EXPERIMENTAL OBSERVATION OF HALF LETHAL DOSE DETERMINANT FOR TERRESTRIAL MOLLUSK FRUTICICOLA FRUTICUM
DOI:https://doi.org/10.23670/IRJ.2022.119.5.067
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЯ ПОЛУЛЕТАТЬНОЙ ДОЗЫ ДЛЯ НАЗЕМНОГО МОЛЛЮСКА FRUTICICOLAFRUTICUM
Научная статья
Черкасова Е.Е.1, *, Лаврентьева Г.В.2, Сынзыныс Б.И.3
1ORCID:0000-0003-0333-2177;
2ORCID: 0000-0003-2962-8427;
1, 2, 3Обнинский институт атомной энергетики, Обнинск, Россия;
2 Калужский филиал Московского государственного технического университета им. Н.Э. Баумана, Калуга, Россия
*Корреспондирующий автор (caterinacherkasova[at]yandex.ru)
Аннотация
На основании экспериментальных данных лабораторного эксперимента получены расчетные значения показателя полулетальной дозы облучения наземного моллюска через 60 суток после острого ɣ-облучения. Для проведения лабораторного эксперимента были подобраны условия содержания животных, приближенные к естественной среде обитания. При этом смертность моллюсков в контрольной группе оставалась на нулевом уровне в течение всего эксперимента. Для расчета показателя ЛД50/60 применен расчетный метод пробит-анализа с применением метода наименьших квадратов, показано адекватное применение данного метода в радиобиологических исследованиях. На основании расчетного показателя установлено, что третья возрастная группа наземных моллюсков является наиболее радиорезистентной.
Ключевые слова: наземный моллюск, ɣ-облучение, ЛД50/60, смертность, метод пробит-анализа.
EXPERIMENTAL OBSERVATION OF HALF LETHAL DOSE DETERMINANT FOR TERRESTRIAL MOLLUSK FRUTICICOLA FRUTICUM
Research article
CHerkasova E.E.1, *, Lavrent'eva G.V. 2, Synzynys B.I. 3
1ORCID: 0000-0003-0333-2177;
2 ORCID: 0000-0003-2962-8427;
1, 2, 3 Obninsk Institute for Nuclear Power Engineering, Obninsk, Russia;
2 Kaluga branch of Moscow state technical university of N.E Bauman, Kaluga, Russia
*Corresponding author (caterinacherkasova[at]yandex.ru)
Abstract
Based on experimental evidence of laboratory experiment, target value of half lethal radiation dose for terrestrial mollusk 60 days after acute ɣ-exposure was established. The experiment was carried out in close to natural animal habitat. Mollusks mortality rate in the control group remained at zero the whole time of the experiment. To produce the LD 50/60 indicator, probit analysis calculation method with least squares method was used, showing its adequate application in radiobiological research. In accordance with estimate indicator, it was established that the third age group of terrestrial mollusks is the most radioresistant.
Keywords: terrestrial mollusk, ɣ-exposure, LD 50/60, mortality rate, probit analysis method.
Введение
Одним из показателей, определяющих степень поражения организма, является смертность. При этом возможно определение степени необратимого поражения организма. В свою очередь оценку летального действия ионизирующего излучения на живые организмы возможно оценить по гибели организмов от дозы облучения [1]. Кроме того, Международная комиссия по радиационной защите (МКРЗ) рекомендует показатель смертности как один из приоритетных при изучении влияния радиационного фактора на представителей биоты [2].
Для определения показателя полулетальной дозы облучения общепринято использовать рентгеновское или γ-излучение [3]. Если за определенное время наступает гибель 50% подопытных животных, в данном случае говорят о полулетальной дозе (ЛД50) [4].Для ряда животных показатель ЛД50 имеют достаточно точные значения. Например, для рыб ЛД50 находится в диапазоне от 5 до 20 Гр, для амфибий – от 15 до 30 Гр. Однако значение показателя ЛД50 для наземных моллюсков варьирует в широком диапазоне, отличается на порядок и составляет от 20 до 200 Гр [5], а для эмбрионнов моллюсков – на два порядка и изменяется в диапазоне от 10 до 1000 Гр [6].
