ДИНАМИКА ВИДОВОГО СОСТАВА МИКРОФЛОРЫ ПРИ ГРИБКОВЫХ ПОРАЖЕНИЯХ КИШЕЧНИКА СВИНЕЙ
Вилкова Е.А.1, Ильина Н.А.2
1Кандидат биологических наук, 2Доктор биологических наук, профессор, Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н. Ульянова
ДИНАМИКА ВИДОВОГО СОСТАВА МИКРОФЛОРЫ ПРИ ГРИБКОВЫХ ПОРАЖЕНИЯХ КИШЕЧНИКА СВИНЕЙ
Аннотация
В статье рассмотрен видовой состав микрофлоры при грибковых поражениях кишечника свиней в зависимости от сезона года. Выделены культуры грибов, которые относились к 2 родам: Candida spp. (4 вида), Aspergillus spp. (3 вида). При микологическом изучении испражнений свиней установлено, что частота высеваемости дрожжевых грибов рода Candida spp., плесневых грибов рода Aspergillus spp. в осенний и зимний периоды года была очень высокой. Отклонение количества условно-патогенной микрофлоры в кишечнике свиней от нормы, вызывает его дисбиоз.
Ключевые слова: микрофлора, кишечник, грибы рода Candida spp., грибы рода Aspergillus spp.Vilkova E.A.1, Ilyina N.A.2
1PhD in Biology, 2PhD in Biology, Professor, Ulyanovsk State Рedagogical University
DYNAMICS OF SPECIFIC STRUCTURE OF THE MICROFLORA AT MYCOTIC AFFECTIONS OF INTESTINES OF PIGS
Absract
The article describes the species composition of microflora at fungal lesions of in intestinal pigs depending on the season year. Allocated to culture fungi that were 2 maternity: Candida spp. (4 species), Aspergillus spp. (3 species). At mycological study of feces of pigs found that the frequency of inoculation of yeast fungi of the kinds Candida spp., and mold fungi of the kinds Aspergillus spp. in the autumn and winter periods of the year it was very high. Deviation of the number of conditionally pathogenic microflora in the intestines of pigs from the norm, it causes dysbiosis.
Keywords: microflora, intestines, funguses of the kinds Сandida spp., funguses of the kinds Aspergillus spp.Введение
На настоящий момент известно, что влияние различных факторов таких как возраст, генетические особенности, физиологическое состояние организма хозяина, кормление, стрессы, агрессивные воздействия окружающей среды, различные заболевания, иммунодефицитные состояния, применение лекарственных препаратов на организм свиней приводит к нарушениям функции нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Следует отметить, что микроорганизмы колонизируют желудочно-кишечный тракт ввиду обилия и разнообразия в нем питательных веществ.
Известно, что характер взаимодействия микроорганизмов с хозяином различен и зависит от особенностей его рациона. Корм, находящийся в желудочно-кишечном тракте свиней, по своему биохимическому составу близкий к составу их тела и является субстратом для развития микроорганизмов. В связи с этим в желудочно-кишечном тракте свиней складываются конкурентные взаимоотношения микроорганизмов с хозяином. Последний не может полностью исключить возможность их развития, но ограничивает его благодаря секреции кислоты и быстрому пищеварению, в результате продукты деятельности пищеварительных ферментов потребляются животным [1]. Следует отметить, что прохождение корма через толстый кишечник свиней способствует развитию большого числа микроорганизмов.
Целью данного исследования явилось изучение видового состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта свиней в присутствии дрожжевых грибов рода Candida spp. и плесневых грибов рода Aspergillus spp. в разные сезоны года.
Материалы и методы исследования
Исследования проведены в научно-исследовательской лаборатории экологии микроорганизмов и на базе свиноводческих комплексов Ульяновской области.
Нами проведена серия научно-хозяйственных опытов и лабораторных экспериментов в ходе которых было изучено 100 свиней, объединенных в 2 группы по 50 особей (контрольная и экспериментальная). Перед проведением экспериментов подопытных животных подбирали с соблюдением принципа аналогов по клинико-физиологическому состоянию, породе, возрасту, полу, массе тела и наблюдали за общим состоянием животных, производили периодическое взвешивание, отмечали характер стула. В качестве материала для исследований служили фекалии свиней крупной белой породы.
Для изучения состава микрофлоры кишечника свиней использовали микроскопический и культуральный методы исследования. Грибы родов Candida spp. и Aspergillus spp. выделяли посевом исследуемого материала на среду Сабуро.
Из испражнений готовили окрашенные и неокрашенные мазки, для обнаружения в них спор грибов. В неокрашенных препаратах споры дрожжевых и плесневых грибов обнаруживались редко. Присутствие в испражнениях различных клеточных элементов и непереваренных остатков пищи затрудняло обнаружение спор микроскопических грибов в препаратах.
С целью просветления исследуемого материала, его смешивали в маленьких бюксах с карболовым фуксином Циля-Нильсена, кипятили в течение 20-30 секунд и на 30 минут оставляли при комнатной температуре. Затем из содержимого бюксов готовили мазки, фиксировали их, в течении 2-3 секунд обрабатывали 5% серной кислотой, промывали водой и докрашивали метиленовой синькой 2 минуты. После окраски мазков а препаратах споры грибов имели вид круглых или овальных образований ярко-красного цвета.
Установление родовой принадлежности гриба проводили путем выделения чистой культуры гриба на чашках со средой Сабуро и Чапека с добавлением антибиотиков для задержки бактериальной флоры. Рост микроскопических грибов на среде Сабуро и Чапека появлялся на 3-4 день.
