Применение стромально-васкулярной фракции в пародонтологии

Пародонтит является одной из главных причин потери зубов, что приводит к таким последствиям, как нарушение жевательной функции, изменения прикуса, атрофии костной челюстной ткани

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) считает заболевания пародонта пандемией, распространённость которой вызывает тревогу в разных возрастных группах и географических регионах. Заболеваниями пародонта страдают около 19% взрослого населения планеты, что составляет более миллиарда случаев. В том же отчёте по европейским странам указано, что более 50% населения Европы могут страдать от той или иной формы пародонтита, при этом более 10% страдают от его тяжёлой формы, а среди населения в возрасте 60–65 лет этот показатель возрастает до 70–85%

Таким образом, несмотря на разнообразие имеющихся протоколов и методов лечения хронического пародонтита, результаты имеют кратковременный эффект. Исходя из этого, поиск новых алгоритмов и методов лечения, создание усовершенствованных медикаментозных средств, содержащих в своем составе ингредиенты, обладающие необходимыми свойствами для стабилизации процесса и удлинения сроков ремиссии при хроническом пародонтите, является актуальным.

В последние годы в различных отраслях медицины широко используется метод терапии стромально-васкулярной фракцией. Методика проведения СВФ в травматолгии: Липоаспират интенсивно отмывали холодным поддерживающим раствором, забуференными фосфатами (ЗФР; «Биолот», Россия), после чего урлиферментативной диссоциации с помощью 0,1% раствора коллагеназы 1А типа (Sigma-Aldrich, США) в течение 45 минут при 37 °С и периодическом встряхивании. По окончании инкубации проводят инактивацию фермента и двукратную отмывку клеточной суспензии с помощью дополнительного раствора. Нерасщепленные фрагменты упругой ткани удаляли фильтрованием через нейлоновые фильтры (размером 100 цт). Полученные таким образом радиоактивносодержащие так называемой стромально-васкулярной группы клеток (СВФ) ресуспендировали в последовательном растворении, подсчитывали количество и обеспечивали целостность (по исключению трипанового синего; Sigma-Aldrich, США). Клетки СВФ вводили однократно интраартикулярно под УЗИ-навигацией в глубину 3 мл клеточной взвеси на сустав

Основанная на выделении из жировой ткани стромально-васкулярная фракция (СВФ) представляет собой гетерогенную клеточную популяцию эндотелиоцитов, эритроцитов, фибробластов, клеток гладкой мускулатуры, перицитов, макрофагов и мезенхимальных стволовых клеток, которые имеют пластически-адгезивный характер. Мезенхимальные стволовые клетки обеспечивают противовоспалительное, иммуномодулирующее и антиапоптотическое действие, а также стимулируют ангиогенез, рост и дифференцировку тканей в месте повреждения. Поэтому СВФ имеет огромный потенциал для терапевтического применения при заболеваниях, сопровождающихся локальным повреждением мягких тканей и развитием воспалительного процесса

Проведено лечение хронического пародонтита (ХП) (К 05.3) у 65 человек от 38 до 66 лет. Критериями включения являлись лица с индексом массы тела более 30, старше 35 лет, любого пола. Критериями исключения: беременность, хронические заболевания, индекс массы тела менее 30, новообразования, сахарный диабет, гипертония. Рандомно пациенты были разделены на 2 группы в зависимости от вида лечения:

I — основная группа (ОГ) 33 пациента с ХП, которым к дополнению стандартного лечения проводили инъецирование стромально-васкулярной фракции (СВФ) в ткани пародонта;

II — контрольная группа (КГ) 32 пациента с ХП, которым применяли базовую терапию лечения.

Всем пациентам до начала лечения было проведено стоматологическое обследование, диагностика: сбор анамнеза; заполнение медицинской документации; осмотр полости рта (десна гиперемирована, в патологический процесс вовлечены ткани пародонта нижней челюсти, отмечается неприятный запах изо рта, мягкие и твердые зубные отложения, отечность маргинальной десны); индекс кровоточивости Мюллемана — при зондировании с помощью пародонтологического пуговчатого зонда, у ОГ и КГ индекс составил 3,5±0,3 р<0,001, и индекс Грина-Вермиллиона (ИГР-у) — оценка количества зубного налета и зубного камня, то есть состояние уровня гигиены полости рта, окрашивая 6 зубов, ОГ составил 3,3±0,3 р<0,001, КГ 3,5±0,3 р<0,001, что говорит о неудовлетворительной гигиене полости рта; на снимке КЛКТ, обнаружено расширение периодонтальной щели, резорбция костных стенок альвеол на ½, разрушение кортикальной пластинки; пародонтальным зондом зарегистрировали глубину карманов 5,1мм,и при помощи пинцета патологическую подвижность зубов 2 степени; «Важным звеном патогенеза, сопровождающим все стадии ХП, являются нарушения микрососудистого русла, которые обуславливают клинические проявления данного заболевания»

65 пациентам была проведена санация полости рта, проведение базовой терапии, путем профессиональной гигиены (путем снятия наддесневых и поддесневых зубных отложений, с помощью ультразвука, Аэрофлоу, кюретами Gracey удаляли поддесневые зубные отложения, сглаживая поверхность зубных корней, обработка пародонтальных карманов, антисептическое полоскание полости рта антисептиком «Мирамистин», нанесение повязки на десну геля «Метрогил дента» 2 раза в день).