Данная работа направлена на экспериментальное определение значения ЛД50/60 (полулетальной дозы через 60 суток после облучения) для наземного моллюска F. fruticum трех возрастных групп после острого γ-облучения. Выбор биологического объекта (наземного моллюска) обосновывается следующим. Во-первых, моллюски давно признаны биоиндикатором при загрязнении окружающей среды [7], в том числе и радиоактивным [8], [9]. Во-вторых, учитывая международные требования в области радиационной защиты биоты, водные моллюски и почвенные беспозвоночные с недавнего времени рассматриваются как референтные виды, что отражено в публикации Научного комитета ООН по действию атомной радиации (НКДАР) [10]. Также необходимо отметить, что при изучении воздействия ионизирующего излучения на моллюсков основное внимание уделяется представителям водной малакофауны [11],[12], тогда как научной информации о воздействии радиационного фактора на наземных моллюсков накоплено мало. При этом нет четкого понятия даже о показателе полулетальной дозы облучения для этих представителей биоты, что восполняется данным научным исследованием.
Материалы и принципы исследования
Объектом исследований является наземный моллюск F. fruticum(улитка кустарниковая).Пробоотбор моллюсков осуществлялся на территории с фоновым содержанием техногенных радионуклидов [13], [14]. Всего было отобрано более 1000 особей без видимых внешних повреждений раковины. Для исследований были выбраны моллюски трех возрастных групп. Возраст моллюсков определялся по количеству оборотов раковины [15]. После пробоотбора моллюски содержались в пластиковых контейнерах с настилом из кокосового субстрата. Перед облучением моллюски находились в лаборатории для адаптации к новым условиям обитания. Облучение моллюсков осуществлялось на γ-установке ГУР – 120 в диапазоне доз от 10 до 300 Гр с шагом 10 Гр, мощность поглощённой дозы 30 Гр/ч.
Для определения ЛД50/60 был выбран расчетный способ пробит-анализа с применением метода наименьших квадратов [1]. Метод пробит-анализа применяется для изучения количественных зависимостей “доза – эффект” в фармакологии и токсикологии, а последние годы находит применение и в радиобиологических исследованиях [16], [17]. Так же данный метод применяется для изучения вероятных закономерностей распределения биологических видов [18].
Для расчета ЛД50/60изначально строится линия регрессии по методу наименьших квадратов с использование данных эксперимента. При этом используется прямолинейная зависимость, представленная не в общей форме ( , а в следующей: , где -это пробит (пробит определяется по таблице, в которой каждому проценту смертности соответствует определенное число (пробит)), а -десятичный логарифм от дозы, полученной испытуемыми животными.
Из таблицы, представленной в [1], следует, что:
- пробит =5 соответствует гибели 50% особей, т.е. дозе D=ЛД50;
- пробит =4 соответствует гибели 16 % особей, т.е. дозе D=ЛД16;
- пробит =6 соответствует гибели 84 % особей, т.е. дозе D=ЛД84.
Подставив эти значения в уравнение , получаем (1 – 3):
Основные результаты
На основании полученных экспериментальных данных относительно показателя смертности трех возрастных групп наземного моллюска после острого ɣ-облучения был применен расчетный способ пробит-анализа с применением метода наименьших квадратов для определения показателя ЛД50/60. При этом показатель ЛД50/60 составляет 118,7 ± 62,2 Гр, 115,6±33,9 Гр и 141,4 ±26,3 Гр для первой, второй и третьей возрастной группы наземного моллюска, соответственно (см. рисунок 1). Следует отметить, что смертность моллюсков в контрольной группе оставалась на нулевом уровне в течение всего эксперимента, что указывает на радиационно-индуцированный эффект в облученных группах животных.
Рис. 1 – ЛД 50/60 для трех возрастных групп наземного моллюска
Таким образом, устойчивость наземных моллюсков к воздействию ɣ-облучения увеличивается с увеличением возраста животного. При этом смертность в третьей возрастной группе животных ниже, чем во второй и первой возрастных группах на фоне практически идентичной смертности в первых двух возрастных группах. Подобные закономерности влияния ионизирующего излучения на разные возрастные стадии развития водных моллюсков отмечается, например, в исследованиях Гудкова Д.И. с соавторами [5], [19]. Исследователями установлено, что 30 Гр является полулетальной дозой для эмбрионов прудовиков на стадии трахофоры, а поглощенная доза 60 Гр вызывала полную гибель эмбрионов в течение 20 сут., при этом полулетальная доза облучения для взрослых особей моллюсков составила 120 Гр.
