Морфолого-анатомическое исследование сырья гречихи красностебельной (Fagopyrum rubricaulis)
Морфолого-анатомическое исследование сырья гречихи красностебельной (Fagopyrum rubricaulis)
Аннотация
На территории Российской Федерации широко культивируются различные виды рода Гречиха (Fagopyrum L., сем. Polygonaceae). К одному из перспективных видов относится гречиха красностебельная (Fagopyrum rubricaulis), являющаяся источником ценных биологически активных соединений (флавоноиды, фенилпропаноиды, витамины), макро- и микроэлементов (кальций, железо, медь). Однако в Российской Федерации не разработана фармацевтическая статья на лекарственное сырье гречихи красностебельной. Цель исследования – изучение морфолого-анатомических особенностей высушенного цельного, измельченного и порошкованного сырья гречихи красностебельной. Материалом для исследования служила собранная в фазу массового цветения и начала плодоношения трава гречихи красностебельной на территории Пензенской области в Камешкирском районе в августе 2023 года. Изучение морфологических и анатомических признаков проводили с помощью методов макро- и микроскопического анализов, описанных в Государственной фармакопее XV издания. Все исследования выполняли в 5 повторностях. В результате исследования определены диагностические признаки в микроскопическом строении листовой пластинки, стебля, цветка. По краю листа расположены клетки, вытянутые в сосочек наподобие коротких волосков. Наличие друз оксалата кальция в мезофилле и клетках эпидермиса листа, которые сконцентрированы вблизи многочисленных спиральных сосудов. На срезе стебля расположены цилиндрические клетки эпидермиса и спиральные сосуды. Лепестки цветка опушены. Данные результаты могут быть использованы для дальнейшей разработки нормативной документации на сырье гречихи красностебельной.
1. Введение
Для российского фармацевтического рынка, как и для мирового рынка в целом, характерна тенденция к росту потребления лекарственных препаратов и биологически активных добавок (БАД) растительного происхождения, используемых в целях профилактики и лечения заболеваний различной этиологии. Это вызвано целым рядом причин: доступная по сравнению с синтетическими лекарственными препаратами цена, безрецептурный отпуск большинства препаратов растительного происхождения, традиционное мнение широких слоев населения о низкой токсичности лекарственных растений, медикаментов и БАД растительного происхождения и др. .
Широко используются неочищенные растительные экстракты в качестве препаратов, содержащих различные компоненты. Поэтому стандартизация лекарств, используемых для профилактики и лечения различных заболеваний, становится серьезной проблемой для здравоохранения .
Фармакогностический анализ обеспечивает идентификацию растений, устанавливает параметры стандартизации, которые способствуют предотвращению фальсификации . Такие исследования обеспечивают воспроизводимое качество растительных продуктов, что приводит к безопасности и эффективности сырья , .
В качестве источников биологически активных соединений (БАС) природного происхождения привлекают внимание представители отечественной флоры из семейства Гречишные (Polygonaceae), в частности, гречиха красностебельная (Fagopyrum rubricaulis). Данный вид является перспективным источником ценных БАС, макро- и микроэлементов. Ведущей группой БАС являются флавоноиды. Основным действующим веществом является рутин. Его содержание в гречихе красностебельной составляло: цветки – 5,39%, листья – 11,2%, стебли – 1,26%. К сопутствующим веществам относятся фенилпропаноиды, галловая, протокатеховая кислоты. Плоды содержат довольно много хорошо усвояемых белков (6-12%), углеводов (крахмала – до 80%), органических кислот. Основными жирными кислотами сырья являются пальмитиновая, олеиновая, линолевая, стеариновая кислоты. Богата гречиха витаминами В1, В2, фолиевой кислотой, β – каротином. Среди минеральных веществ наиболее характерны соли железа, фосфора, кальция, меди и йода .
БАС видов гречихи обладают широким спектром фармакологических эффектов: ангиопротективным, противоопухолевым, антиоксидантным, противовоспалительным, гепатопротекторным, гипогликемическим, противоаллергическим, антибактериальным и адаптогенным .
