КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭНРОФЛОКСАЦИНА В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТАХ
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭНРОФЛОКСАЦИНА В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТАХ
Аннотация
В связи с постоянно развивающимся производством и изобретением новых лекарственных препаратов для ветеринарного применения актуальным является вопрос осуществления контроля качества. Контроль качества лекарственных препаратов в данном случае подразумевает под собой проведение ряда анализов, которые используются для определения показателей качества лекарственного препарата в соответствии со спецификацией на конкретный препарат. На сегодняшний момент ряд методов контроля качества лекарственных препаратов огромен, поэтому главной задачей является выбор оптимального метода согласно Государственной и Европейской фармакопеи для контроля качества форм лекарственных препаратов.
В связи с актуальностью проблемы контроля качества лекарственных препаратов для ветеринарного применения, проводился сравнительный анализ физико-химических и инструментальных методов контроля качества лекарственных препаратов для ветеринарного применения по показателям: подлинность и количественное содержание, в которых действующим веществом является: энрофлоксацин.
1. Введение
Ветеринарная медицина – область научных знаний и практической деятельности, направленных на борьбу с болезнями животных, охрану людей от зооантропонозов, выпуск доброкачественных в санитарном отношении продуктов животноводства и решение ветеринарно-санитарных проблем защиты окружающей среды .
Антибиотики – это химические соединения биологического происхождения, оказывающие избирательное повреждающее (бактериостатическое) или губительное (бактерицидное) действие на микроорганизмы. Это вещества, продуцируемые микроорганизмами (чаще всего микроскопическими грибами, реже – бактериями) или их синтетические аналоги и производные, способные подавлять жизнедеятельность других микроорганизмов. Существуют антибиотики с антибактериальной, противогрибковой и противоопухолевой активностью , .
Использование антибиотиков в ветеринарии началось сразу после их открытия. Это объясняется рядом преимуществ, которыми обладают антибиотики по сравнению с другими химиотерапевтическими веществами: антимикробное действие в очень малых количествах; широкий спектр противомикробного действия, что особенно важно при использовании антибиотиков в борьбе с инфекциями, вызванными несколькими возбудителями; сравнительно малая токсичность , , .
2. Объекты и методы исследования
Энрофлоксацин (1-Циклопропил-7(4-этилпиперазин-1-ил)-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота) – антибактериальный лекарственный препарат группы фторхинолов. Бледно-желтый или светло-желтый кристаллический порошок. Нерастворим в воде, легко растворим в метаноле. Молекулярная масса = 359,4 г/моль.
Химическая формула: C19H22FN3O3.
Рисунок 1 - Структурная формула энрофлоксацина
Он подавляет бактериальную ДНК, нарушает синтез ДНК, рост и деление бактерий; вызывает выраженные морфологические изменения (в том числе в клеточной стенке и мембранах), что приводит к быстрой гибели бактериальной клетки. Действует бактерицидно на грамотрицательные микроорганизмы в период покоя и деления, на грамположительные микроорганизмы – в период деления , .
При внутримышечном введении энрофлоксацин быстро всасывается в кровь и проникает во все органы и ткани, достигая максимальной концентрации через 0,5-1 часа после введения. Терапевтическая концентрация энрофлоксацина сохраняется в организме после однократной инъекции в течение 24 часов. Выводится энрофлоксацин из организма в основном в неизменном виде и частично в виде метаболита-ципрофлоксацина, преимущественно с мочой, у лактирующих животных также с молоком , .
Эффективность энрофлоксацина прямо пропорциональна его концентрации, чувствительная бактериальная клетка погибает через 20-30 минут после начала его действия. Этот антибиотик продемонстрировал, что даже после окончания курса лечения микробная клетка подавляется как в стационарной фазе, так и в состоянии репликации , .
При оральном применении энрофлоксацин хорошо абсорбируется, биодоступность достигается порядка 80%, пик концентрации наблюдается примерно через 1 час после введения. Антибиотик разносится по всему организму, с белками плазмы связывается лишь 27% лекарственного вещества. Большие концентрации проникают в ткани гепатобиллиарной и репродуктивной систем, почки и легкие; терапевтические дозы – в кости, синовии, мышцы, кожу и плевральную жидкость. Небольшие концентрации проникают в центральную нервную систему , .
Дозировка энрофлоксацина в ветеринарном применении представлена в таблице 1.
Таблица 1 - Дозировка энрофлоксацина
Вид животного | Доза препарата, мл /10 кг массы животного | |
Энрофлоксацин 5% раствор для инъекций | Энрофлоксацин 10% раствор для инъекций | |
Крупный рогатый скот | 1 | 0,5 |
Овцы, козы | 1 | 0,5 |
Свиньи | 1 | 0,5 |
Собаки, кошки | 1 | - |
К методам определения энрофлоксацина в лекарственных препаратах выделяют: высокоэффективную жидкостную хроматографию, спектофотометрический метод (УФ-спектрофотометрия, ИК-спектрометрия), метод капиллярного электрофореза, титриметрический метод и метод визуального контроля , , , .
