Pages Navigation Menu
Submit scientific paper, scientific publications, International Research Journal | Meždunarodnyj naučno-issledovatel’skij žurnal

ISSN 2227-6017 (ONLINE), ISSN 2303-9868 (PRINT), DOI: 10.18454/IRJ.2227-6017
ЭЛ № ФС 77 - 80772, 16+

Download PDF ( ) Pages: 73-75 Issue: № 1 (20) Part 4 () Search in Google Scholar
Cite

Cite


Copy the reference manually or choose one of the links to import the data to Bibliography manager
Mezhenny P. V., "DESIGNING OF PREPARATIONS ON THE BASIS OF COLLOIDAL CARRIERS AND AN ANTI-GENE OF A VIRUS OF MURRAIN DISEASE VP-1". Meždunarodnyj naučno-issledovatel’skij žurnal (International Research Journal) № 1 (20) Part 4, (2019): 73. Thu. 23. May. 2019.
Mezhenny, P. V. (2019). KONSTRUIROVANIE PREPARATOV NA OSNOVE KOLLOIDNYH NOSITELEY I ANTIGENA VIRUSA YASCHURA VP-1 [DESIGNING OF PREPARATIONS ON THE BASIS OF COLLOIDAL CARRIERS AND AN ANTI-GENE OF A VIRUS OF MURRAIN DISEASE VP-1]. Meždunarodnyj naučno-issledovatel’skij žurnal, № 1 (20) Part 4, 73-75.
Mezhenny P. V. DESIGNING OF PREPARATIONS ON THE BASIS OF COLLOIDAL CARRIERS AND AN ANTI-GENE OF A VIRUS OF MURRAIN DISEASE VP-1 / P. V. Mezhenny // Mezhdunarodnyj nauchno-issledovatel'skij zhurnal. — 2019. — № 1 (20) Part 4. — С. 73—75.

Import


DESIGNING OF PREPARATIONS ON THE BASIS OF COLLOIDAL CARRIERS AND AN ANTI-GENE OF A VIRUS OF MURRAIN DISEASE VP-1

Меженный П.В.

Аспирант, Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова

КОНСТРУИРОВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ КОЛЛОИДНЫХ НОСИТЕЛЕЙ И АНТИГЕНА ВИРУСА ЯЩУРА VP-1

Аннотация

В статье рассмотрено – конструирование препаратов на основе коллоидных носителей: золота, селена, полного адъюванта Фрейда и антигена вируса ящура VP-1. Проведены иммунобиологические исследования данных систем.

Ключевые слова: полный адъювант Фрейда, Антиген (АГ), вирус ящура VP-1, коньюгат.

Mezhenny P. V.

Postgraduate student, Saratov state agrarian university of N. I. Vavilov

DESIGNING OF PREPARATIONS ON THE BASIS OF COLLOIDAL CARRIERS AND AN ANTI-GENE OF A VIRUS OF MURRAIN DISEASE VP-1

Abstract

In article – design drugs based on colloidal carriers: gold, selenium, Freund’s complete adjuvant and antigen FMD virus VP-1. Immunobiologicheskie conducted research data systems.

Keywords: Freud’s full adjuvant, Antigen (AG),virus VP-1, konyyugat.

В последнее время, мировое научное сообщество заметно активизировало исследования в области иммунобиотехнологии [6,7].   Использования нано материалов, а именно коллоидных частиц и полимерных матриц стало очень актуальным [1,2,3].

Возможность доставлять в организм лекарственные средства с меньшей концентрацией активного вещества, не теряя при этом своих полезных свойств, весьма перспективна. Бесспорно, наночастицы имеют множество положительных свойств: их можно легко транспортировать, присоединять к их поверхности диагностические и терапевтические вещества, а так же иммуноактивные биомолекулы [4].

Одним из направлений в изучении адресной доставке при помощи коллоидных частиц является конструирование новых или улучшение старых вакцин [5]. Основными плюсами является: уменьшения количества антигена поступающего в организм, направленность действия и сокращения времени иммунного ответа организма.

Нами были сконструированы прототипы вакцинных препаратов на основе коллоидных частиц селена и золота (выполняющих роль нано размерного носителя). На поверхность наночастиц конъюгировали синтезированный протективный белок капсида вируса ящура VP-1, который растворяли в 0,01 М фосфатно-солевом буфере рН 7,2, до концентрации 1 мг/мл.

Для освобождения молекул антигена от ионов металлов проводили диализ  водного раствора антигена в ацетатном буфере рН 4,0. К 1 мл раствора антигена добавляли 25 мкл 1 М раствор солянокислого гидразина и 6,25 мкл 1М раствора неорганических соединений селена (селенит натрия). Доводили общий объем раствора до 2 мл дистиллированной водой. Останавливали реакцию доведением рН раствора до 7,2 1М раствором гидроксида натрия (100 мкл). Препарат освобождали от низкомолекулярных соединений диализом против фосфатно-солевого  буфера рН 7,2.

Получение коньюгата АГ с коллоидным золотом выполняли путем смешивания равных объемов АГ с раствором коллоидного золота.

Для проведения иммунобиологических исследований было сформировано по принципу аналогов 5 групп животных – морских свинок, по 3 головы в каждой. Иммунизацию животных проводили подкожно  вдоль позвоночного столба, двукратно, с интервалом 10 дней.

Первой группе вводили коммерческую противоящурную вакцину согласно инструкции по применению в дозе 0,5 мл.

Вторая группа – коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом и полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1, в дозе 1 мл.

Третья группа – коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом, в дозе 1 мл.

Четвертая группа – раствор антигена вируса ящура VP-1с полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1, в дозе 1 мл.

Пятая группа – коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным селеном и полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1, в дозе 1 мл.