Следует отметить, что представители водной малакофауны относятся к радиорезистентым организмам, т.к. показатель ЛД50 по разным источникам варьирует от 20 до 200 Гр [5] и даже до 500 Гр [20]. При этом в исследовании [3] зарегистрированы случаи радиорезистентности в популяциях L. Stagnalis, после облучения дозой 500 Гр особи моллюсков выжили и дали яйцеклеточные массы, из которых впоследствии появились вполне жизнеспособные новорожденные [3].
Полученные в данной работе экспериментальные данные подтверждают высокую радиорезистентность и представителей наземной малакофауны с учетом показателя смертности. При этом устойчивость к воздействию радиационного фактора изменяется в зависимости от возраста особей. Подобные закономерности наблюдались ранее при изучении влиянии ионизирующего излучения на почвенную беспозвоночную биоту в зоне Восточно-Уральского радиоактивного следа, что отмечается в работе Алексахина Р.М. [21]. В исследовании укзано, что ювенильные фазы в онтогенезе беспозвоночных достаточно радиочувствительны несмотря на высокую радиорезистентность почвенной биоты.
Заключение
Впервые получены значения ЛД50/60 для наземных моллюсков трех возрастных групп в рамках лабораторного эксперимента. При этом установлено, что третья возрастная группа является наиболее радиорезестентной возрастной группой наземного моллюска F. fruticum. Также в рамках данного исследования представлено адекватное применение расчетного способа пробит-анализа с применением метода наименьших квадратов для радиобиологических исследований.
Конфликт интересов | Conflict of Interest |
Не указан. | None declared. |
Список литературы / References
- Платонов А.Г. Применение метода пробит-анализа в радиобиологии. Расчет полулетальной дозы ЛД50: Учебно-методическое пособие / А. Г.Платонов, М. Я. Ахалая. – М.: НИЯУ МИФИ, 2010. –36 с.
- ICRP Publication 108. Environmental protection: the concept and use of reference animals and plants // Ann. ICRP. – – V. 38. – № 4-6. – pp. 1-242.
- Михеев А. Н. Малые «дозы» радиобиологии. Моя маленькая радиобиологическая вера / А. Н. Михеев – К.: Фитосоциоцентр, 2016. – 371 c.
- Оськина Н. А. Влияние гамма-излучения и тяжелых металлов на покоящиеся яйца пресноводного рачка Moinamacrocopa : дис. … канд. биол. наук 03.02.10 : защищена 13.04.2021 /Оськина Наталия Александровна.Красноярск, 2020. – 121 c.
- Гудков И. Н. Радиобиология с основами радиоэкологии : учебное пособие / И. Н. Гудков, А. Г. Кудяшева, А. А. Москалёв. – Сыктывкар : Изд-во СыктГУ, 2015. – 512 с.
- Мурзин Н. В. Оценка воздействия радиоактивных веществ на экосистемы как целое / Н. В. Мурзин, В. Н. Лысцов // Проблемы анализа риска. – 2004. – Т. 1. – № 2. – С. 146-153.
- Петухова Г. А. Моллюски как чувствительные тест-индикаторы состояния перифитона при действии антропогенного пресса загрязнителей / Г. А. Петухова // Вестник Тюменского государственного университета.– 2005. – № 5. – С. 97-100.
- Цветнова О. Б. К вопросу о методах биодиагностики в условиях радиоактивного загрязнения / О. Б. Цветнова, А. И. Щеглов, В. В. Столбова // Радиационная биология. Радиоэкология. – 2014. – Т. 54. – № 4. – С. 423-431. DOI: 10.7868/S
- Радиационный экологический риск для наземной экосистемы в зоне влияния хранилища радиоактивных отходов / Г. В. Лаврентьева, О. А. Мирзеабасов, Б. И. Сынзыныс и др. // Радиация и риск (Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра). – 2018. – Т. 27. – № 4. – С. 65-75. DOI: 10.21870/0131-3878-2018-27-4-65-75.
- Sources and effects of ionizing radiation // Report to the General Assembly with Scientific Annexes. – Volume II, Scientific Annex E. – Effect of ionizing radiation on non-human biota. – New York United Nations, 2011. – 95 p.
