АНАЛИЗ НЕКОТОРЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ СЕЛЕЗЕНКИ ВОЗРАСТНЫХ КОШЕК В МАКРО- И МИКРОСКОПИЧЕСКОМ АСПЕКТЕ

Макаренко Е.С.

Аспирант кафедры биологии, экологии, гистологии ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», г. Санкт-Петербург.

АНАЛИЗ НЕКОТОРЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ СЕЛЕЗЕНКИ ВОЗРАСТНЫХ КОШЕК В МАКРО- И МИКРОСКОПИЧЕСКОМ АСПЕКТЕ

Аннотация

В статье описаны особенности морфологии селезенки кошек в возрасте 7-16 лет. В результате проведенной работы установлено, что селезенка кошек имеет определенную топографию, которая не изменяется в процессе онтогенеза. Селезенка кошки имеет лентовидную форму, с узким дорсальным  и широким вентральным концом. Цвет темно-вишневый, капсула в норме блестящая, гладкая. Ее париетальная поверхность гладкая, на висцеральной поверхности находятся ворота селезенки. В области ворот селезенка относительно рыхло связана с большим сальником. Селезенка всегда прилежит к левой стороне брюшной стенки. Ее положение в значительной степени зависит от наполнения желудка и собственного функционального состояния. Кроме того, приведены показатели промеров и массы данного органа.

Особый акцент сделан на микроструктуре данного органа, в частности на изменениях, происходящих при старении.  Проведен анализ клеточного состава красной и белой пульпы с использованием обзорных методик. Установлено, что у старых кошек отсутствует четкое подразделение фолликулов селезенки на зоны. У старых кошек фолликулы белой пульпы немногочисленны и не имеют выраженного подразделения между мантийной и маргинальной зоной; представлены лимфоцитами В- и Т-популяций, макрофагами (в светлых центрах и маргинальной зоне) и плазмоцитами (преимущественно в светлых центрах).Большое внимание в данной работе уделено морфометрическому анализу трабекул и капсулы. Отмечено, что толщина капсулы имеет менее вариабельные значения, по сравнению с толщиной трабекул. Кроме того, результаты проведенных измерений демонстрируют увеличение толщины капсулы и трабекул по сравнению со зрелыми и молодыми особями. Морфометрические данные приведены в сводных таблицах.

Ключевые слова: селезенка,  трабекулы, капсула, кошка, морфология.

Makarenko E.S.

Postgraduate Student of the Department of Biology, Ecology, Histology, St. Petersburg State Academy of Veterinary Medicine, St. Petersburg.

ANALYSIS OF CERTAIN MORPHOLOGICAL CHANGES OF MATURE CATS’ SPLEEN IN MACRO- AND MICROSCOPIC ASPECT

Abstract

The article describes the morphology of the spleen of cats aged 7-16 years. As a result of the work, it was established that cats’ spleen has a certain topography that does not change during ontogenesis. Cats’ spleen has a ribbon-like shape with a narrow dorsal and a wide ventral end. Its colour is dark cherry; the capsule is normally shiny and smooth. Its parietal surface is smooth, too. There are the gates of the spleen on the visceral surface. Spleen is relatively loosely associated with a large omentum in the area of the gate. Spleen is always attached to the left side of the abdominal wall. Its position largely depends on the filling of the stomach and its functional state. In addition, the parameters of the measurements and mass of this organ are given.

Special emphasis is placed on the microstructure of the body, in particular, on the changes that occur during aging. The analysis of the cellular composition of red and white pulp was carried out with the help of the survey methods. It is established that old cats lack a clear division of the spleen follicles into zones. The white pulp follicles of old cats are few and do not have a distinct division between the mantle and marginal zone; they are represented by lymphocytes of B- and T-populations, macrophages (in bright centres and marginal zone) and plasmocytes (mainly in bright centres). Much attention is paid to the morphometric analysis of trabecula and capsules. It is noted that the thickness of the capsule has less variable values, compared with the thickness of the trabecula. In addition, the results of the measurements showed an increase in the thickness of the capsule and trabecula in comparison with mature and young individuals. Morphometric data are provided in summary tables.

Keywords: spleen, trabecula, capsule, cat, morphology.

В настоящее время существует не так много работ, где описано гистологическое строение селезенки кошек. [1], [2], [9]. Причем, говоря о микроструктуре, авторы обычно не берут во внимание возрастные особенности морфологии, как, например, в работах, посвященных другим видам животных[3], либо, относящихся к гуманной медицине [8].

В связи с этим, задачей данной работы явилось макроскопическое описание и предоставление данных по микроструктуре селезенки у кошек в возрасте 7-16 лет.