В традиционной медицине настой травы гречихи красностебельной применяют в лечении заболеваний дыхательных путей, сахарного диабета 2 типа, воспалительных заболеваниях кожи и слизистых оболочек. В официальной медицине сырье гречихи используют в качестве средства для улучшения микроциркуляции, снижения агрегации тромбоцитов, устранения отеков, увеличения регенерации поврежденных тканей, укрепления стенок крупных сосудов и капилляров, повышения их тонуса для улучшения памяти и концентрации внимания, профилактики инсульта .
Наличие широкого спектра фармакологических эффектов, а также достаточно обширное культивирование растительного объекта на территории Пензенской области в качестве сырья для производства БАД, позволяет говорить о перспективности его детального изучения макро- и микроморфологических особенностей и определение показателей, включаемых в разрабатываемую нормативную документацию , .
Целью исследования является изучение морфолого-анатомических особенностей высушенного цельного, измельченного и порошкованного сырья гречихи красностебельной.
2. Методы и принципы исследования
Материалом для исследования служила собранная в фазу массового цветения и начала плодоношения высушенная трава гречихи красностебельной (цельная, измельченная, порошкованная) на территории Пензенской области в Камешкирском районе в августе 2023 года. Было заготовлено 6 образцов. Траву гречихи красностебельной сушили в сушильных шкафах (ШС-80-02 СПУ, Россия) при температуре не выше 40 °C, измельчение сырья проводили в лабораторных мельницах (ML-08B, КНР). Изучение морфологических и анатомических признаков проводили с помощью методов макро- и микроскопического анализа, описанных в ОФС.1.5.3.0003 ГФ XV издания . В работе использовали терминологию, описания микроскопического строения, рекомендованных в ГФ XV издания . Морфологию надземной части гречихи красностебельной рассматривали невооруженным глазом и с помощью стереоскопического микроскопа Биомед МС-2Т (Россия) c камерой Toupcam FMA 050 (КНР). Анатомическое исследование проводили с помощью микроскопа Биомед-6 ПР-1 трио (Россия) c камерой Toupcam FMA 050 (КНР) и микроскопа ZEISS Axiostar plus (Германия) c камерой Toupcam FMA 050 Color (КНР). Было исследовано 270 микропрепаратов, более 540 фотографий.
3. Основные результаты
3.1. Внешние признаки
Цельное сырье. Трава гречихи красностебельной (Fagopyrum rubricaulis) представляет собой верхушки побегов с цельными или частично измельченными листьями и цветами длиной до 30 см. Стебли ветвистые, ребристые с ребристой поверхностью, голые, полые, с очередным листорасположением, окраска красная, длина стеблей от 20 до 30 см и диаметром у основания от 2 до 6 мм (рис. 1.а).
Листья простые, длиной 1,5-4,5 см, шириной 1-4 см, сердцевидные, с сердцевидным основанием и острой верхушкой, край листьев цельный. Нижние листья – длинночерешковые 4,5- 5 см, верхние почти сидячие (1-2 мм), диаметр черешка у основания 0,5-2 мм. Все листья желтовато-зеленого цвета, с красным или розовым жилкованием. Листья всех форм голые, но с мелкими сосочками по жилкам (рис. 1.b).
Соцветия – кисти (пазушные) и щитки (верхушечные). Цветки обоеполые, красного и темно-розового цвета, актиноморфные, расположены на длинных пазушных цветоносах длинной 3-3,5 см. Околоцветник простой, пятираздельный, розового цвета. Цветок имеет 8 тычинок, расположенных в двух кругах, при этом две пары тычинок во внешнем круге сближены по две. У основания тычиночных нитей имеется нектарник в виде дисковидного расширения цветоложа. Завязь трехгранная, рыльца головчатые. Все части соцветия опушенные, цветоножка ребристая, длинной 2-3 мм. (рис. 1.c).
Плод – трехгранный орех, при котором околоцветник остается в виде деформированных листочков, но не разрастается, односемянный, длиной 5-7 мм, коричневый. Наряду с трехгранными плодами гречихи красностебельной встречаются двугранные (плоские), четырехгранные и многогранные (рис. 1.d). Зерно гречихи имеет крупный зародыш в виде ленты (рис. 1.e).