- Гусева В. П. Исследование фито- и зоопланктонных организмов как биоиндикаторов радиоактивного загрязнения воды в районе размещения предприятий ЯТЦ / В. П. Гусева, М. Я. Чеботина, А. В. Трапезников// Вопросы радиационной безопасности. – 2006. – № 4(44). – С. 70-75.
- Голубев А. П. Динамика процессов радиоадаптации в популяциях моллюсков из водоемов белорусского сектора зоны загрязнения ЧАЭС / А. П. Голубев // Экологический вестник. – 2012. – № 2. – С. 44-57.
- Данные по радиоактивному загрязнению территории населённых пунктов Российской Федерации цезием - 137, стронцием – 90 и плутонием - 239+240 / Под редакцией С. М. Вакуловского, подготовил В. Н. Яхрюшин. Обнинск, ФГБУ ”НПО “Тайфун”, 2021. – 223 с.
- Орлов П. М. Периоды полувыведения и миграционная способность 137Cs из почв, загрязненных чернобыльскими выпадениями на территории Брянской, Калужской, Тульской и Орловской областей / П. М. Орлов, Н. И. Аканова // Международный сельскохозяйственный журнал. – 2021. – № 5(383). – С. 101-105. DOI: 10.24412/2587-6740-2021-5-101-105.
- Гребенников М. Е. Содержание тяжелых металлов в наземных моллюсках в районе Среднеуральского медеплавильного завода / М. Е. Гребенников, И. М. Хохуткин // Материалы научно-практической конференции «Экологические основы стабильного развития Прикамья», г.Пермь. – 2000. – 92 с.
- Белов А. А. Регрессионное моделирование динамики радиального прироста сосны обыкновенной в загрязненных радионуклидами насаждениях брянской области / А. А. Белов // Лесоведение. – 2017. – № 1. – С. 17-23.
- Studies of Есоtoxicity of Herbicides to Influence the Soil Fauna / S. Khyzhnyak, O. Sterlikova, S. Poloschyk, et al. //Agrobiodiversity for Improving Nutrition, Health and Life Quality. – 2017. – №. 1. – pp.221-225.
- Звягинцева А. В. Модели существования и распространения видов животных для количественной оценки биологического разнообразия / А. В. Звягинцева // Системный анализ и информационные технологии в науках о природе и обществе. – 2013. – № 1-2(4-5). – С. 81-94.
- Эффекты хронического и острого радиационного воздействия у пресноводного моллюска LymnaeastagnalisL. [Электронный ресурс] / Д. И. Гудков, Е. В. Дзюбенко, Т. В. Пинкина и др. // Международная научно-практическая конференция «Радиоэкология XXI века», сборник материалов – Красноярск: Сибирский федеральный ун-т. -2011. URL: http://conf. sfu-kras.ru/conf/radioecology-XXI. (дата доступа: 12.05.2022)
- Радиобиология : курс лекций. В 4 ч. Ч. 3. Радиобиология животных и человека / Н. В. Лазаревич, И. И. Сергеева, С. С. Лазаревич. – Горки : БГСХА, 2012. – 103 с.
- Алексахин Р. М. Радиоактивное загрязнение почв как тип их деградации / Р. М. Алексахин // Почвоведение. – 2009. – № 12. – С. 1487-1498.
Список литературы на английском языке / References in English
- Platonov A. G. Primenenie metoda probit-analiza v radiobiologii. Raschet poluletal'noj dozy LD50: Uchebno-metodicheskoe posobie [Application of the probit analysis method in radiobiology. Calculation of the half-year dose of LD50: Educational and methodical manual] / A. G. Platonov, M. Ja. Ahalaja. – M.: NIJaU MIFI, 2010. –36 p. [in Russian]
- ICRP Publication 108. Environmental protection: the concept and use of reference animals and plants // Ann. ICRP. – 2009. – V. 38. – № 4-6. – 1-242.