Материалы и методы исследования. Материалом для исследования служила селезенка кошек в возрасте от 7 до 16 лет погибших в результате неинфекционных заболеваний. При отборе материала производилось измерение и взвешивание органа. Для гистологического исследования материал фиксировался в 10% нейтральном формалине и заливался в парафин  по общепринятой методике. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, а также пикрофуксином  по Ван-Гизону. Микрофотографии сделаны с помощью ToupViewCam. 3 на микроскопе ЛОМО. Статистическая обработка данных проводилась в программе MS Excel 2010.

Результаты. Селезенка кошки имеет лентовидную форму, с узким дорсальным  и широким вентральным концом. Цвет темно-вишневый, капсула в норме блестящая, гладкая. Ее париетальная поверхность гладкая, на висцеральной поверхности находятся ворота селезенки. В области ворот селезенка относительно рыхло связана с большим сальником.

Селезенка всегда прилежит к левой стороне брюшной стенки. Ее положение в значительной степени зависит от наполнения желудка и собственного функционального состояния. [5,10]. Исходя из наших наблюдений, топография селезенки у кошек не меняется с возрастом, как, например, топография поджелудочной железы и почек[4,6].

Данные по морфометрическим показателям селезенки кошек представлены в таблице 1.

 

Таблица 1 – Масса селезенки кошек выбранной группы

№ п/п	Животное	Пол	Вес, кг	Возраст	Масса селезенки, кг	Промеры, см	Относи-тельная масса
1	Кошка №1	М	6	9	0,005	7х3х0,3	0,0008
2	Кошка №5	М	3,2	15	0,004	12х1,5х0,9	0,0012
3	Кошка №7	М	1,2	11 лет	0,003	7х1,5(2)х0,1	0,0025
4	Кошка №12	М	2,4	13 лет	0,005	9х2,5(2)х0,2	0,0021
5	Кошка №15	Ж	3	16 лет	0,006	9х2,5(1,5)х0,3	0,0020
6	Кошка №23	Ж	1,7	15 лет	0,004	8х3(1)х0,2	0,0024
7	Кошка №24	Ж	1,9	7 лет	0,006	9х2(1)х0,2	0,0032

 

Следует отметить, что в настоящий момент нет единого мнения относительно промеров и массы селезенки кошки. У различных авторов данные весьма варьируются [1], [5], [9]. На наш взгляд этот вопрос нуждается в доработке. Возможно, целесообразно создать дополнительное подразделение групп в зависимости от породы.

Селезенка кошки относится к селезенкам смешанного типа [9].Строма органа представлена ретикулярными клетками, которые вместе с ретикулярными волокнами создают сеть, где залегают клетки белой и красной пульпы. К белой пульпе относятся периартериальные лимфоидные муфты (ПАЛМ) и лимфоидные фолликулы. В лимфоидных фолликулах разделяют 4 зоны: периартериальную зону, мантийную зону, светлый центр и маргинальную зону, отграниченную от окружающей красной пульпы краевыми синусами. Согласно литературным данным [8] периартериальная лимфоидная зона является тимус-зависимой зоной, т.е. там преобладают Т-лимфоциты. Мантийная зона является тимус-независимой, там преобладают В-лимфоциты. Светлый центр состоит из активированных В-клеток, плазмоцитов, а также макрофагов и дендритных клеток. В маргинальной зоне преобладают макрофаги, В-клетки и NK-клетки. Известно, что морфологически лимфоциты также неоднородны [7]. Различают малые лимфоциты с крупным ядром и узким ободком цитоплазмы и, так называемые, большие гранулярные лимфоциты. Большинство Т-хелперов и цитотоксических Т-клеток относятся к малым лимфоцитам. К большим гранулярным лимфоцитам относят NK-клетки, а также особая популяция Т-лимфоцитов – g/d-Т-клетки, функция которых не до конца ясна.  Известно лишь, что они присутствуют в коже, стенке половых путей, периферических лимфоидных органах, а также в стенке желудочно-кишечного тракта.  Их количество зависит от вида животного. Например, у собак эти клетки могут составлять до 1/3 клеточной популяции селезенки [7]. У кошек данная популяция лимфоцитов еще мало описана.

У кошек выбранной возрастной группы фолликулы белой пульпы немногочисленны и не имеют выраженного подразделения между периартериальной, мантийной и маргинальной зоной. Однако светлые центры выражены отчетливо. Первые три зоны морфологически представлены преимущественно малыми лимфоцитами. В условной маргинальной зоне также можно обнаружить макрофаги. Краевые синусы слабо выражены. Светлые центры представлены также малыми лимфоцитами, хорошо различимыми плазматическими клетками, а также макрофагами и дендритными клетками. Периартериальные лимфатические муфты встречаются гораздо чаще и легко отличимы от фолликулов по центральному расположению центральной артерии (в фолликулах она расположена эксцентрично). ПАЛМ у кошек выбранной возрастной группы состоят из плотных скоплений малых лимфоцитов.

