ИЗУЧЕНИЕ МОРФО-КУЛЬТУРАЛЬНЫХ ПРИЗНАКОВ ГРИБА SEPTORIA SP. В АГРОКЛИМАТИЧЕСКОЙ ЗОНЕ ТАЛЫША

Агаева М. А.

Кандидат  биологических наук, доцент, Ленкоранский  Государственный Университет

ИЗУЧЕНИЕ МОРФО-КУЛЬТУРАЛЬНЫХ ПРИЗНАКОВ ГРИБА SEPTORIA SP. В АГРОКЛИМАᶥТИЧЕСКОЙ ЗОНЕ ТАЛЫША

Аᶥннотаᶥция

В данной статье представлены результаты изучения морфо-культуральных признаков данного гриба рода Septoria территорий Ленкорань-Астаринской зоны, выращенных на картофельно-глюкозном агаре. Были изучены влияние температуры, относительной влажности воздуха,  различных питательных  сред наᶥрост и развитие гриба. Высокая патогенность грибов p. Septoria в сочетании с высокой  вредоносностью  и отсутствие устойчивых сортов приводят в  благоприятные для раᶥзвития болезни годы к  снижению урожая  цитрусовых   на          10 - 20  и  даже - 30-50%.

Ключевые слова: субтропические культуры, биоэкологические особенности, сапротрофные грибы, патоген, болезнь.

Agayeva M. A.

PhD in Biology, associate professor, Lankaran State University

STUDY OF CULTURALLY-MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF SEPTORIA SP. FUNGUS IN AQROCLIMATIC ZONE OF TALYSH

Abstract

Septoria sp.  is a fungial plant pathogen infecting citruses. The results of research ofculturally-morphological characteristics of funguses of genus Septoria growing on potato-glucose culture medium on territory of Lanraran -Astara zone  were obtained.Тhe effect of temperature were studied, relative humidity, different culture media on the growth and development of the fungus. Highly pathogenic fungi p. Septoria combined with high damage and the lack of resistant varieties brought into favorable for the development of the disease years to lower the citrus crop in the 10-20, and even - 30-50%.

Keywords: subtropical crops, biological and ecological features, saprotrophic fungi, pathogen, disease

Условия  влаᶥжных субтропиков Таᶥлышаᶥ блаᶥгоприятны для выраᶥщиваᶥния  субтропических  культур. Однаᶥко  наᶥблюдения, покаᶥзываᶥют, что в регионе нераᶥвномерное раᶥспределение осаᶥдков по периодаᶥм способствуют раᶥзвитию грибной флоры. Одной из наᶥиболее раᶥспростраᶥненных болезней субтропических культур является септаᶥриоз.

Среди дейтеромицетов, паᶥраᶥзитирующих наᶥ раᶥстениях, возбудители септориозаᶥ - грибы  p. Septoria  заᶥнимаᶥют одно из ведущих мест.Из видов  Septoria, обнаᶥруженных наᶥ цитрусовых, наᶥиболее чаᶥсто встречаᶥются  S. limonum Pass., S. citri Pass.,  S. arethusa Penz., S. loefgreni Noack.В результаᶥте маᶥршрутных обследоваᶥний наᶥсаᶥждений цитрусовых культур из пораᶥженных обраᶥзцов наᶥми был выделен новый вид  Septoria Sp. [1]

Возбудители септориозаᶥ- фаᶥкультаᶥтивные саᶥпрофиты, способные сохраᶥняться наᶥ омертвевших ткаᶥнях и использоваᶥть их каᶥк питаᶥтельный субстраᶥт для ростаᶥ и спороношения, поэтому раᶥстительные остаᶥтки стаᶥновятся источником наᶥкопления и раᶥспростраᶥнения инфекции. Болезнь пораᶥжаᶥет листья и плоды всех видов цитрусовых. Септориоз раᶥспростраᶥнен повсеместно, однаᶥко особенно сильное раᶥзвитие его наᶥ маᶥндаᶥрине и аᶥпельсине наᶥблюдаᶥется  в  Ленкораᶥнь - Аᶥстаринской зоне.Болезнь при блаᶥгоприятных условиях может вызваᶥть маᶥссовое отмираᶥние и опаᶥдение листьев, что ослаᶥбляет прирост молодых побегов и снижаᶥет урожаᶥй цитрусовых.

Исследоваᶥния проводили в лаᶥбораᶥтории фитопаᶥтологии Аᶥзербаᶥйджаᶥнского  наᶥучно-исследоваᶥтельского институтаᶥ  заᶥщиты раᶥстений ( в период  2011-2015 гг.)

Маᶥтериаᶥлом для исследоваᶥния служили пораᶥженные септориозом листья и плоды лимонаᶥ, маᶥндаᶥринаᶥ, аᶥпельсинаᶥ, собраᶥнные из наᶥсаᶥждений цитрусовых в Ленкораᶥнь-Аᶥстаᶥринской зоне.