3. Результаты исследований
В ходе проведенных исследований мы определили количественное содержание действующего вещества в лекарственном препарате при помощи различных методов. В ходе исследований мы брали лекарственные препараты с действующим веществом энрофлоксацин и установили подлинность действующего вещества путем проведения количественного определения содержания вещества в препаратах. Для этого применяли различные физико-химические и инструментальные методы анализа (УФ-спектрофотометрия, титриметрия). Полученные результаты сравнили с нормами, заявленными производителем в спецификации к препарату , .
Для количественного определения содержания и подлинности энрофлоксацина в лекарственных препаратах были взяты препараты: Энрофлон 10%, Энроксил 150 мг таблетки, Байтрил 5%.
Результаты исследований представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Результаты исследований
Препарат | Метод контроля | Показатель энрофлоксацина в образце |
| Количественное определение | |
Энрофлон 10% | УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,000 г D = 0,4043 ДВ = 0,090 г/см3 2 проба: mн = 1,0002 г D = 0,4039 ДВ = 0,090 г/см3 ДВ ср = 0,090 г/см3 |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2501 г V = 0,65 мл ДВ = 0,093 г/см3 2 проба: mн = 0,2503 г V = 0,64 мл ДВ = 0,092 г/см3 ДВ ср = 0,093 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
Энтроксил 150 мг таблетки | Количественное определение | |
УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,0201 г D = 0,7903 ДВ = 0,150 г/см3 2 проба: mн = 1,0520г D = 0,8001 ДВ = 0,150 г/см3 ДВ ср = 0,150 г/см3 | |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2500 г V = 1,10 мл ДВ = 0,158 г/см3 2 проба: mн = 0,2450 г V = 1,00 мл ДВ = 0,146 г/см3 ДВ ср = 0,152 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
Байтрил 5% | Количественное определение | |
УФ-спектроскопия | 1 проба: mн = 1,0061 г D = 0,2409 ДВ = 0,052 г/см3 2 проба: mн = 1,0001 г D = 0,2412 ДВ = 0,053 г/см3 ДВ ср = 0,053 г/см3 | |
Титриметрия | 1 проба: mн = 0,2505 г V = 0,40 мл ДВ = 0,057 г/см3 2 проба: mн = 0,2503 г V = 0,39 мл ДВ = 0,056 г/см3 ДВ ср = 0,057 г/см3 | |
Подлинность | ||
Качественная реакция | Препарат дает положительную реакцию на окрашивание | |
УФ-спектрофотометрия | Максимумы спектра препарата соответствуют нормативам | |
По результатам полученных данных можно сделать следующие выводы: оба метода подходят для количественного определения энрофлоксацина в лекарственных препаратах. При проведении титрования больше вероятность погрешности, так как объем титранта уходит в пределах не больше 1. Для наименьшей вероятности погрешности и более точной результативности на практике применяют метод спектрофотометрического определения энрофлоксацина в препарате.
Для того чтобы проверить подинность энрофлоксацина, применялись методы качественной реакции и УФ-спектрофотометрии. В результате были получены следующие данные:
а) качественная реакция;
Рисунок 2 - Качественная реакция на энрофлоксацин
Рисунок 3 - Спектр энрофлоксацина
Таблица 3 - Метрологическая характеристика результатов количественного определения содержания энрофлоксацина в лекарственных препаратах
Наименование лекарственных препаратов | Среднее арифметическое значение | Сходимость между параллельными (единичными) измерениями,% | Сравнительная оценка методов, % | ||
УФ-спектроскопия | Титриметрия | УФ-спектроскопия | Титриметрия | ||
Энрофлоксацин 10% | 0,090 | 0,093 | 0,001 | 0,01 | 0,03 |
Энроксил 150 мг таблетки | 0,150 | 0,152 | 0,02 | 0,02 | 0,01 |
Байтрил 5 % | 0,053 | 0,057 | 0,001 | 0,07 | 0,07 |
По результатам полученных данных можно сделать выводы:
- количественное определение энрофлоксацина в исследуемых препаратах можно проводить различными методами, которые были рассмотрены в нашем опыте;
-оптимальным методом для проведения количественного определения энрофлоксацина в препарате является метод УФ-спектрофотометрии, так как является менее затратным методом в использовании реактивов и по времени проведения испытания;
- полученное количество действующего вещества в исследуемых образцах соответствует нормам, установленным производителями по спецификации.
4. Заключение
Экспериментальные данные количественного содержания действующего вещества в лекарственных препаратах показали, что полученное количество действующего вещества в исследуемых образцах соответствует нормам, установленным производителям по спецификации, а это значит, что производители исследуемых образцов, ответственно подходят к производству и поддерживают качество лекарственных препаратов на высоком уровне. Также в ходе исследования было установлено, что подобранные условия и методики эксперимента применимы не ко всем препаратам, т.к. в состав могут входить компоненты, мешающие проведению анализа.
Проведена сравнительная характеристика методов контроля для оценки качества лекарственных препаратов, вследствие чего на основе полученных экспериментальных данных подобраны оптимальные условия и методы для определения таких показателей, как «Подлинность» и «Количественное содержание» энрофлоксацина.