- Miheev A. N. Malye «dozy» radiobiologii. Moja malen'kaja radiobiologicheskaja vera [Small "doses" of radiobiology. My little radiobiological faith] / N. Miheev – K.: Fitosociocentr, 2016. – 371 p. [in Russian]
- Os'kina N. A. Vlijanie gamma-izluchenija i tjazhelyh metallov na pokojashhiesja jajca presnovodnogo rachka Moina macrocopa [Effect of gamma radiation and heavy metals on resting eggs of freshwater crustacean Moina macrocopa]: dis. … of PhD in Biology 03.02.10 : defense of the thesis 13.04.2021 / Os'kina Natalija Aleksandrovna. Krasnojarsk, 2020. – 121 p. [in Russian]
- Gudkov I. N. Radiobiologija s osnovami radiojekologii : uchebnoe posobie [Radiobiology with the basics of radioecology : a textbook] / I.N. Gudkov, A.G. Kudjasheva, A.A. Moskaljov. – Syktyvkar : Publishing houseSyktGU, 2015. – 512 p. [in Russian]
- Murzin N. V. Ocenka vozdejstvija radioaktivnyh veshhestv na jekosistemy kak celoe [Assessment of the Radioactive Impact on Ecosystems as a Whole] / N. V. Murzin, V. N. Lyscov // Problemy analiza riska [Issues of Risk Analysis]. – 2004. – Vol. 1. – No. 2. – pp. 146-153. [in Russian]
- Petuhova G. A. Molljuski kak chuvstvitel'nye test-indikatory sostojanija perifitona pri dejstvii antropogennogo pressa zagrjaznitelej [Mollusks as sensitive test indicators of the state of the periphyton under the action of anthropogenic pollutants] / G. A. Petuhova // Vestnik Tjumenskogo gosudarstvennogo universiteta [Tyumen State University Herald]. – 2005. – № 5. – pp. 97-100. [in Russian]
- Cvetnova O. B. K voprosu o metodah biodiagnostiki v uslovijah radioaktivnogo zagrjaznenija [On the Problem of Biodiagnostics under Conditions of Radioactive Contamination] / O. B. Cvetnova, A. I. Shheglov, V. V. Stolbova // Radiacionnaja biologija. Radiojekologija [Radiation biology. Radioecology]. – 2014. – Vol. 54. – № 4. – pp. 423-431. DOI: 10.7868/S0869803114030163. [in Russian]
- Radiacionnyj jekologicheskij risk dlja nazemnoj jekosistemy v zone vlijanija hranilishha radioaktivnyh othodov [Radiation ecological risk for the terrestrial ecosystem in the zone close to the radioactive waste storage facility] / G. V. Lavrentyeva, O. A. Mirzeabasov, B. I. Synzynys et al. // Radiacija i risk (Bjulleten' Nacional'nogo radiacionno-jepidemiologicheskogo registra) [Radiation and Risk (Bulletin of the National Radiation and Epidemiological Register)]. – 2018. – Vol. 27. – № 4. – pp. 65-75. DOI: 10.21870/0131-3878-2018-27-4-65-75. [in Russian]
- Sources and effects of ionizing radiation // Report to the General Assembly with Scientific Annexes. – Volume II, Scientific Annex E. – Effect of ionizing radiation on non-human biota. – New York United Nations, 2011. – 95 p.