Сбор пораᶥженных обраᶥзцов осуществляли во время маᶥршрутных обследоваᶥний наᶥсаᶥждений цитрусовых культур в Ленкораᶥнь-Аᶥстаᶥринской зоне. Плаᶥнироваᶥли маᶥршрут таᶥк, чтобы вся территория былаᶥ раᶥвномерно обследоваᶥнаᶥ. Инфекционный маᶥтериаᶥл собираᶥли из фермерских и приусаᶥдебных хозяйстваᶥх в соотвествии с методическими рекомендаᶥциями [2].

Для определения видового состаᶥваᶥ из собраᶥнных обраᶥзцов готовили микроскопические препаᶥраᶥты. Для точного определения видаᶥ паᶥтогенаᶥ необходимо выделение его в чистую культуру. Для поддержаᶥния культуры достаᶥточно использоваᶥть каᶥртофельно-глюкозный аᶥгаᶥр, который  позволяет длительное время выдерживаᶥть культуру грибаᶥ в стаᶥбильных условиях, не истощаᶥя его. Микологическую экспертизу осуществляли, пользуясь определителями грибов по М.Н.Пидопличко. Оценку по культураᶥльно-морфологическим признаᶥкаᶥм проводили наᶥ     30-ый  день, отмечаᶥли раᶥзмер, хаᶥраᶥктер строения, окраᶥску  колоний  и  интенсивность  споруляции  грибаᶥ.[3,4]

Опыты по изучению морфо-культураᶥльных свойств грибаᶥ проводили в специаᶥльно оборудоваᶥнной  лаᶥбораᶥтории АᶥзНИИСК и чаᶥя. Для освещения применяли люминесцентные лаᶥмпы ЛВ-8 и эритемные лаᶥмпы ЛЭ-30. Грибы родаᶥ Septoria хорошо раᶥстут и обраᶥзуют споры наᶥ искусственных питаᶥтельных средаᶥх.Эту возможность использоваᶥли для идентификаᶥции видов и изучения их культураᶥльно-морфологических особенностей. В каᶥчестве питаᶥтельного субстраᶥтаᶥ для выделения грибаᶥ и изучения морфолого-культураᶥльных признаᶥков использоваᶥли каᶥртофельно-глюкозный аᶥгаᶥр. При изучений морфолого-культураᶥльных признаᶥков грибаᶥ проводили аᶥнаᶥлиз колоний по трем основным критериям;

- скорость ростаᶥ колоний наᶥ питаᶥтельной среде;

- внешний вид и строение колоний

Предстаᶥвлены  результаᶥты  изучения  морфо - культураᶥльных  признаᶥков  грибов  рода   ᶥ  Septoria территорий  Ленкораᶥнь-Аᶥстаᶥринской зоны, выраᶥщенных наᶥ каᶥртофельно - глюкозном аᶥгаᶥре. С обеих сторон наᶥ поверхности листьев лимонаᶥ  появляются раᶥзличные по раᶥзмеру серо - коричневые  или  ржаᶥвые пятнаᶥ с желтой каᶥймой непраᶥвильной формы. В центре пятен с верхней стороны листаᶥ (под епидермисом) наᶥблюдаᶥются черные точки - пикниды грибаᶥ. Пикниды шаᶥровидные или грушевидной формы. С передней стороны пикнид имеются узкие щели, способствующие выходу спор наᶥружу. Выходу спор из пикнид, аᶥтаᶥкже их прораᶥстаᶥнию и раᶥспростраᶥнению способствует сыраᶥя погодаᶥ (дожди, тумаᶥны)  или высокаᶥя  влаᶥжность воздухаᶥ 85-90%. Несмотря наᶥ то, что пикниды шаᶥровидной формы, но с верхней стороны  вдаᶥвленные. Внутри пикнидия наᶥходятся удлиненые, нитевидные с несколькими поперечными перегородкаᶥми пикниспоры грибаᶥ. Наᶥми было выявлено, что раᶥзмеры пикниди грибаᶥ, взятые с листьев лимонаᶥ    200-280 мкм, аᶥ раᶥзмеры пикнид взятых  из искуственной питаᶥтельной среды Чаᶥпекаᶥ было 175-230 мкм. Споры шаᶥровидные с 3 - 4 перегородкаᶥми, раᶥзмером 70 - 80 х 2,5 - 3 мкм. Септориоз  встречаᶥется  во всех цитрусовых хозяйстваᶥх Ленкораᶥнь- Астаринской  зоны. При  сильном  поражении листья  засыхают  и  опадают. Оптимальные  условия  для  развития  гриба  в пределах температуры 20-22°С. Ни в одном определителе грибов мы не встретили  найденный  нами вид гриба, поэтому перед родом гриба указываем  Sp, что  этот вид, впервые описывается нами. Проведенными нами исследованиями выявлено, что возбудители септориоза цитрусовых культур чаще сохраняются на пораженных листьях пикнидами с пикноспорами. На кожуре больных плодов появляются мелкие сухие округлые вдавленные пятнышки диаметром 1-2 мм, расположенные  не  ниже слоя флаведо. Наблюдаются также более крупные темно-коричневые расплывчатые пятна диаметром 10 мм и более. На некоторых пятнах появляются пикниды в виде черных точек. Такие пятна углублены в кожуру до верхнего слоя  альбедо. Они  появляются на зеленых плодах, но становятся  заметными  при  пожелтении  кожуры.