Основной группе после базовой терапии было проведенено следующее лечение. По методике тумесцентной липоаспирации проводят забор жировой ткани. Под местной анестезией делают микроразрез на передней брюшной стенке, вводят раствор (анестетик + солевой состав + адреналин), под его действием жировые клетки становятся выраженными для их забора, с использованием канюли для липосакции, диаметром 4 мм, длиной 300 мм, с одним центральным отверстием и двумя боковыми и коннектором для шприца на 60 мл. Возвратно-поступательными движениями выполняют забор жировой ткани в объеме 150 мл. Для выделения стромально-васкулярной фракции из жировой ткани используют специализированные двойные шприцы Arthrex АСР®, объемом 15 мл. После получения достаточного объема жировой ткани шприцы Arthrex АСР® в количестве 4 штук, заполненные жировой тканью, помещаются в настольную центрифугу Rotofix 32 А с роторами-крестовинами, свободно подвешенными стаканами. Проводят центрифугирование при режиме 2500 оборотов/минуту на протяжении 4 минут. После однократного центрифугирования удаляют тумесцентную жидкость и выполняют перенос жировой ткани в шприц Luer-Lock 10 мл. Далее с использованием коннектора диаметром 1,4 мм и двух шприцов Luer-Lock 10 мл проводят последовательный перенос оставшейся жировой ткани из шприца в шприц через коннектор в количестве 30 раз с целью механической обработки. После чего обработанную ткань переносят в шприцы Arthrex АСР для повторного центрифугирования при режиме 2500 оборотов/минуту на протяжении 4 минут. За счет центробежной силы происходит разделение жировой ткани на компоненты, получается чистая стромально-васкулярная фракция, состоящая из мезенхимальных стволовых клеток, преадипоцитов, гладкомышечных клеток, эндотелиальных клеток, перицитов, T-клетки, макрофагов. Заключительный этап заключается в переносе стромально-васкулярной фракции с использованием коннектора диаметром 1,4 мм в шприц Luer-Lock объемом 3 мл. Затем стромально-васкулярную фракцию инъецируют в ткани пародонта в области пародонтального кармана в 2 точках по 1мл. Инъекции СВФ проводят с помощью шприца диаметром иглы 27—31G, общее количество введенных клеток от 15 до 25 млн. Курс лечения 3 процедуры с интервалом 5 дней.

При местном применении СВФ оказывает противовоспалительное, иммуномодулирующее и антиапоптотическое действие, а также стимулируют ангиогенез, рост и дифференцировку тканей в месте повреждения, обладает фагоцитарной, буферной трофической, гемостатической, защитной способностью. За счет центробежной силы происходит разделение жировой ткани на компоненты, получается чистая стромально-васкулярная фракция, состоящая из мезенхимальных стволовых клеток, преадипоцитов, гладкомышечных клеток, эндотелиальных клеток, перицитов, T-клеток, макрофагов.

Улучшение показателей основной группы: резорбция костной ткани уменьшилась за 3 на 25,5%, пародонтальный карман на 1,4 мм, подвижность на 1 степень (рис. 1).

Рисунок 1 - Динамика показателей

DOI:10.60797/IRJ.2025.159.12.1

Таким образом, процессы клеточной регенерации и активации метаболических процессов в тканях пародонта приводят к восстановлению пародонтального прикрепления и костной ткани межзубной перегородки, десна плотно охватывает шейки зубов.

Отмечается значимое снижение индекса кровоточивости — на 42,9% (р<0,05), при аналогичном сдвиге у пациентов контрольной группы — на 20% (р<0,05). Курсовое применение лечебных мероприятий у пациентов ОГ группы привело к снижению гигиенического индекса на 40,0% (р<0,05), при уменьшении параметра у пациентов контрольной группы на фоне базовой терапии –на 15,0% (р<0,05) в сравнении с первоначальными значениями (рис. 2).

Рисунок 2 - Динамика индексов

DOI:10.60797/IRJ.2025.159.12.2

Клинически проявляются улучшения состояния десны, снижение кровоточивости и отечности маргинальной и папиллярной десны.

На фоне лечебной терапии с применением СВФ у основной группы наблюдается возрастание объема перфузии кровотока — достигающие нормы 30,02±4,36 перф.ед. Для контрольной группы, несмотря на повышение показателя, он все равно ниже нормы 23,02±0,34 перф.ед. (р <0,001). Кроме того, значимы различия при р <0,001 в скорости перфузии кровотока после лечения в основной группе, что доказывает эффективность предложенного лечения по сравнению с традиционным подходом (рис. 3).

Рисунок 3 - Динамика гемодинамических показателей

DOI:10.60797/IRJ.2025.159.12.3

Предложенным методом лечения с инъецированием в ткани пародонта, а именно в область пародонтальных карманов, СВФ, мы добились стойкой ремиссии, восстановление зубодесневого пародонтального прикрепления и уровня минерализации костной ткани межзубных перегородок альвеолярных костей, нормализации микрогемодинамики в тканях пародонта, что подтверждает эффективность данного метода, и необходимости его внедрения в клиническую стоматологию.