ИССЛЕДОВАНИЯ ПО ПОДБОРУ МЕТОДИК АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ

Несмотря на многообразие лекарственных средств на российском фармацевтическом рынке, поиск эффективных и доступных лекарственных средств на основе природных соединений не теряет своей актуальности. Особый интерес в области исследований и разработок представляют лекарственные средства антиоксидантного действия, которые могут применяться в профилактике и терапии заболеваний, развитие которых провоцирует образующиеся в организме свободные радикалы. При создании новых лекарственных средств немаловажными являются исследования по подбору методик анализа, которые предполагают оценку пригодности применения методик обнаружения и определения содержания действующих веществ в лекарственном средстве.

Антиоксидантные средства классифицируют на

1. Средства с антирадикальной активностью

1.1. Соединения эндогенной природы: a-токоферол (витамин Е), кислота аскорбиновая (витамин С), ретинол (витамин А), бета-каротин (провитамин А), убихинон (убинон).

1.2. Лекарственные препараты синтетического происхождения: эмоксипин, диметилсульфоксид (димексид), олифен (гипоксен).

2. Ферменты с антиоксидантным действием и их активаторы

3. Лекарственные вещества, блокирующие образование свободных радикалов: аллопуринол (милурит), антигипоксантные соединения.

Одним из эффективных лекарственных средств является природное соединение – дигидрокверцетин, который обладает антиоксидантной активностью

Дигидрокверцетин относится к биофлавоноидам, получают из лиственницы сибирской. Данное лекарственное вещество широко известно как на территории России, также и в Америке и Европе. Дигидрокверцетин считается фармакологически более чистой формой флавоноида кверцетина. Отмечают также отсутствие токсического действия дигидрокверцетина даже при очень высоких дозах

Результаты многочисленных научных исследований позволяют говорить о положительном влиянии дигидрокверцетина на состояние капилляров (в частности, сосудистой стенки), уменьшение вязкости крови и препятствование развитию тромбообразования в организме человека

В организме людей с заболеваниями бронхо-легочной системы (пневмония, хронический бронхит, бронхиальная астма, хроническая обструктивная болезнь легких) дигидрокверцетин способствует снижению частоты приступов, более быстрому купированию кашля, одышки, уменьшению отечности и улучшению проходимости бронхов, восстановлению функций легочной ткани и нормализации дыхания

Среди изученных биофлавоноидов и других групп веществ дигидрокверцетин можно отнести к эталонному продукту, так как данное вещество проявляет самую высокую антиоксидантную активность, что обусловлено самым высоким показателем, который отражает способность вещества инактивировать в организме человека свободные радикалы кислорода

С целью приведения к единым требованиям измерение антиоксидантных свойств различных биологически активных веществ Национальным институтом старения США была введена специальная шкала ORAC (Oxygen Radical Absorbance). Данная методика основана на проведении оценки способности биологически активных веществ к поглощению свободных радикалов кислорода. В результате проведения данных исследований установлено, что дигидрокверцетин проявляет антиоксидантную активность при низких концентрациях. Установленные данной методикой значения для дигидрокверцетина являются минимальной концентрацией вещества по сравнению с аналогичными показателями для антиоксидантных средств экзогенного происхождения, в том числе витаминами E, A, B, C, бета-каротином

Цель данной работы – исследования по подбору методик анализа лекарственного средства с антиоксидантным действием (дигидрокверцетина).

В процессе исследования использовались методы: контент-анализ, физический, физико-химический, химический, математический. В качестве объекта исследований использовали субстанцию дигидрокверцетина.

В результате анализа литературных данных и серии предварительных экспериментов были подобраны методики качественного и количественного анализа лекарственного средства на основе дигидрокверцетина антиоксидантного действия.

Подбор методик анализа лекарственного средства предполагал оценку показателей «Описание», «Растворимость», «Подлинность», «Количественное определение».

Описание оценивалось визуально на белом фоне

Дигидрокверцетин высокой степенью очистки – белый кристаллический порошок. Аморфная структура и наличие окраски свидетельствует о присутствии посторонних примесей.

Растворимость оценивалась фармакопейным методом

Необходимо отметить, что немаловажным при разработке лекарственного средства является подбор методик анализа (качественного и количественного)действующего вещества.

Качественный метод анализа дигидрокверцетина заключается в использовании качественных реакций (химические методы)

1. Цветная реакция с гидроксидом меди (II), образуется характерная окраска в водных растворах субстанции.

Выводы: появление красного окрашивания свидетельствует о наличии дигидрокверцетина в испытуемом растворе.

2. Цветная реакция с хлоридом железа (III), наблюдается темно-фиолетовое окрашивание.

Выводы: появление темно-фиолетового окрашивания свидетельствует о наличии дигидрокверцетина в испытуемом растворе.

3. Реакция подтверждения фенольных соединений: при добавлении цинка гранулированного к испытуемому раствору появляется сине-красное окрашивание.

Выводы: появление сине-фиолетового окрашивания свидетельствует о наличии дигидрокверцетина в испытуемом растворе.

Для количественного анализа дигидрокверцетина использовался метод фотоколориметрии

Методика. Приготовленный испытуемый раствор вещества необходимо перенести в пробирку вместимостью 20 мл, ополаскивая ее 5 мл раствора ацетона и доводя водой очищенной до метки. Полученный раствор перед испытанием перемешивают и фотометрируют на фотоколориметре при определенных условиях (кювета с толщиной поглощающего слоя = 1,0 см; длина волны λ=530 нм относительно контрольного опыта). Проводят параллельно контрольный опыт. После испытания проводят соответствующие расчеты. Содержание дигирокверцетина в лекарственном средстве соответствовало норме (95-100%).

Предложенные методики качественного и количественного анализа дигидрокверцетина подверглись валидационной оценке, результаты которой позволяют говорить об их специфичности и чувствительности.

Исследования по поиску эффективных лекарственных препаратов и подбору методик анализа их действующих веществ не теряют своей актуальности и в настоящее время. Среди лекарственных веществ антиоксидантного действия привлекает внимание дигидрокверцетин, который может быть использован в создании комплексных лекарственных средств антиоксидантного действия.

Экспериментальные исследования позволили предложить специфичные и чувствительные методики качественного и количественного анализа дигидрокверцетина, обладающего антиоксидантным действием.