SPECIFICS OF GENETIC POLYMORPHISMS ASSOCIATED WITH THE RISK OF THROMBOPHILIA IN ADOLESCENT MEN AND WOMEN: AN ETHNIC PERSPECTIVE

Согласно стратегии развития медицины в Российской Федерации на период до 2025 года сердечно-сосудистые заболевания занимают первое место среди всех причин смертности населения: на их долю приходится 56,7% всех летальных исходов. Так, в России от данной патологии ежегодно умирает около 1 млн. человек. Высокая смертность лиц трудоспособного возраста отражается на демографических показателях страны и имеет большое экономическое и медико-социальное значение

Следует также отметить, что высокая смертность ассоциирована с развитием тромбозов. Трое из тысячи живущих умирают от артериальных тромбов, являющихся причиной острой ишемии жизненно важных органов

Развитие тромбофилии приводит к повышенной склонности к формированию патологических внутрисосудистых венозных или артериальных тромбозов, что является следствием множественных взаимодействий генов и/или окружающей среды

Кроме того, на современном этапе всё больший интерес приобретает исследование проблемы «этнос» и «здоровье», «этнос» и «болезнь», направленное на изучение этнических особенностей развития многих болезней, а также способов их лечения и профилактики

Учитывая вышесказанное, актуальным на наш взгляд представлялось изучение генетических полиморфизмов, ассоциированных с риском развития тромбофилии у лиц разных национальностей.

Дизайн первого этапа исследования включал анкетирование студентов в возрасте от 18 до 21 года с целью установления национальной принадлежности. В обследование включались юноши и девушки, имеющие в двух поколениях родителей одной национальности и проживающих на одной территории как минимум два поколения. Этнические группы формировались с учетом региона проживания и национальности. Нами проанкетирован 621 человек (студенты 2 курсов лечебного, педиатрического и стоматологического факультетов).

На основе полученной этнической информации отобрано 122 студента, относящихся к разным языковым семьям: Индо-Европейской – 63 человека (31 девушка и 32 юноши) и Северо-Кавказской – 59 человек (29 девушек и 30 юношей). Обследуемые студенты разделены на 4 группы с учетом этнической и половой принадлежности: I группу составили юноши Индо-Европейской языковой семьи (русские, греки, армяне); II группу – юноши Северо-Кавказской языковой семьи (чеченцы, ингуши, аварцы, даргинцы); III группу – девушки Индо-Европейской языковой семьи (русские, гречанки, армянки) и IV группу – девушки Северо-Кавказской языковой семьи (чеченки, ингушки, аварки, даргинки).

Второй этап включал изучение генетического полиморфизма системы гемостаза. От испытуемых получено добровольное согласие. Затем нами проведено исследование методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени на детектирующем амплификаторе «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) с использованием реагентов «R1-H901-N3/4, КардиоГенетика Тромбофилия» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия). Объектом исследования служила венозная кровь испытуемых. Нами проведена оценка генетического полиморфизма системы гемостаза: фибриноген – фактор I свертывания крови (Ф1), протромбин – фактор II свертывания крови (Ф2), проакцелерин – фактор V, Лейден мутация (Ф5), проконвертин – фактор VII свертывания крови (Ф7), фибриназа – фактор XIII свертывания крови (Ф13), мембранный гликопротеин тромбоцитов семейства интегринов (ITGA2-A2-интегрин – тромбоцитарный рецептор к коллагену), тромбоцитарный рецептор фибриногена – ITGB3-интегрин, а также эндотелиальный белок семейства серпинов (PAI-I-серпин – антагонист тканевого активатора плазминогена).

Основа данного метода заключалась в использовании процесса амплификации дезоксирибонуклеазы (ДНК), то есть многократном удвоении определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатывались ДНК, достаточные для визуальной детекции.

Анализ полученных данных в ходе исследования проведен на персональном компьютере с использованием приложения Microsoft Excel и пакета статистического анализа данных StatPlus версии 8.0. Для оценки полученных номинальных данных использовали хи-квадрат Пирсона (х2) и точный критерий Фишера (F). Уровень статистической значимости считался при р<0,05.