- Guseva V. P. Issledovanie fito- i zooplanktonnyh organizmov kak bioindikatorov radioaktivnogo zagrjaznenija vody v rajone razmeshhenija predprijatij JaTC [Study of phyto- and zooplankton organisms as bioindicators of water radioactive contamination in the region of nuclear fuel cycle enterprises location] / V. P. Guseva, M. Ja. Chebotina, A. V. Trapeznikov // Voprosy radiacionnoj bezopasnosti [Radiation safety issues]. – 2006. – № 4(44). – pp. 70-75. [in Russian]
- Golubev A. P. Dinamika processov radioadaptacii v populjacijah molljuskov iz vodoemov belorusskogo sektora zony zagrjaznenija ChAJeS [The dynamics of radioadaptation processes in mollusk populations in water bodies within the belarusian sector of chernobyl nuclear contamination zone] / A. P. Golubev // Jekologicheskij vestnik [Ecological Bulletin]. – 2012. – № 2. – pp. 44-57. [in Russian]
- Dannye po radioaktivnomu zagrjazneniju territorii naseljonnyh punktov Rossijskoj Federacii ceziem - 137, stronciem – 90 i plutoniem - 239+240 [Data on radioactive contamination of the territory of settlements of the Russian Federation with cesium - 137, strontium - 90 and plutonium - 239+240] / edited by S.M. Vakulovskogo, prepared V.N. Jahrjushin. Obninsk, FGBU ”NPO “Tajfun”, 2021. – 223 p. [in Russian]
- Orlov P. M. Periody poluvyvedenija i migracionnaja sposobnost' 137Cs iz pochv, zagrjaznennyh chernobyl'skimi vypadenijami na territorii Brjanskoj, Kaluzhskoj, Tul'skoj i Orlovskoj oblastej [Half-life and migration capacity of 137cs from soils contaminated with chernobyl fallout in the bryansk, kaluga, tula and oryol regions] / P. M. Orlov, N. I. Akanova // Mezhdunarodnyj sel'skohozjajstvennyj zhurnal [International agricultural journal]. – 2021. – № 5(383). – pp. 101-105. DOI: 10.24412/2587-6740-2021-5-101-105. [in Russian]
- Grebennikov M. E. Soderzhanie tjazhelyh metallov v nazemnyh molljuskah v rajone Sredneural'skogo medeplavil'nogo zavoda [The content of heavy metals in terrestrial molluscs in the area of Sredneuralsky copper smelter] / M. E. Grebennikov, I. M. Hohutkin // Materialy nauchno-prakticheskoj konferencii «Jekologicheskie osnovy stabil'nogo razvitija Prikam'ja», g.Perm' [Materials of the scientific and practical conference "Ecological foundations of stable development of the Kama region", Perm]. – 2000. – 92 p. [in Russian]
- Belov A. A. Regressionnoe modelirovanie dinamiki radial'nogo prirosta sosny obyknovennoj v zagrjaznennyh radionuklidami nasazhdenijah brjanskoj oblasti [Regression modeling of the radial increment dynamics in scots pine in forests contaminated with radionuclides in bryansk oblast] / A. A. Belov // Lesovedenie [Forest science]. – 2017. – № 1. – pp. 17-23. [in Russian]
- Studies of Есоtoxicity of Herbicides to Influence the Soil Fauna / S. Khyzhnyak, O. Sterlikova, S. Poloschyk et al. //Agrobiodiversity for Improving Nutrition, Health and Life Quality. – 2017. – №. 1. – P.221-225.
- Zvjaginceva A. V. Modeli sushhestvovanija i rasprostranenija vidov zhivotnyh dlja kolichestvennoj ocenki biologicheskogo raznoobrazija [Models of the existence and distribution of animal species for the biological diversity quantifying] / A. V. Zvjaginceva // Sistemnyj analiz i informacionnye tehnologii v naukah o prirode i obshhestve [System analysis and information technologies in the sciences of nature and society]. – 2013. – № 1-2(4-5). – pp. 81-94. [in Russian]
- Gudkov D. I. Jeffekty hronicheskogo i ostrogo radiacionnogo vozdejstvija u presnovodnogo molljuska Lymnaea stagnalis L. [Effects of chronic and acute radiation exposure in freshwater mollusk Lymnaea stagnalis L.] [Electronic resource] / D.I. Gudkov, E.V. Dzjubenko, T.V. Pinkina et al. // Mezhdunarodnaja nauchno-prakticheskaja konferencija «Radiojekologija XXI veka», sbornik materialov – Krasnojarsk: Sibirskij federal'nyj un-t [International scientific and practical conference "Radioecology of the XXI century", collection of materials - Krasnoyarsk: Siberian Federal University]. – 2011. URL: http://conf. sfu-kras.ru/conf/radioecology-XXI. (accessed: 12.05.2022). [in Russian]
- Radiobiologija : kurs lekcij. V 4 ch. Ch. 3. Radiobiologija zhivotnyh i cheloveka [Radiobiology: a course of lectures. In 4 h the P. 3. Radiobiology of animals and humans] / N. V. Lazarevich, I. I. Sergeeva, S. S. Lazarevich. – Gorki: BGSHA, 2012. – 103 p. [in Russian]
- Aleksahin R. M. Radioaktivnoe zagrjaznenie pochv kak tip ih degradacii [Radioactive contamination as a type of soil degradation] / R. M. Aleksahin // Pochvovedenie [Soil science]. – 2009. – № 12. – pp. 1487-1498. [in Russian]