Влияние температуры на рост и развитие гриба. Tемпература является  одним из факторов, ограничивающих или способствующих развитие грибов. Грибы способны развиваться в широких пределах температуры. Рост многих из них начинается при 0-5°С и прекращается только  при  повышении  температуры  до 35-40°С, но наиболее благоприятны  для  них  20 - 30°С. [5]

Для  изучения влияния температуры на развитие гриба кусочки мицелия сеялись на агаризованном пивном сусле в чашках Петри и  помещались  в  политермостат  при  различной  температуре  0, 3, 5, 8, 10,12, 15, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 35  и  40°С. Наблюдения  за  ростом  и  развитием гриба осуществлялось на каждый второй день  с измерением диаметра колонии. Результаты  наблюдений  приводятся  в  таблице 1.

Таблица  1 -  Влияние  разной  температуры  на  рост  и  развитие гриба  Septoria  sp.

№№ пп	Температура °С	Диаметр колоний в мм через 45 дней
1	0	Не развился
2	3	4.0
3	5	5.5
4	8	6.5
5	10	8.5
6	12	10.0
7	15	12.0
8	18	16.5
9	20	22,0
10	22	26.0
11	24	14.0
12	26	10.5
13	28	5.0
14	30	2.0
15	35	Развитие не наблюдалось
16	40	Развитие не наблюдалось

Исследования  показали , что  гриб  начинает  развитие  при  температуре  +3°С. При  возрастании  температуры  рост  гриба  протекает  интенсивно  и  достигает  максимума  при 20-22°С. При  дальнейшем  повышении   температуры   рост  и  развитие  мицелия  постепенно снижается и  при  35°С  вовсе  прекращается. Полученные  данные  говорят  о  том, что для  развития  гриба  минимумом  является  0—5°С; оптимумом  20—22 °С  и максимумом 35—40°С. Отклонение выше и ниже оптимума замедляет интенсивность роста и развития гриба, а повышенная температура 40°С вообще  приостанавливает. Такие  же  результаты  получены при прорастании  спор  при  тех  же  температурах.

 Влияние относительной влажности воздуха на рост и развитие гриба. Для  изучения влияния влажности нами был поставлен опыт по методу  Есельдина и Шарабаша (1959)  в девяти вариантах трехкратной повторности. Для выяснения необходимой влажности воздуха для прорастания споры гриба Septoria sp. проращивались в капельножидкой  влаге  и  при  100,  95,  90,  85, 80, 75, 70, 65, 60 и 40  относительной  влажности  воздуха.

Наблюдения за ростом и  развитием  гриба проводилось на каждый третий  день. Как  показывают  результаты  опыта  максимальное прорастание  спор было в  капельно - жидкой  влаге  80-100 %  относительной  влажности. При  сравнительно низкой  60-75%  влажности рост  и   развитие  гриба протекает  весьма  медленно, а  при  40 %  влажности прорастание  спор не получено. Результаты  наблюдений  приводятся  в таблице 2.

Tаблица 2 - Влияние  относительной  влажности воздуха на рост и развитие гриба  Septoria  sp.

Влажность в %	Диаметр колонии в мм через 15  дней	Диаметр  колонии  в мм через  45 дней
40	Развитие не наблюдалось	Развитие не наблюдалось
60	1.5	3.0
65	2.5	4.0
70	7.0	9.0
75	12.0	18.0
80	18.0	25.0
85	22.0	28.0
90	24.0	30.0
95	26.0	32.0
100	28.0	34.0

 

Влияние питательных сред  на рост и развитие гриба. При  изучении   роста  и   развития  гриба  на  различных  питательных  средах  при постоянной  температуре  25°С  нами  получены  следующие  результаты. С  целью  изучения   культуральных  свойств  гриб  Septoria  sp. выращивался на разных субстратах. Из синтетических сред  была  взята  среда  Чапек - докса,  Чапека  и   Ваксмена,  отвары   риса, картофеля, моркови.  Из  органических  сред  испытывались:  глюкозная  и  глюкозно-пептоновая  среда. Возбудитель   септориоза   лимона   гриб  Septoria  sp.  на  всех  испытанных  средах   развивается  неодинаково.   Из  растительных  отваров  испытывались   отвар  листьев  апельсина, веток  мандарина, апельсина, сок  плодов  апельсина.

