждающее (бактериостатическое) или губительное (бактерицидное) действие на микроорганизмы. Это вещества, продуцируемые микроорганизмами (чаще всего микроскопическими грибами, реже – бактериями) или их синтетические аналоги и производные, способные подавлять жизнедеятельность других микроорганизмов. Существуют антибиотики с антибактериальной, противогрибковой и противоопухолевой активностью , .
Использование антибиотиков в ветеринарии началось сразу после их открытия. Это объясняется рядом преимуществ, которыми обладают антибиотики по сравнению с другими химиотерапевтическими веществами: антимикробное действие в очень малых количествах; широкий спектр противомикробного действия, что особенно важно при использовании антибиотиков в борьбе с инфекциями, вызванными несколькими возбудителями; сравнительно малая токсичность , , .
2. Объекты и методы исследования
Энрофлоксацин (1-Циклопропил-7(4-этилпиперазин-1-ил)-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота) – антибактериальный лекарственный препарат группы фторхинолов. Бледно-желтый или светло-желтый кристаллический порошок. Нерастворим в воде, легко растворим в метаноле. Молекулярная масса = 359,4 г/моль.
Химическая формула: C19H22FN3O3.
Рисунок 1 - Структурная формула энрофлоксацина
Он подавляет бактериальную ДНК, нарушает синтез ДНК, рост и деление бактерий; вызывает выраженные морфологические изменения (в том числе в клеточной стенке и мембранах), что приводит к быстрой гибели бактериальной клетки. Действует бактерицидно на грамотрицательные микроорганизмы в период покоя и деления, на грамположительные микроорганизмы – в период деления , .
При внутримышечном введении энрофлоксацин быстро всасывается в кровь и проникает во все органы и ткани, достигая максимальной концентрации через 0,5-1 часа после введения. Терапевтическая концентрация энрофлоксацина сохраняется в организме после однократной инъекции в течение 24 часов. Выводится энрофлоксацин из организма в основном в неизменном виде и частично в виде метаболита-ципрофлоксацина, преимущественно с мочой, у лактирующих животных также с молоком , .
Эффективность энрофлоксацина прямо пропорциональна его концентрации, чувствительная бактериальная клетка погибает через 20-30 минут после начала его действия. Этот антибиотик продемонстрировал, что даже после окончания курса лечения микробная клетка подавляется как в стационарной фазе, так и в состоянии репликации , .
При оральном применении энрофлоксацин хорошо абсорбируется, биодоступность достигается порядка 80%, пик концентрации наблюдается примерно через 1 час после введения. Антибиотик разносится по всему организму, с белками плазмы связывается лишь 27% лекарственного вещества. Большие концентрации проникают в ткани гепатобиллиарной и репродуктивной систем, почки и легкие; терапевтические дозы – в кости, синовии, мышцы, кожу и плевральную жидкость. Небольшие концентрации проникают в центральную нервную систему , .
Дозировка энрофлоксацина в ветеринарном применении представлена в таблице 1.
Таблица 1 - Дозировка энрофлоксацина
Вид животного | Доза препарата, мл /10 кг массы животного | |
Энрофлоксацин 5% раствор для инъекций | Энрофлоксацин 10% раствор для инъекций | |
Крупный рогатый скот | 1 | 0,5 |
Овцы, козы | 1 | 0,5 |
Свиньи | 1 | 0,5 |
Собаки, кошки | 1 | - |
К методам определения энрофлоксацина в лекарственных препаратах выделяют: высокоэффективную жидкостную хроматографию, спектофотометрический метод (УФ-спектрофотометрия, ИК-спектрометрия), метод капиллярного электрофореза, титриметрический метод и метод визуального контроля , , , .
3. Результаты исследований
В ходе проведенных исследований мы определили количественное содержание действующего вещества в лекарственном препарате при помощи различных методов. В ходе исследований мы брали лекарственные препараты с действующим веществом энрофлоксацин и установили подлинность действующего вещества путем проведения количественного определения содержания вещества в препаратах. Для этого применяли различные физико-химические и инструментальные методы анализа (УФ-спектрофотометрия, титриметрия). Полученные результаты сравнили с нормами, заявленными производителем в спецификации к препарату , .