Результаты и их обсуждение
Изучение изменения видового состава микрофлоры кишечника свиней проводилось в осенний, зимний, весенний и летний периоды года.
В ходе проведенных исследований установлено, что 40 особей (80%) имели высокую обсемененность различными видами микроскопических грибов в кишечнике свиней. Выделенные культуры грибов относились к 2 родам: Candida spp. (4 вида - Candida albicans, Candida crusei, Candida tropicalis, Candida glabrata,), Aspergillus spp. (3 вида- Aspergillus fumigatus, Aspergillium flavus, Aspergillium ochraceus.).
У 10 свиней (20%) качественный состав и количественное соотношение представителей микрофлоры кишечника свиней находился в норме и представлен следующими микроорганизмами (таб. 1).
Таблица 1 - Состав нормофлоры желудочно-кишечного тракта свиней
| Наименование микроорганизмов | Общий усреднённый показатель количества микроорганизмов в 1 гр. материала из кишечника (КОЕ/г) |
| Lactobacterium spp. | 106– 109 |
| Bifidobacterium spp. | 108– 109 |
| Escherichia с нормальной ферментативной активностью | 106-108 |
| Proteus spp. | 0 – 105 |
| Klebsiella spp. | 0 – 105 |
| Enterococcus spp. | 105-107 |
| Staphylococcus aureus | 104 – 105 |
| Staphylococcus saprohyticus | 104 – 105 |
| Staphylococcus epidermidis | 104 – 105 |
| Clostridium spp. | 103– 105 |
| Неферментирующие бактерии (Pseudomonas, citrobacter) | 0-104 |
| Candida spp. | 0 - 10³ |
| Aspergillus spp. | 0 - 10³ |
Актуальным является рассмотрение изменения видового состава микрофлоры кишечника свиней при высоком обсеменении дрожжевыми, плесневыми грибами и ее нормы, а также в зависимости от сезона года.
В ходе исследования установлено, что в видовом составе микрофлоры кишечника экспериментальных животных имелись различия между четырмя сезонами года, а доминирующими видом среди дрожжевых грибов являлся Candida albicans, плесневых грибов Aspergillus fumigatus.
У животных с микозами в осенний и зимний периоды года происходит уменьшение количества высеваемых микроорганизмов: Bifidobacterium spp. (10²), Staphylococcus aureus (0), Clostridium spp. (0) и увеличение представителей рода Enterococcus spp. (108), Pseudomonas spp. (105), Сitrobacter spp.(105), Candida albicans (108), Candida crusei (105), Candida tropicalis (104), Candida glabrata (104), Aspergillus fumigatus (107), Aspergillium flavus (105).
Исследования проведенные в весенний период года показали, что у свиней происходит незначительное уменьшение количества грибов рода Candida albicans (105), Candida crusei (103), Candida tropicalis (102), Candida glabrata (103), Aspergillus fumigatus (104), Aspergillium flavus (103) и увеличение представителей рода Bifidobacterium spp. (1010), Enterococcus spp.(6х106), а Lactobacterium spp. (106). В составе микрофлоры кишечника свиней регистрировались Staphylococcus spp. (108), Escherichia spp. (109), Clostridium spp. (107), Proteus spp. (106), неферментирующие бактерии (Pseudomonas citrobacter) (106), их количество было выше нормы.
В летний период года происходит уменьшение количества Candida albicans (0), Candida crusei (0), Candida tropicalis (0), Candida glabrata (0), Aspergillus fumigatus (0), Aspergillium flavus (0) и увеличение представителей рода Bifidobacterium spp. (109), Enterococcus spp.(106), а Lactobacterium spp. соответствовало норме (107). В составе микрофлоры полностью исчезли Staphylococcus spp., Escherichia spp., Clostridium spp., Proteus spp. Неферментирующие бактерии (Pseudomonas citrobacter) обнаружены не были.
Выводы
Таким образом, изменения микрофлоры желудочно-кишечного тракта свиней показал, что качественный и количественное состав разных групп микроорганизмов претерпевают изменения в зависимости от сезона года.
Анализ представленных данных свидетельствует, что микрофлора кишечника здоровых свиней находится в состоянии динамического равновесия, обеспечивающего нормальную жизнедеятельность на фоне постоянно меняющихся условий внешней среды.
В осенний и зимний периоды года отмечена наибольшая частота обнаружения представителей рода Enterococcus spp., Pseudomonas spp., Сitrobacter spp., дрожжевых и плесневых грибов в испражнениях кишечника свиней.
В весенний период происходило незначительное уменьшение представителей рода Staphylococcus spp., Escherichia spp., Clostridium spp., Proteus spp., неферментирующие бактерии (Pseudomonas citrobacter), Candida spp., Aspergillium spp. и увеличение представителей облигатной микрофлоры. Минимальное и максимальное отклонение количества условно-патогенной микрофлоры, в том числе дрожжевых и плесневых грибов в кишечнике свиней от нормы вызывает его дисбиоз и сопровождается развитием вторичного иммунодефицитного состояния у свиней.
В летний период года происходило уменьшение количества дрожжевых грибов рода Candida spp., плесневых грибов рода Aspergillium spp. и увеличение представителей рода Bifidobacterium spp., Lactobacterium spp., Enterococcus spp., что по-видимому объясняется предварительными профилактическими мероприятиями, а именно антибиотикотерапией животных.
Литература
- Сорокин В.В. Нормальная микрофлора кишечника животных. Кишинев: Штиинца, 1973. - 80 с.
References
- Sorokin V.V. Normal'naja mikroflora kishechnika zhivotnyh. Kishinev: Shtiinca, 1973. - 80 s.