Красная пульпа представлена селезеночными тяжами, разделенными синусоидными капиллярами. В селезеночных тяжах помимо большого количества эритроцитов и тромбоцитов, встречаются полиморфно-ядерные лейкоциты: в большинстве – нейтрофилы; единичные эозинофилы и базофилы. Мегакариоциты встречаются очень редко в виде исключения, не более 1 клетки в поле зрения. Также обнаруживаются лимфоциты, плазмоциты, макрофаги и тучные клетки, или лаброциты. Последние, помимо всего прочего, встречаются в адвентиции крупных сосудов, в капсуле, вблизи трабекул, иногда в самих трабекулах. Лаброциты кошек представляют собой крупные (15-20 мкм) клетки с крупными гранулами, которые при окраске по Доминичи окрашиваются метахроматически (гранулы окрашиваются в фиолетовый цвет).В красной пульпе они лежат одиночно, реже – группами по 2-4 клетки. Причем клетки, находящиеся в стенке сосудов и в трабекулах часто находятся в состоянии дегрануляции, в то время как лежащие в паренхиме обычно не имеют признаков активации. Тучные клетки принято делить на две популяции: тучные клетки слизистых оболочек (ТКСО) и соединительнотканные тучные клетки (СТТК). Они различаются по набору ферментов, размеру гранул, тинкториальным свойствам и реакции на фармакологические препараты [7]. И если лаброциты в стенке сосудов, теоретически, можно отнести к соединительнотканным тучным клеткам, то лаброциты паренхимы не попадают под определение (по крайней мере – по локализации) ни соединительнотканных тучных клеток, ни тучных клеток слизистых оболочек. Очевидно, что данный феномен требует дальнейших исследований.

Что касается сосудистого компонента селезенки, то можно сказать, что сосудистая сеть селезенки кошек хорошо развита.Вообще, закономерность ветвления сосудов селезенки, характерная для млекопитающих наблюдается и у кошки в том числе [9,10].В ворота селезенки впадает селезеночная артерия, распадающаяся на трабекулярные артерии, проходящие, как следует из названия, в трабекулах. Трабекулярные артерии выходят в пульпу, где уже носят название пульпарных артерии. Постепенно их диаметр уменьшается, а вокруг их наружной оболочки собираются скопления малых лимфоцитов, артерия, в свою очередь, становится центральной. Центральная артерия продолжает ветвиться и дает многочисленные малые ответвления – кисточковые артериолы. Последние переходят в синусоидные капилляры, некоторые из которых обрастают оболочкой из макрофагов. Капилляры имеют два пути ветвления: одни оканчиваются прямо в селезеночных тяжах, другие собираются в венулы: пульпарные, затем трабекулярные. В итоге они объединяются в селезеночную вену.

Обращает на себя внимание наличие множества массивных трабекул, имеющих в своем составе гладкомышечные волокна. Трабекулы, сливаясь между собой, образуют разветвленную систему перегородок. Капсула также достаточно толстая, состоит из коллагеновых волокон с залегающими между ними фиброцитами; снаружи капсула покрыта мезотелием. В таблице 2 отражены данные по измерениям толщины трабекул и капсулы селезенки.

 

Таблица 2 – Толщина капсулы и трабекул селезенки выбранной группы

№ п/п	Животное	Возраст	Толщина трабекул, мкм	Толщина капсулы, мкм
1	Кошка №1	9	60,05±21,8	73,41±16,24
2	Кошка №5	15	110,52±54,52	99,13±29,35
3	Кошка №7	11	125,86±65,37	70,46±14,13
4	Кошка№12	13	91,18±33,26	81,33±13,15
5	Кошка №15	16	101,69±51,04	94,94±25,18
6	Кошка №23	15	90,04±50,74	66±15,99
7	Кошка  №24	7	120,51±51,88	98,69±22,82

 

Как видно из таблицы толщина капсулы имеет менее вариабельные значения, по сравнению с толщиной трабекул. Это, вероятно, связано, с тем, что в последних проходят трабекулярные артерии и вены, увеличивая тем самым толщину самой трабекулы.

Таким образом, селезенка кошек с возрастом не меняет свою топографию. При этом значительно изменяется микроструктура: стираются границы зон лимфатических фолликулов, а также увеличивается толщина и количество трабекул.

