POLYMORPHISM OF GENE CYTOCHROME Р450 1А1 IN PATIENTS WITH IRON-DEFICIENCY ANEMIA IN BASHKORTOSTAN REPUBLIC

Кунафин М.С.¹,  Хунафин С.Н.², Морозова А.А.³, Сафуанова Г.Ш.⁴, Хуснутдинова Э.К.⁵

^1,2,4Профессор, доктор медицинских наук,  ³кандидат медицинских наук, Башкирский государственный медицинский университет, ⁵профессор, доктор биологических наук, Институт биохимии и генетики УНЦ РАН

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ЦИТОХРОМ Р450 1A1 БОЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗОДЕФИЦИТНОЙ АНЕМИЕЙ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН

Аннотация

Цель исследования: анализ клинико-генетических ассоциаций при железодефицитной анемии, оценка информативности генетических маркеров и обоснование их значения в прогнозировании предрасположенности к заболеванию.

Задачи: провести комплексную оценку факторов риска развития железодефицитной анемии и клинико-гематологических особенностей течения заболевания; изучить полиморфизм гена цитохром Р450 1А1 у больных железодефицитной анемией; выявить наследственную предрасположенность к развитию железодефицитной анемии.

Ключевые слова: железодефицитная анемия, полиморфизм гена цитохром Р450 1А1, наследственная предрасположенность

Kunafin M.S.¹,  Hunafin S.N.², Morozova A.A.³, Safuanova G.Sh.⁴, Husnutdinova Je.K.⁵

^1,2,4MD, 3PhD in Medicine, Bashkir State Medical University, ⁵PhD in Biology, Institute of Biochemistry and Genetics, UFA RAS

POLYMORPHISM OF GENE CYTOCHROME Р450 1А1 IN PATIENTS WITH IRON-DEFICIENCY ANEMIA IN BASHKORTOSTAN REPUBLIC

Abstract

The aim of investigation: clinic-genetics associations analysis in patients with iron-deficiently anemia, assess of information of genetic markers and substantiation its significance in prediction of disease predisposition.

Tasks of investigation:  perform complex assess of risk factors of growth iron-deficiently anemia and clinic-genetics of course disease; investigate polymorphism of gene cytochrome Р450 1А1 in patients with iron-deficiently anemia; detect hereditary predisposition to iron-deficiently anemia.

Keywords: iron-deficiently anemia, polymorphism of gene cytochrome Р450 1А1, hereditary predisposition.

Железодефицитная анемия (ЖДА), как крайняя степень недостаточности железа в организме, представляет актуальную проблему здравоохранения и медицинской науки, что  объясняется широким распространением этого заболевания среди населения земного шара (2). Эта проблема остается актуальной  и в Республике Башкортостан. Рассматривая ЖДА как мультифакториальное заболевание и учитывая возможную роль генетических факторов в развитии ЖДА, нами проведено изучение полиморфизма гена цитохром Р450 1А1 (CYP1A1) ,  участвующего в патогенезе заболевания (1).

Материалы и методы исследования. Под наблюдением находилось 102 женщины с хронической ЖДА, в возрасте от 16 до 63 лет (средний возраст 40,34±0,76 лет), которые получали лечение в гематологических и терапевтических отделениях стационаров Уфы. Контрольную группу составили 105 практически здоровых женщин  (средний возраст 40,34±0,76 лет).

Исследование включало общие клинические методы обследования, показатели феррокинетики. Молекулярно-генетические исследования проводили в лаборатории молекулярной генетики человека Института биохимии и генетики УНЦ РАН. Материалом для исследования служили образцы ДНК, которую выделяли из лимфоцитов периферической венозной крови методом фенольно-хлороформной экстракции. Анализ полиморфных локусов гена CYP1A1 проводили методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на термоциклере в автоматическом режиме с использованием локусспецифических олигонуклеотидных  праймеров. Визуализацию результатов амплификации и последующей рестрикции осуществляли в 6-7% полиакриламидном геле. Анализ полиморфизма гена CYP1A1 проведен по В.С.Баранову и соавт. (1999).

Установлено, что распределение частот генотипов гена CYP1A1 у больных ЖДА существенно отличалось от контрольной группы (χ²=5,57; р=0,044): у больных ЖДА частота гетерозигот составляла 16,12%, что в 2,5 раза превышает аналогичный показатель в контрольной группе – 5,71% (ОР=2,54).

Частота аллелей гена  CYP1A1 характеризовалась преобладанием аллеля Val у больных ЖДА по сравнению с контрольными индивидами (10,21% и 4,29% соответственно)) (ОР=3,17). В результате анализа данных о связи Ile/Val полиморфизма гена CYP1A1 с тяжестью ЖДА существенных различий в распределении частот генотипов и аллелей не обнаружено. Так, частота носителей  варианта Ile/Val гена CYP1A1 среди больных со среднетяжелой формой заболевания составила 14,89%, тогда как среди пробандов с тяжелым течением ЖДА – 17,39% (χ²=0,15; р=0,95). Наряду с этим, доля индивидов, гомозиготных по аллелю Val, в сравниваемых группах оказалась практически одинаковой (2,13% среди больных со среднетяжелой формой ЖДА и 2,17% у с тяжелой формой заболевания).

Анализ полиморфизма гена CYP1A1 у больных ЖДА с учетом возраста начала первых клинических проявлений заболевания показал, что в группе больных с ранней манифестацией ЖДА (до 19 лет) повышена частота гетерозиготных носителей аллелей Ile/Val до 25% по сравнению с другими группами, где частота гетерозигот колебалась от 1,29% (20-29 лет) до 18,75% (40 и более лет). При анализе ассоциации гематологических и биохимических показателей крови и частот генотипов гена CYP1A1 выявлено, что у гомозигот о мутации обнаружено достоверное снижение количества ретикулоцитов до 67,2±1,56 г/л и холестерина до 2,7±0,01 ммоль/л по сравнению с соответствующими показателями генотипов Ile/Ile (10,9±0,95‰,р<0,001; 74,5±0,59 г/л, р<0,001;3,98±0,09 ммоль/л, р<0,001) и Ile/Val (12,7±2,82‰,р<0,001; 76,4±1,66 г/л, р<0,001;3,8±0,19 ммоль/л, р<0,001). Вероятно, у больных, гомозиготных носителей мутации гена CYP1A1, отмечаются боле выраженные  проявления неэффективного эритропоэза и изменения функционального состояния печени.

Таким образом, наличие в генотипе мутантной формы Val гена цитохрома Р-4501А1 связано с предрасположенностью к железодефицитной анемии.

Литература

1. Морозова А.А. Изучение генетических факторов в развитии железодефицитных анемий /А.А. Морозова, Г.Ш.Сафуанова, Э.К. Хуснутдинова // Тезисы докладов межрегиональной научно-практической конференции «Здоровье молодежи на рубеже XXI века». – Уфа, 2000. – С.66-67.
2. Сафуанова Г.Ш. Клиника, диагностика и лечение анемий: учебно-методическое пособие. - Уфа, 2001. – 63с.

References

1. Morozova A.A. Izuchenie geneticheskih faktorov v razvitii zhelezodeficitnich anemii / A.A. Morozova, G.Sh. Safuanova, E.K. Husnutdinova // Tezisy dokladov mezhregionalnoy nauchno-prakticheskoy konferencii «Zdorov’e molodezhi na rubezhe XXI veka». – Ufa,2000. – P.66-67.
2. Safuanova G.Sh. Klinica, diagnostic i lechenie anemii: uchebno-metodicheskoe posobie. - Ufa,2001. – 63 p.