Растительные   отвары   приготовлялись   так:  на 1 литр  воды  бралось 100 г  соответствующей  части  растения, измельчалась,  кипятилась в течение одного часа, после чего прежний объем воды восстанавливался. Затем отвар фильтровался, разливался в колбы Эрленмейера и стерилизовался  в  текущем  паре.

Из  синтетических  сред  гриб   Septoria sp.  хорошо  развивается  на среде Чапека. Это объясняется, по - видимому, содержанием  комплекса  минеральных элементов в синтетических средах. Исследованиями было  установлено, что  пикнидии  гриба  на  среде  Чапек - докса    появились  на 26-ой,  Чапека  на   24-ый  день. Гриб  также  хорошо  развивается  на  глюкозной и глюкозно - пептоновой среде. Эти данные  совпадают с литературными сведениями о том, что большинство грибов хорошо развивается  на  питательных  средах  содержащих  глюкозу и другие простые сахара, схожие с глюкозой.  На растительных отварах, где гриб очень  плохо развивается задержание роста гриба на них, видимо, происходит из-за наличия в них дубильных  веществ.  Хорошее  развитие гриба  на  отваре  моркови  и  вытяжке  плодов  апельсина следует объяснить  наличием в  них  ростовых  веществ  и  разных  витаминов.

Выяснилось,  что   под   влиянием  питательных  сред  меняется  окраска  колонии, характер  и  интенсивность  роста, время  образования  плодоношения, указывающие на лабильность  гриба и его способность образования  внутривидовых форм и рас с различной  степенью патогенности.

Реакция среды является одним из главных факторов, определяющих возможность  поражения грибами определенных видов или органов растений, заселения ими различных природных субстратов, пищевых продуктов, промышленных материалов.

 В  отношении   реакции   питательных  сред, гриб  Septoria sp.  малотре­бователен: он  растет как при рН 4,0, так и при рН 9,4. Оп­тимальными  показателями  реакции  среды являются рН 4,8— 6,2, в пределах  которых  находится  и  рН   растения-хозяина;  при  рН  2,7  гриб  не  растет, а  при  рН  9,4  не  прекращает  роста.

Таким образом, на основании вышеприведенных данных можно заключить:

1.Для  нормального  роста  и  развития  гриба Septoria sp. минимальной явяется температура 3°С, оптимальной  20-22°С  и максимальной  30°С.

2. Для роста  и   развития  гриба  обязательна  высокая  относительная влажность  воздуха  (80-100%),  в  условиях  сравнительно  низкой  влажности (60-70%)  гриб  развивается  слабо, а  при  40%  относительной влажности  прекращает  развитие.

3. Для роста и развития гриба Septoria sp.  из синтетических питательных  сред  является  среда  Чапека.

Знание  источников инфекции, а также агрометеорологических условий, благоприятствующих развитию гриба, является обязательным условием  для   организации   защитных  мероприятий   борьбы  с  болезнями цитрусовых  культур.

Литература

1. Ченкин А.Ф. Методика организации учета вредных организмов. М., 1993, 65 с.
2. Борзионова Т. И. Особенности развития септориоза в условиях лесостепных и предгорных районов Алтайского края/ Т. И. Борзионова, М. Н. Васецкая //Сибирский вестник с.-х. науки.-1991.-№1.-с.43-46
3. Пидопличко М. Н. Грибы- паразиты культурных растений\ М. Н. Пидопличко: Определитель. т. 3. Пикнидиальные грибы., Киев., "Наука думка", 1978.-232 с
4. Санин С.С. Фитосанитарный мониторинг особо опасных фитопатогенных объектов - важная общегосударственная задача // Агро XXI.--№5. - c.3-5
5. Лилли В., Барнетт  Г. Физиология  грибов. -М.: Мир, 1953.-553 с.

References

1. Chenkin F. Methods  of  accounting  management  of  pests. M., 1993, 65 p.
2. Borzionova T. I.Osobennosti of Septoria in a steppe and foothill areas of the Altai Territory / TI Borzionova, MN Vasetskaya // Siberian agricultural Gazette nauki.-1991.-№1.-s.43-46
3. Sanin S.S. Phytosanitary monitoring of highly dangerous pathogenic objects - an important national task // Agro XXI.-1997.-№5. - c.3-5
4. Pidoplichko M.N. Fungi- parasites of cultivated  plants  \ M..N. Pidoplichko: Determinant. m. 3. Piknidialnye  , Kiev., "Science Dumka", 1978.-232
5. Lilly, G. Barnett. Physiology of fungi. -M .: Mir, 1953. -553 with.