Рисунок 1 - Надземная часть гречихи красностебельной
Примечание: a – внешний вид травы; b – лист; c – цветок; d – плод; e – поперечный разрез плода
Порошок образцов травы гречихи красностебельной, представлял собой смесь частиц стеблей, листьев, цветков и плодов разной формы и размеров, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм. Цвет порошка преимущественно красновато-желтый, с зелеными, белыми, коричневыми вкраплениями. Запах травянистый, вкус водного извлечения специфический.
3.2. Микроскопические признаки сырья
Микроскопический анализ цельного и измельченного сырья гречихи позволил выявить ряд анатомо-диагностических признаков. Клетки верхнего эпидермиса листьев довольно крупные, многоугольной формы с прямыми стенками (рис. 2.а). Нижний эпидермис был представлен многоугольными клетками, извилистой формы. Клетки эпидермиса обеих сторон листа имели, равномерно утолщенные стенки. Устьичный аппарат анимоцитного типа, окруженный 4-6 клетками (рис. 2.a). Устьица многочисленные, одинаковой, овальной формы, присутствуют в верхнем и нижнем эпидермисе. По краю листа расположены клетки, вытянутые в сосочек наподобие коротких волосков (рис. 2b), также встречающиеся по жилке листа (рис. 2.c). Отличительной чертой является наличие многочисленных друз оксалата кальция в мезофилле и клетках эпидермиса листа, которые сконцентрированы вблизи многочисленных спиральных сосудов (рис. 2.d).
Рисунок 2 - Микроскопия листа гречихи красностебельной
Примечание: a – верхний эпидермис листа, х400: 1 – многоугольная клетка эпидермиса; 2 – околоустьичная клетка; 3 – замыкающая клетка устьица; 4 – устьичная щель; b – простые одноклеточные волоски, х100: 1 – эпидермис листа; 2 – простой одноклеточный волосок; с – друзы оксалата кальция, х100: 1 – жилка листа; 2 – друзы оксалата кальция; d – простые одноклеточные волоски, х100: 1 – жилка листа; 2 – простые волоски
При изучении анатомического строения цветка анализировали лепестки венчика, чашелистики и цветоложе. При рассмотрении микропрепаратов лепестка с поверхности видны сосочковидные клетки эпидермиса (рис. 3.d). Было выявлено, что пыльник состоит из двух половинок, соединенных друг с другом связником. В нём содержится большое количество пыльцы. Пыльца округлая и округло-трехгранная шероховатая (рис. 3.d). Цветоложе обильно опушенное. Волоски простые одноклеточные прямые толстостенные. Завязь одногнездная, с одной семяпочкой. Клетки оболочки плода гречихи полые или заполнены пигментом. Эндосперм – мучнистый, рыхлый, состоит из крупных тонкостенных клеток, расположенных радиальными рядами.
Рисунок 3 - Микроскопия стебля и цветка гречихи красностебельной
Примечание: а – поперечный срез стебля, х100: 1 – эпидермис; 2 – колленхима; 3 – флоэма; 4 – ксилема; 5 склеренхима; 6 – паренхима; 7 – полость стебля; b – продольный срез стебля, х400: 1 – клетки эпидермиса; 2 – устьица; c – продольный срез стебля, х100: 1 – спиральные сосуды; 2 – цилиндрические клетки эпидермиса; d – фрагменты цветка: 1 – пыльник, х20; 2 – пыльца, х100; 3 – сосочковидные выросты лепестка, х100
4. Заключение
Проведенный морфолого-анатомический анализ надземной части (травы) гречихи красностебельной позволил выявить диагностические признаки сырья – красно-розовая окраска стебля, цветков, сосочки наподобие коротких волосков, которые расположены по краю листа и по жилке, многочисленные друзы оксалата кальция в мезофилле и эпидермисе, спиральные сосуды листа и стебля, угловая колленхима стебля, а также наличие множества сосочковидных клеток эпидермиса лепестков. Данные диагностические признаки могут быть использованы для разработки нормативной документации на лекарственное сырьё и дальнейшего внедрения его в фармацевтическую практику.