Список литературы / References

1. Вишневская Т. Я. Особенности морфологии селезенки кошки / Вишневская Т. Я. // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2012. – Т. 3. – № 35-1. – С. 256-258;
2. Вишневская Т. Я. Селезёнка кошки в аспекте гистофизиологии лимфоидной ткани и микрососудов / Вишневская Т. Я., Капинус В. В. // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2011. –Т.  – № 31-1. – С. 342-345;
3. Завалеева С.М. Возрастные изменения гистологических показателей селезёнки кролика / Завалеева С.М., Садыкова Н.Н., Чиркова Е.Н. // Вестник Оренбургского государственного университета. – 2013. – № 6 (155). – С. 18-20;
4. Матвеев О.А. Возрастные изменения топографии почек у беспородных кошек / Матвеев О.А. // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2007. – Т. 4. – № 16-1. – С. 113-114;
5. Ноздрачев А. Д. Анатомия кошки / А. Д. Ноздрачев. – М.: Наука, 1973. – 248 с.;
6. Подпорин А.А. Возрастные изменения топографии поджелудочной железы домашней кошки / Подпорин А.А., Дегтярёв В.В. // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2012. – Т. 2. – № 34-1. – С. 94-96;
7. Ройт А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. – 592 с.;
8. Рябикина А.И. Гистофизиология Т-клеточных компартментов белой пульпы селезенки в возрастном аспекте / Рябикина А.И. [и др.] // Современные наукоемкие технологии. – 2008. – № 2. – С. 13;
9. Федоровская Н. С. Атлас селезенки (видовые особенности у человека и млекопитающих животных) / Н. С. Федоровская [и др.]. – Киров: Аверс, 2011. –124 с.;
10. Фольмерхаус Б. Анатомия собаки и кошки / Б. Фольмерхаус, Й. Фревейн; пер. с нем. Е. Болдырева, И. Кравец.– М.: «АКВАРИУМ БУК», 2003. – 580 с.

Список литературы на английском языке / ReferencesinEnglish

1. Vishnevskaja T. Ja. Osobennosti morfologii selezenkikoshki [Features of the cat’s spleen morphology] / Vishnevskaja T. Ja. // Izvestija Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Tidings of the Orenburg State Agrarian university]. – 2012. – V. 3. – № 35-1. – P. 256-258. [in Russian]
2. Vishnevskaja T. Ja. Selezjonka koshki v aspekte gistofiziologii limfoidnoj tkani I mikrososudov [Cat’s spleen in the aspect of histophysiology of thelymphoid tissue and microvessels] / Vishnevskaja T. Ja., Kapinus V. V. // Izvestija Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Tidings of the Orenburg State Agrarian university]. – 2011. – V. 3. – № 31-1. – P. 342-345. [in Russian]
3. Zavaleeva S.M. Vozrastnye izmenenija gistologicheskih pokazatelej selezjonki krolika [Age-related changes of histological marks in rabbit’s spleen] / Zavaleeva S.M., Sadykova N.N., Chirkova E.N. // Vestnik Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Messenger of the Orenburg State Agrarian university]. – 2013. – № 6 (155). – P. 18-20. [in Russian]
4. Matveev O.A. Vozrastnye izmenenija topografii pochek u besporodnyh koshek [Age-related changes of the kidneys’ topography in crossbreed cats] / Matveev O.A. // Izvestija Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Tidings of the Orenburg State Agrarian university]. – 2007. – V. 4. – № 16-1. – P. 113-114. [in Russian]
5. Nozdrachev A. D. Anatomija koshki [The Cat’s Anatomy] / A. D. Nozdrachev. – M.: Nauka, 1973. – 248 p. [in Russian]
6. Podporin A.A. Vozrastnye izmenenija topografii podzheludochnoj zhelezy domashnej koshki [Age-related changes of the pancreas topography in domestic cat] / Podporin A.A., Degtjarjov V.V. // Izvestija Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta [Tidings of the Orenburg State Agrarian university]. – 2012. – V. 2. – № 34-1. – P. 94-96. [in Russian]
7. Rojt A. Immunologija [Immunology] / A. Rojt, Dzh. Brostoff, D. Mejl. M.: Mir, 2000. – 592 p. [in Russian]
8. Rjabikina A.I. Gistofiziologija T-kletochnyh kompartmentov beloj pul'py selezenki v vozrastnom aspekte [Histophysiology of the T-cells’ compartments of the splenic white pulp in age-related aspect] / Rjabikina A.I. [et al.] // Sovremennye naukoemkie tehnologii [The Modern Knowledge-intensive Technologies] . – 2008. – № 2. – P. 13. [in Russian]
9. Fedorovskaja N. S. Atlas selezenki (vidovye osobennosti u cheloveka i mlekopitajushhih zhivotnyh) [Atlas of Spleen (specific features in human and mammalian animals)] / N. S. Fedorovskaja [et al.]. – Kirov: Avers, 2011. –124 p. [in Russian]
10. Fol'merhaus Anatomija sobaki i koshki  [The Cat’s and Dog’s Anatomy]/ B. Fol'merhaus, J. Frevejn; translated from German E. Boldyreva, I. Kravec. – M.: «AKVARIUM BUK», 2003. – 580 p. [in Russian]