При сравнении полученных данных по гендерному признаку нами выявлено преобладание встречаемости генного полиморфизма системы гемостаза среди девушек в сравнении с юношами (таблица №1).

Анализ представленных данных свидетельствует о достоверном (p<0,05) преобладании генного полиморфизма Ф7 среди девушек, при полном отсутствии данной мутации у юношей. Установленная особенность может приводить к снижению риска развития инфаркта миокарда, кроме того ассоциирована с повышенным риском развития кровотечения

Следующим этапом нами проведен анализ частоты встречаемости мутаций генотипа системы гемостаза у юношей и девушек (таблица № 2).

Среди юношей и девушек преобладал гетерозиготный вариант наследования полиморфизма изучаемых генов системы гемостаза. У 2% юношей гомозиготный вариант встречался только по гену ITGA2-A2.

Среди девушек гомозиготный вариант выявлен по генам Ф13А1,Ф1, ITGA2-A2 в 2% случаях, а в гене PAI-1 – в 10% случаях.

Далее нами проведен анализ изучаемых показателей среди обследованного контингента с учетом этнической принадлежности. В таблице № 3 представлены результаты генного полиморфизма среди юношей разных национальностей.

Анализ генного полиморфизма системы гемостаза с учётом этнической принадлежности среди юношей разных этнических групп выявил существенные отличия. Так, у представителей Индо-Европейской языковой семьи в сравнении с представителями Северо-Кавказской языковой семьи, достоверно чаще выявлена аллель Ф13, субъединица A1 (Ф13А1), мутация G103T(Val34Leu), генотип G/A (p<0,05, х2=4,74, F=8,12). Установленная особенность может повышать риск кровотечения на фоне антикоагулянтной терапии, геморрагических осложнений, при этом возможно уменьшение риска венозных тромбозов у носителей данной генетической мутации

Сравнительный анализ генного полиморфизма системы гемостаза среди девушек представлен в таблице № 4.

Среди девушек-студенток с учетом этнической принадлежности установлены достоверные отличия: у представителей Северо-Кавказской языковой семьи чаще выявлены аллели: Ф7 свертывания крови, мутация G10976A (Arg353Gln), генотип G/A (p<0,05, х2= 4,58) и ингибитор активатора плазминогена (PAI-I-серпин), мутация 5G(‑675)4G. Следует отметить, что чаще наблюдался гомозиготный вид генотипа 4G/4G (10% от общего количества девушек), в отличие от гетерозиготного вида 5G/4G (7% от общего количества девушек), так генотип 4G/4G предрасполагает к более высокому риску тромбозов и развитию тяжелого гестоза в сравнении с 5G/4G

1. В ходе изучения особенностей генетического полиморфизма ассоциированного с риском развития тромбофилии нами выявлены достоверные различия по гендерному признаку, связанные с более частыми мутациями у девушек в сравнении с юношами в генах, кодирующих проконвертин и PAI-1.

2. Гетерозиготный вариант наследования полиморфизма генов у юношей и девушек встречается чаще, чем гомозиготный. Так, у 2% юношей гомозиготный вариант встречался только по гену ITGA2-A2-интегрин, а среди девушек гомозиготный вариант выявлен по генам Ф13А1,Ф1, ITGA2-A2-интегрин – в 2% случаях, а в гене PAI-1 – в 10% случаях.

3. В выборке девушек Северо-Кавказской языковой семьи установлено преобладание мутаций генов, кодирующих проконвертин и антагонист тканевого активатора плазминогена.

4. У юношей Индо-Европейской языковой семьи отмечается преобладание частоты мутаций гена, кодирующего фибриназу.

5. В группах девушек Северо-Кавказской языковой семьи и среди юношей Индо-Европейской языковой семьи установлена более выраженная частота встречаемости мутаций системы гемостаза.