Эвтаназию морских свинок проводили через 10 дней после последней инъекции. При этом брали кровь для биохимических и иммунологических исследований. Для оценки влияния препаратов на клеточный иммунитет, определяли дыхательную активность перитонеальных макрофагов в МТТ тесте. На гуморальный иммунитет, определяли дыхательную активность лимфоцитов селезенки в МТТ тесте.

Таблица 1 – Влияние препаратов на основе коллоидных частиц и вирусного антигена на клеточный иммунитет

Группа Концентрация формазана

в 1 ПКК, нг

Концентрация формазана

в 1 лимфоците, нг

Вакцина 16,00±7,90 1,26±0,38
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом и полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1 8,37±2,31 1,12±0,33
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом 8,16±3,57 0,71±0,06
Раствор антигена вируса ящура VP-1с полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1 13,71±2,44 1,02±0,07
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным селеном и полным адъювантом Фрейда в соотношении 1:1 10,37±3,94 1,10±0,30

 

В ходе проведенных исследований установлено, что в группе животных которым вводили коллоидное золото коньюгированное с антигеном дыхательная активность спленоцитов достоверно ниже, чем в остальных группах животных (табл. 1). Данный факт может свидетельствовать о том, что полный адъювант Фрейда с которым вводили антигены в 1,2,4 и 5 группах животных создает определенное депо в месте введения, тем самым способствует пролонгации эффекторной фазы иммунного ответа на введенный антиген. Наряду с этим, дыхательная активность перитонеальных макрофагов одинаковая во всех группах животных. Отклонений основных биохимических показателей не отмечается, что указывает на отсутствие отрицательного влияния вводимых препаратов на основные физиологические функции животных.

Таблица 2 – Влияние препаратов на основе коллоидных частиц и вирусного антигена на лимфоидное звено иммунитета

Группа Т, л/ф Тх Тс Тх/Тс Вл Ло
Вакцина 72,0±8,0 66,7±9,1 5,3±3,2 12,5±2,8 8,0±2,0 20,0±6,0
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом и полным адьювантом фрейда в соотношении 1:1 76,3±5,0 69,3±3,8 7,0±1,7 9,9±2,1 7,0±1,0 16,7±4,0
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным золотом 72,7±5,5 64,7±7,4 8,0±2,0 8,08±3,6 8,7±1,5 18,7±4,2
Раствор антигена вируса ящура VP-1с полным адьювантом фрейда в соотношении 1:1 70±1,4 68,5±3,5 8,5±0,7 8,06 ±5 7,5±0,7 23±2,8
Коньюгат антигена вируса ящура VP-1с коллоидным селеном и полным адьювантом фрейда в соотношении 1:1 71,7±7,6 65,3±5,9 6,3±2,1 10,31±2,8 7,3±1,5 21,0±6,2

 

При исследовании влияния исследуемых препаратов на лимфоидное звено иммунитета установлено, что иммунорегуляторный индекс (соотношение Тх/Тс) во всех группах животных достаточно высокий, что указывает на способность вышеприведенных систем наряду с вакциной реализовать индуктивную фазу адаптивного иммунного ответа (табл. 2). О чем свидетельствует повышение численности Т-хелперов, которые являются главной эффекторной клеточной популяцией в формировании противовирусного иммунитета, путем активации макрофагов участвующих в ликвидации вируса, а также помогают вовлечению в иммунный процесс остальных лимфоцитов для формирования специфического иммунного ответа.

Заключение. Используя коллоидные частицы селена и золота представляется возможным создания химических вакцин. В эксперименте было подтверждено иммуногенное действия конъюгатов наночастиц селена и золота с антигеном. Установлено, что конъюгаты коллоидного селена и золота с антигеном при введении в организм животного способны формировать адекватный иммунный ответ организма при минимальных концентрациях вирусного антигена.

Литература

  1. Башкирова Е.В., Путина С.Н., Волков А.А., [и др.] Конструирование инъекционной формы на основе силимарина и изучение ее биодинамических и токсикологических свойств. Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. 2013. № 08. С. 4-6. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=20253696
  2. Исаева А.Ю., Староверов С.А., Волков А.А. [и др.]. Изучение биологических свойств наноразмерной структуры на основе коллоидного селена in vitro // Ветеринарная патология. 2012. № 3 (41). С.111-114. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=18047494
  3. Исаева А.Ю., Староверов С.А., Волков А.А. [и др.]. Конструирование наноразмерной структуры на основе коллоидного селена // Ветеринарная патология. 2012. № 3 (41). С. 114-117. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=18047495
  4. Козлов С.В., Фомин А.С., Степанов В.С. [и др.] Конструирование коллоидного комплекса селена с лактоферрином и изучение его биодинамических свойств // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2012. № 1. С. 27-32. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=17362200
  5. Меженный П.В., Староверов С.А., Волков А.А., Козлов С.В., Ласкавый В.Н., Дыкман Л.А., Исаева А.Ю. Конструирование конъюгатов коллоидного селена и коллоидного золота с белком вируса гриппа и изучение их иммуногенных свойств //Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. 2013. № 02. С. 29-32.
  6. Староверов С.А., Фомин А.С., Волков А.А., [и др.] Использование фаговых мини-антител для определения концентрации ферритина в сыворотке крови животных // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2012. № 4. С. 30-33. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=18236798
  7. Фомин А.С., Малинин М.Л., Василенко О.А., [и др.] Изучение механизмов токсического воздействия туберкулина PPD на клетки иммунной системы лабораторных животных // Ветеринарная патология. 2011. № 3. С. 78-84. – Режим доступа: http://elibrary.ru/item.asp?id=16920839

Leave a Comment

Your email address will not be published. Required fields are marked *

Лимит времени истёк. Пожалуйста, перезагрузите CAPTCHA.