Для количественного определения содержания и подлинности энрофлоксацина в лекарственных препаратах были взяты препараты: Энрофлон 10%, Энроксил 150 мг таблетки, Байтрил 5%.
Результаты исследований представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Результаты исследований
Препарат | Метод контроля | Показатель энрофлоксацина в образце |
| Количественное определение | |
Энрофлон 10% | УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,000 г D = 0,4043 ДВ = 0,090 г/см3 2 проба: mн = 1,0002 г D = 0,4039 ДВ = 0,090 г/см3 ДВ ср = 0,090 г/см3 |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2501 г V = 0,65 мл ДВ = 0,093 г/см3 2 проба: mн = 0,2503 г V = 0,64 мл ДВ = 0,092 г/см3 ДВ ср = 0,093 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
Энтроксил 150 мг таблетки | Количественное определение | |
УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,0201 г D = 0,7903 ДВ = 0,150 г/см3 2 проба: mн = 1,0520г D = 0,8001 ДВ = 0,150 г/см3 ДВ ср = 0,150 г/см3 | |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2500 г V = 1,10 мл ДВ = 0,158 г/см3 2 проба: mн = 0,2450 г V = 1,00 мл ДВ = 0,146 г/см3 ДВ ср = 0,152 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
Байтрил 5% | Количественное определение | |
УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,0061 г D = 0,2409 ДВ = 0,052 г/см3 2 проба: mн = 1,0001 г D = 0,2412 ДВ = 0,053 г/см3 ДВ ср = 0,053 г/см3 | |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2505 г V = 0,40 мл ДВ = 0,057 г/см3 2 проба: mн = 0,2503 г V = 0,39 мл ДВ = 0,056 г/см3 ДВ ср = 0,057 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
По результатам полученных данных можно сделать следующие выводы: оба метода подходят для количественного определения энрофлоксацина в лекарственных препаратах. При проведении титрования больше вероятность погрешности, так как объем титранта уходит в пределах не больше 1. Для наименьшей вероятности погрешности и более точной результативности на практике применяют метод спектрофотометрического определения энрофлоксацина в препарате.
Для того чтобы проверить подинность энрофлоксацина, применялись методы качественной реакции и УФ-спектрофотометрии. В результате были получены следующие данные:
а) качественная реакция;
Рисунок 2 - Качественная реакция на энрофлоксацин
Рисунок 3 - Спектр энрофлоксацина
Таблица 3 - Метрологическая характеристика результатов количественного определения содержания энрофлоксацина в лекарственных препаратах
Наименование лекарственных препаратов | Среднее арифметическое значение | Сходимость между параллельными (единичными) измерениями,% | Сравнительная оценка методов, % | ||
УФ-спектроскопия | Титриметрия | УФ-спектроскопия | Титриметрия | ||
Энрофлоксацин 10% | 0,090 | 0,093 | 0,001 | 0,01 | 0,03 |
Энроксил 150 мг таблетки | 0,150 | 0,152 | 0,02 | 0,02 | 0,01 |
Байтрил 5 % | 0,053 | 0,057 | 0,001 | 0,07 | 0,07 |
По результатам полученных данных можно сделать выводы:
- количественное определение энрофлоксацина в исследуемых препаратах можно проводить различными методами, которые были рассмотрены в нашем опыте;
-оптимальным методом для проведения количественного определения энрофлоксацина в препарате является метод УФ-спектрофотометрии, так как является менее затратным методом в использовании реактивов и по времени проведения испытания;
- полученное количество действующего вещества в исследуемых образцах соответствует нормам, установленным производителями по спецификации.
4. Заключение
Экспериментальные данные количественного содержания действующего вещества в лекарственных препаратах показали, что полученное количество действующего вещества в исследуемых образцах соответствует нормам, установленным производителям по спецификации, а это значит, что производители исследуемых образцов, ответственно подходят к производству и поддерживают качество лекарственных препаратов на высоком уровне. Также в ходе исследования было установлено, что подобранные условия и методики эксперимента применимы не ко всем препаратам, т.к. в состав могут входить компоненты, мешающие проведению анализа.
Проведена сравнительная характеристика методов контроля для оценки качества лекарственных препаратов, вследствие чего на основе полученных экспериментальных данных подобраны оптимальные условия и методы для определения таких показателей, как «Подлинность» и «Количественное содержание» энрофлоксацина.